一种高温裂解酶组合物制造技术

本发明专利技术提供一种高温裂解酶组合物，采用TSPpgh和MMPpgh组合，利用两种裂解酶具有的热稳定性，对高温下对栖热菌活菌体具有高效的裂解作用，而且在37℃，对大肠杆菌、芽孢杆菌活菌体也有杀灭效果。

A kind of high temperature lyase composition

The invention provides a high temperature lyase composition, using TSPpgh and MMPpgh combination, using the thermal stability of the two lysis enzymes, effectively cracking the living bacteria in the hot bacteria at high temperature, and killing the Escherichia coli and Bacillus spore living bacteria at 37.

【技术实现步骤摘要】
一种高温裂解酶组合物
本专利技术涉及生物工程
，尤指一种高温裂解酶组合物。
技术介绍
噬菌体被普遍认为是一类寄生在细菌中的病毒，也是生物界数量最为丰富的生命形式和庞大的基因资源库，依据其对宿主细胞生长的影响分为温和型及裂解型噬菌体，裂解型噬菌体能通过单一性地侵染宿主而实现自身的增值和宿主菌的裂解死亡，裂解酶为噬菌体感染宿主后期表达释放的一类细胞壁水解酶，通过水解细胞壁肽聚糖而使细菌裂解，并释放出子代噬菌体。噬菌体裂解酶的底物特异性和酶活性各异，根据其作用于细胞壁肽聚糖共价键位点不同，噬菌体裂解酶可大致分为葡糖苷酶、酰胺酶、内肽酶和转糖基酶。一般来说噬菌体裂解酶在结构上含有2个结构域：N端催化和C端特异性底物结合区。部分裂解酶含三个区域，即增加了中央区域的酰胺酶或糖苷酶、转糖苷酶结构域，但许多来源与革兰氏阴性细菌噬菌体的裂解酶仅含N端的崔化区，分子量较小，氨基酸数目在300个一下，裂解酶基因不论从种类和功能上都非常丰富，这也是噬菌体与细菌细胞壁结构多样协同进化的体现，云南腾冲热海具有丰富的高温菌资源，国家基金：30660009,30960022，项目组从腾冲热海科考热泉区45-9本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株栖热菌TSP4和一株亚栖热菌噬菌体MMP17（两者宿主均为革兰氏阴性细菌）噬菌体的基因表明，它们分别编码的裂解酶TSPpgh和MMPpgh均属于M23家族蛋白酶，且均含有LysM结构域，两者的蛋白序列相似性仅为21%；TSPpgh和MMPpgh的分子量分别为18.7Kda和23.7Kda；TSPpgh和MMPpgh基因克隆入表达载体pET‑28a质粒转化到大肠杆菌BL21菌株，IPTG诱导表达，经镍柱亲和层析纯化，透析获得纯酶；裂解酶TSPpgh可以从菌体外对TC16活菌体进行快速杀灭，杀灭效果100%，TSPpgh和MMPpgh在37℃下对革兰氏阳性菌和阴性菌均有杀灭作用；TSPpg...

【技术特征摘要】
1.一株栖热菌TSP4和一株亚栖热菌噬菌体MMP17（两者宿主均为革兰氏阴性细菌）噬菌体的基因表明，它们分别编码的裂解酶TSPpgh和MMPpgh均属于M23家族蛋白酶，且均含有LysM结构域，两者的蛋白序列相似性仅为21%；TSPpgh和MMPpgh的分子量分别为18.7Kda和23.7Kda；TSPpgh和MMPpgh基因克隆入表达载体pET-28a质粒转化到大肠杆菌BL...

【专利技术属性】
技术研发人员：王春，
申请(专利权)人：昆明三正生物科技集团有限公司，
类型：发明
国别省市：云南,53