间充质干细胞用于治疗骨关节炎的用途制造技术

本发明专利技术关于一种经低氧培养的间充质干细胞(MSCs)在制造一种用于治疗肌肉骨骼疾病，尤其是骨关节炎的细胞移植物的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】间充质干细胞用于治疗骨关节炎的用途
本专利技术整体而言涉及一种将经低氧培养的间充质干细胞用于制造一种可治疗肌肉骨骼疾病的细胞移植物的新用途。尤其是，该肌肉骨骼疾病是骨关节炎。
技术介绍
在许多国家中，骨关节炎(OA)是越来越普遍的关节疾病。已知，可使用一些抗发炎药物、镇痛剂、或润滑补充剂治疗OA。另可选择地，还可以一种包括钻孔、微骨折和自体骨软骨镶嵌移植术(mosaicplasty)的手术，进行缺损部位的修复或重建以治疗OA，但这种方式仅能暂时改善症状，无法永久治愈或使退化组织再生。据报导，可使用透明质酸(HA)于治疗OA。虽然由关节腔内注射HA治疗OA，HA在保护软骨及防止膝盖OA进展上的功效仍然存有争议。在某些研究中说明HA对于治疗OA的疗效并未被证实，而HA仅是提供润滑效果(Loetal.,Intra-articularhyaluronicacidintreatmentofkneeosteoarthritis:ameta-analysis.JAMA2003；290:3115-21)。报导中，经关节内注入HA后，因其会出现在关节表面，因而通过HA输送的前驱细胞或干细胞被认为是输送至关节表面。近来已发展出一种细胞治疗方法，包括移植细胞或组织工程的软骨，藉以协助关节软骨缺损的修复。据报导，可通过移植在单层细胞培养条件下的自体软骨细胞而成功地治疗膝盖软骨缺损(Brittbergetal.,Treatmentofdeepcartilagedefectsinthekneewithautologouschondrocytetransplantation.N.Engl.J.Med.1994；331:889-95)。在最近的报导中也说明，能自我更新并分化成各种间充质组织的间充质干细胞(MSCs)成为临床应用的一个有效的工具。举例而言，用于成骨不全的细胞治疗与软骨及骨的组织工程(Weietal.,Mesenchymalstemcellsinregenerativemedicineformusculoskeletaldisorders:bench,bedside,andindustry.CellTransplant.2014；23:505-12)。来自健康捐赠者的同种异体MSCs可作为“全适捐赠细胞”而用于治疗患有肌肉骨骼疾病的患者。然而，MSCs在本质上并非免疫赦免的，且同种异体的MSCs会被具有免疫活性的MHC-非配对的受赠者排斥(Eliopoulosetal.,AllogeneicmarrowstromalcellsareimmunerejectedbyMHCclassI-andclassII-mismatchedrecipientmice.Blood,2005；106:4057-65)。相比于在常氧条件下扩增的MSCs，其也称为常氧性MSCs，在低氧条件下所培养的MSCs，其也称为低氧性MSCs，其特征为具有长期且降低的复制性衰老性，而其增生速率及分化潜能则有所提高(Tsaietal.,Hypoxiainhibitssenescenceandmaintainsmesenchymalstemcellpropertiesthroughdown-regulationofE2A-p21byHIF-TWIST.Blood,2011；117:459-69)。在移植后，低氧性MSCs的细胞迁移性提高，并可移植至远程。低氧性MSCs也分泌较常氧性MSCs更多的促血管新生细胞激素及生长因子(Hungetal.,AngiogeniceffectsofhumanmultipotentstromalcellconditionedmediumactivatedthePI3K-Aktpathwayinhypoxicendothelialcellstoinhibitapoptosis,increasesurvival,andstimulateangiogenesis.StemCells,2007；25:2363-70)。由低氧性MSCs所获得的条件培养基已被应用于预防啮齿类动物的心律失常性猝死、促进伤口愈合及骨折愈合。近来的报导，低氧性MSCs可增加在同种异体宿主组织内的存活及移植能力，并通过抵抗宿主免疫排斥而改善肢体缺血(Huangetal.,Hypoxicmesenchymalstemcellsengraftandamelioratelimbischaemiainallogeneicrecipients.Cardiovasc.Res.2014；101:266-76)。低氧性MSCs也可应用于同种异体受赠者的骨骼修复及肌腱愈合(Huangetal.,MesenchymalstemcellsfromahypoxiccultureimproveandengraftAchillestendonrepair.Am.J.SportsMed.2013；41:1117-25)。然而，没有办法预期低氧MSCs的其他影响。
技术实现思路
本专利技术基于非预期性地发现经低氧培养的间充质干细胞(MSCs)可对肌肉骨骼疾病有效，尤其是骨关节炎。因此，本专利技术提供一种使用MSCs在制造一种用于治疗肌肉骨骼疾病，尤其是骨关节炎的细胞移植物的用途。另一方面，本专利技术提供一种用于治疗肌肉骨骼疾病的方法，其包含将一治疗有效量的由MSCs制得的细胞移植物施用至有需要的个体。本专利技术中，肌肉骨骼疾病选自韧带、肌腱、肌肉及软骨的扭伤、拉伤及撕裂伤、肌腱炎、腱鞘炎、纤维肌痛、骨关节炎、类风湿关节炎、风湿性多肌痛、滑囊炎、急性和慢性背痛、骨质疏松症、腕隧道症候群、狄魁文氏症(DeQuervains’sdisease)、扳机指、网球肘、肩袖撕裂、腱鞘囊肿、成骨不全症、裘馨氏(Duschennes)肌肉萎缩症、赫尔勒氏及亨特氏症候群、以及其合并症。在本专利技术的一个特定实施例中，肌肉骨骼疾病为骨关节炎。在本专利技术的一个特定实施例中，MSCs为经低氧培养的MSCs，其可由在低于10％氧气的低氧条件下培养自体或同种异体MSCs而获得。在本专利技术的一个实施例中，经低氧培养的MSCs通过在范围由0％至7％氧气，较佳为1％至3％氧气，更佳为约1％氧气的低氧条件下培养自体或同种异体MSCs而获得。在本专利技术的一或多个实施例中，该包含经低氧培养的MSCs的组合物通过直接移植、静脉内注射、肌肉内注射、骨内注射、腹腔内注射、皮内注射、皮下注射、或关节内注射而施用。在一特定实施例中，该包含经低氧培养的MSCs的组合物通过关节内注射或直接移植而施用。附图说明前述的本
技术实现思路
，以及以下的详细说明，将结合附图一起阅读而得到更佳的理解。在附图中：图1显示经低氧培养的MSCs用于处理兔子OA的实验设计。括号中的数字代表接受ACLT及分析的兔子数目。(CTR：对照组；H&E：苏木紫及伊红；S.O：番红O；P.B：普鲁士蓝)。图2A-2C显示经低氧培养的骨髓细胞的分化潜能。图2A显示成脂分化的结果，其中显微照片显示在诱导21天后的油红O(OilRedO)染色；比例尺＝50μm。图2B显示成骨分化的结果，其中显微照片显示在诱导21天后的茜素红S(AlizarinRedS)染色；比例尺＝100μm。图2C显示软骨分化的结果，其本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种经低氧培养的间充质干细胞(MSCs)在制造一种用于治疗肌肉骨骼疾病的细胞移植物的用途，其中经低氧培养的MSCs是由在低于10％氧气的低氧气条件下培养MSCs而获得。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.02.20 US 62/118,8271.一种经低氧培养的间充质干细胞(MSCs)在制造一种用于治疗肌肉骨骼疾病的细胞移植物的用途，其中经低氧培养的MSCs是由在低于10％氧气的低氧气条件下培养MSCs而获得。2.根据权利要求1所述的用途，其中该肌肉骨骼疾病选自韧带、肌腱、肌肉及软骨的扭伤、拉伤及撕裂伤、肌腱炎、腱鞘炎、纤维肌痛、骨关节炎、类风湿关节炎、风湿性多肌痛、滑囊炎、急性和慢性背痛、骨质疏松症、腕隧道症候群、狄魁文氏症(DeQuervains’sdisease)、扳机指、网球肘、肩袖撕裂、腱鞘囊肿、成骨不全症、裘馨氏(Duschennes)肌肉萎缩症、赫尔勒氏及亨特氏症候群。3.根据权利要求1所述的用途，其中该肌肉骨骼疾病为骨关节炎。4.根据权利要求1所述的用途，其中该MSCs为自体或同种异体MSCs。5.根据权利要求1所述的用途，其中该经低氧培养的MSCs通过在范围由0％至7％氧气的低氧气条件下培养MSCs而获得。6.根据权利要求1所述的用途，其中该经低氧培养的MSCs通过在范围由1％至7％氧气的低氧气条件下培养自体或同种异体的MSCs而获得。7.根据权利要求1所述的用途，其中该经低氧培养的MSCs通过在范围由1％至3％氧气的低氧气条件下培养自体或同种异体的MSCs而获得。8.根据权利要求4所述的用途，其中该MSCs为自体MSCs。9.根据权利要求1所述的用途，其中该经低氧培养的MSCs通过在1％氧气的低氧气条件下培养MSCs而获得。10.根据权利要求1、5、6、7及9所述的用途，其中该经低氧培养的MSCs通过以下步骤的方法而获得...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪士杰，
申请(专利权)人：洪士杰，
类型：发明
国别省市：中国台湾,71