一种16种食源性致病菌检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种16种食源性致病菌检测试剂盒，包括PCR扩增试剂和对照试剂，所述的PCR扩增试剂由PCR反应缓冲液A、酶系B和16种食源性致病菌的引物探针混合液构成，所述的对照试剂主要由阴性对照和阳性对照组成，所述的PCR反应缓冲液A的成分为5*Buffer，25mM dN(U)TPs，所述的酶系B主要由HotStart Hi Taq DNA聚合酶、UNG防污染酶构成，所述的16种食源性致病菌检测引物探针包含含沙门氏菌、志贺氏菌、肠致病性大肠杆菌、产毒素大肠杆菌、侵袭性大肠杆菌、黏附性大肠杆菌、大肠杆菌O157、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、蜡样芽孢菌、空肠弯曲菌、副溶血弧菌、霍乱弧菌O1群、霍乱弧菌O139群、小肠结肠炎耶尔森菌和阪崎肠杆菌检测引物探针混合液。本发明专利技术具有检测灵敏度高、简便快捷等优点。

【技术实现步骤摘要】
一种16种食源性致病菌检测试剂盒
本专利技术涉及生物技术和致病菌检测领域，具体来说是一种16种食源性致病菌检测试剂盒。
技术介绍
民以食为天，食以安为先。但近年来，食品安全件事频发，对人们的健康构成了较大的威胁。食品微生物污染问题日渐突出，已成为全球范围内重要的公共卫生问题。根据美国农业部经济研究局的统计结果显示,沙门氏菌、致病性大肠杆菌(EPEC、ETEC、EIEC、EAEC、EHEC)、弯曲杆菌、副溶血性弧菌、葡萄球菌及毒素、致病性蜡样芽胞杆菌、变形杆菌属、李斯特菌、志贺氏菌等几类重要的细菌会造成巨大的经济损失。沙门氏菌(Salmonella)为肠杆菌科中重要的一类革兰氏阴性菌，极易污染食品、水源及畜产品，是畜禽肉胴体、畜禽产品污染的重要来源，并可通过各种途经传染给人，引起人食物中毒、急性肠胃炎和动物腹泻等疾病。我国细菌性食物中毒70％～80％是由沙门氏菌引起。志贺氏菌(Shigellaspp.)通称痢疾杆菌，是一类具有高度传染性的肠道致病菌。主要通过消化道途径传播，侵袭肠上皮细胞，引起以发热、腹痛、腹泻为特征的典型的痢疾症状，严重危害人类健康。根据WHO统计，每年有1.647亿本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种16种食源性致病菌检测试剂盒，包括PCR扩增试剂和对照试剂，其特征在于：所述的PCR扩增试剂由PCR反应缓冲液A、酶系B和16种食源性致病菌的引物探针混合液构成，所述的对照试剂主要由阴性对照和阳性对照组成。

【技术特征摘要】
1.一种16种食源性致病菌检测试剂盒，包括PCR扩增试剂和对照试剂，其特征在于：所述的PCR扩增试剂由PCR反应缓冲液A、酶系B和16种食源性致病菌的引物探针混合液构成，所述的对照试剂主要由阴性对照和阳性对照组成。2.根据权利要求1所述的一种16种食源性致病菌检测试剂盒，其特征在于：所述的PCR反应缓冲液A的成分为5*Buffer，25mMdN(U)TPs，所述的酶系B主要由HotStartHiTaqDNA聚合酶、UNG防污染酶构成，所述的16种食源性致病菌检测引物探针包含含沙门氏菌、志贺氏菌、肠致病性大肠杆菌、产毒素大肠杆菌、侵袭性大肠杆菌、黏附性大肠杆菌、大肠杆菌O157、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、蜡样芽孢菌、空肠弯曲菌、副溶血弧菌、霍乱弧菌O1群、霍乱弧菌O139群、小肠结肠炎耶尔森菌和阪崎肠杆菌检测引物探针混合液。3.根据权利要求1所述的一种16种食源性致病菌检测试剂盒，其特征在于：所述的5*Buffer的组分为50mMTris-HCl、75mMKCl、12.5mMMgCl2，所述的dN(U)TPs的组分中dATP：dCTP：dGTP：dUTP＝1:1:1:2。4.根据权利要求1所述的一种16种食源性致病菌检测试剂盒，其特征在于：所述的16种食源性致病菌的探针和引物的具体序列和序号如下：沙门氏菌invA基因上游引物F：CGAGCAGTAATGGTATCTGCSEQIDNO.1；沙门氏菌invA基因下游引物R：GGAGGCTTCCGGGTCAAGSEQIDNO.2；沙门氏菌invA基因探针P：5’-荧光报告基团-CGCAAAGGGATCCGTCAGACCTCTGGCA-荧光淬基团-3’SEQIDNO.3；志贺氏菌ipaH基因上游引物F：GCTCTCCACTGCCGTGAAGGSEQIDNO.4；志贺氏菌ipaH基因下游引物R：TCATTCTCTTCACGGCTTCTGASEQIDNO.5；志贺氏菌ipaH基因探针P：5’-荧光报告基团-CGTGTCGGGAGTGACAGCAAATG-荧光淬基团-3’SEQIDNO.6；EPECeae基因上游引物F：ATGTTGCTTTGTTTAATTCCGASEQIDNO.7；EPECeae基因下游引物R：TAATCAAYCCCCATCGTCACCSEQIDNO.8；EPECeae基因探针P：5’-荧光报告基团-CACCAACGGTCGCCGCRC-荧光淬基团-3’SEQIDNO.9；ETECelt基因上游引物F：ATTTAAGAGCGGCGMAACASEQIDNO.10；ETECelt基因下游引物R：GTCCTTCATCCTTTCAATGGCSEQIDNO.11；ETECelt基因探针P：5’-荧光报告基团-ACTGCCCGGGACTTCGACCTGA-荧光淬基团-3’SEQIDNO.12；ETECest基因上游引物F：AGTAGCAATTACTGCTGTGAATTGSEQIDNO.13；ETECest基因下游引物R：ACGTTACAGACATCATCAGAATCSEQIDNO.14；ETECest基因探针P：5’-荧光报告基团-TTGTAATCCTGCTTGTACCGGGTGCT-荧光淬基团-3’SEQIDNO.15；EIECipaH基因上游引物F：ACTCTCCATTTTGTGGATGAGATASEQIDNO.16；EIECipaH基因下游引物R：TTCCTTCACGGCAGTGGAGSEQIDNO.17；EIECipaH基因探针P：5’-荧光报告基团-TACCTGGCCTTCCAGACCATGCT-荧光淬基团-3’SEQIDNO.18；EAECaggR基因上游引物FCTAAAGGATGCCCTGATGATAATSEQIDNO.19；EAECaggR基因下游引物R：ATACAGAATCGTCAGCATCAGCSEQIDNO.20；EAECaggR基因探针P：5’-荧光报告基团-CCAATTCGGACAACTGCAAGC-荧光淬基团-3’SEQIDNO.21；O157rfbE基因上游引物F：CCAACACTGACATATATAGCATCASEQIDNO.22；O157rfbE基因下游引物R：CAGACATTTGCCAAGTTTCATTSEQIDNO.23；O157rfbE基因探针P：5’-荧光报告基团-CACAGGAGCCACCCCCATTTTCG-荧光淬基团-3’SEQIDNO.24；金黄色葡萄球菌nuc基因上游引物F：GAAGTCGAGTTTGACAAAGGSEQIDNO.25；金黄色葡萄球菌nuc基因下游引物R：ACTTTAGCCAAGCCTTGACGSEQIDNO.26；金黄色葡萄球菌nuc基因探针P：5’-荧光...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈思，
申请(专利权)人：陈思，
类型：发明
国别省市：吉林,22