The invention discloses a method for extracting antibacterial peptides from yeast fermentation broth. The concrete steps are as follows: dissolving plant degreasing protein powder in water, sterilizing, cooling to room temperature, inoculating beer yeast, adding Arabia sugar, cultivating yeast fermentation broth, adding chitosan oligosaccharides into the fermentation broth, oscillating adsorption, centrifugation, The clear liquid is concentrated, and freeze-drying is a polypeptide. The chitosan oligosaccharides are chitosan oligosaccharide magnetic particles. The preparation method is that the chitosan oligosaccharides are prepared by double enzyme hydrolysis and hydrogen peroxide degradation, adding Fe3O4 magnetic particles to the chitosan water solution, ultrasonic treatment, and then adding liquid paraffin and Twain 80, stirring, adding glutaraldehyde crosslinking, washing and drying, that is, the shell is obtained. Oligosaccharide magnetic particles. The beneficial effect is as follows: the extraction method of the antibacterial peptide of the invention is simple and feasible, the separation efficiency is high, the extraction efficiency, the yield and the purity are high, the bioactivity of the prepared antibacterial peptide is high, the bitterness and the color are shallow.
【技术实现步骤摘要】
一种从酵母菌发酵液中提取抗菌肽的方法
本专利技术涉及生物提取
,特别涉及一种从酵母菌发酵液中提取抗菌肽的方法。
技术介绍
自从抗生素被发现后,由于它具有良好的抑菌效果被广泛地应用于医疗、传统兽药和饲料添加剂中,但是也由于抗生素的过度使用,致病菌的耐药性和药物残留等问题越来越严重,逐渐引起了人们的重视,寻找抗生素的有效替代品,解决耐药性及药物残留问题,迫在眉睫。而抗菌肽(Antimicrobialpeptides,AMPs)是一种原核生物及真核生物均能产生的、分布广泛且种类繁多的、具有广谱抗菌活性的多肽类物质,它对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌、原生动物、癌细胞、病毒等均有明显的抑制作用[25-27],被视为具有极大应用前景的抗生素替代品,成为了国内外的研究热点。抗菌肽最早是瑞典科学家Boman等在一种名叫惜古比天蚕(Hyalophoracecropia)的昆虫体内诱导并分离纯化得到的,并将其命名为天蚕素(Cecropins)。到目前为止,人们纷纷从各种原核及真核生物当中鉴定出并分离得到1700多种抗菌肽类物质。抗菌肽的种类繁多,分布也十分广泛,随着对抗菌肽的研究深入,抗菌肽的类别也越来越清晰。目前,抗菌肽一般根据以下几个方面进行分类:根据抗菌肽的合成途径将抗菌肽分为非核糖体合成抗菌肽(non-ribosomallysynthesizedpeptides)和核糖体合成抗菌肽(ribosomallysynthesizedpeptides)两类。根据抗菌肽的结构分为:(1)含α-螺旋的线性抗菌肽;(2)富含某些氨基酸残基的抗菌肽;(3)含1个二硫键的抗菌 ...
【技术保护点】
1.一种从酵母菌发酵液中提取抗菌肽的方法,包括发酵、抗菌肽分离,其特征在于:所述抗菌肽分离步骤为:向发酵液中加入壳寡糖,振荡吸附,离心,上清液浓缩,冷冻干燥即为多肽,所述壳寡糖为壳寡糖磁性粒子。
【技术特征摘要】
1.一种从酵母菌发酵液中提取抗菌肽的方法,包括发酵、抗菌肽分离,其特征在于:所述抗菌肽分离步骤为:向发酵液中加入壳寡糖,振荡吸附,离心,上清液浓缩,冷冻干燥即为多肽,所述壳寡糖为壳寡糖磁性粒子。2.根据权利要求1所述的一种从酵母菌发酵液中提取抗菌肽的方法,其特征在于:所述壳寡糖的添加量为0.1-0.2mg/mL,振荡吸附温度为30-40℃、时间为25-35min。3.根据权利要求1所述的一种从酵母菌发酵液中提取抗菌肽的方法,其特征在于:所述壳寡糖磁性粒子的制备方法为:步骤1:按料液比为1:12-16(g/L)将壳聚糖加入水中,调节其pH至4.5-5.5,然后按加酶量为5-7%加入复合酶,复合酶中木瓜蛋白酶和纤维素酶的配比为1:0.4-0.6,在温度为40-50℃的条件下酶解4-6h,酶解过程中辅以过氧化氢降解,随后调节酶解液的pH值至中性,沉淀未降解的壳聚糖,上清液浓缩,真空干燥得到水溶性的壳寡糖;步骤2:将0.4-0.6重量份壳寡糖溶于18-22重量份去离子水中,再加入0.2-0.3重量份Fe3O4磁粒子,在超声波功率为、的条件下超声处理1-2min,然后在搅拌下缓慢加入70-90重量份液体石蜡和3-5重量份吐温80,在700...
【专利技术属性】
技术研发人员:全盈园,
申请(专利权)人:金华市铁骑士生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:浙江,33
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