红色荧光AIEgen制造技术

本主题涉及红色荧光AIEgen的合成和应用。本主题涉及线粒体靶向的AIEgen，其提高肺癌的放射敏感性。本发明专利技术中的AIEgen也可以靶向细胞膜、脂滴、或溶酶体、以及作为放疗中的放射增敏剂。本主题还涉及利用AIEgen的双光子成像。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】红色荧光AIEgen相关申请本专利申请要求于2015年11月10号提交的美国临时专利申请号62/285,826和2016年7月13号提交的国际专利申请号PCT/CN2016/089911的优先权，其均其由其专利技术人提交并通过引用全文并入本文。
本主题涉及红色荧光AIEgen的合成和应用。本主题涉及线粒体靶向的AIEgen，其提高肺癌的放射敏感性。本专利技术的AIEgen也可以靶向细胞膜、脂滴、或溶酶体、以及作为放疗的放射增敏剂。本主题还涉及利用AIEgen的双光子成像。背景荧光染料已广泛用于现代生物学研究，并促进了荧光显微镜的发展。荧光成像是一种能够穿透组织并观察单个细胞的有力工具，并且迄今为止，在基因表达、蛋白质功能、蛋白质-蛋白质相互作用、以及许多其他细胞过程的进展和无创性研究中发挥重要作用。此外，荧光成像已被证实是研究聚合物共混物微观结构的有力工具。具体而言，远红外到近红外(FR/NIR)荧光染料对体内成像是有利的，因为可以最小化光吸收和本体自发荧光的影响。由于更长的荧光波长，可以实现更高程度的组织穿透。出于同样的原因，利用FR/NIR荧光染料对聚合物共混物的微观结构的成像，不仅可以了解其表面模式，还可以洞悉更深层的信息。关于荧光发色团的分子设计，聚集导致猝灭(ACQ)效应总是引起光漂白和聚集时荧光强度的衰减，从而导致对细胞器的长时间监测的限制以及较低的性能。2001年，发现了具有聚集诱导发光(AIE)性质的分子。由于分子内运动受限(RIM)，AIE活性分子在聚集和/或晶体状态下是高度自发光的，从而允许在如OLED和生物探针等各领域中应用。AIE活性分子已成功用作生物探针，证实其具有高光稳定性和高生物相容性。概述在一实施方案中，本主题涉及制备用于生物学应用的具有聚集诱导发光性质的红色荧光AIEgen的方法，其包括将选自叔氨基、烷氧基和咪唑基的供体与选自氰基、吡啶盐和吲哚盐的受体组合。在一实施方案中，本主题涉及制备AIEgen的方法，其包括构建供体-受体AIE衍生物化合物，其中供体-受体AIE衍生物包含选自以下的通式的骨架结构：其中，R、R’、R”和R”’独立地选自：H、并且其中，n为0至20的整数。在一实施方案中，本主题涉及用作染料的包含供体-受体AIE衍生物化合物的AIEgen，其中供体-受体AIE衍生物包含选自以下的通式的骨架结构：其中，R、R’、R”和R”’独立地选自：H、并且其中，n为0至20的整数。在一实施方案中，本主题涉及具有以下结构的AIEgen：在一实施方案中，本主题涉及具有以下结构的AIEgen：附图概述图1显示了ASCP在不同溶剂中的(A)吸收光谱和(B)PL光谱。浓度：10μM；λex＝460nm。图2显示了(A)ASCP在具有不同甲苯分数(ft)的甲苯/DMSO混合物中的PL光谱。(B)ASCP在650nm处的相对发光强度(I/I0)相比其甲苯/DMSO混合物的组成的图谱。I0＝ASCP在纯DMSO溶液中的发光强度。浓度：10mM；λex＝460nm。图3显示了在存在不同浓度的ASCP8小时的情况下，HeLa细胞的活力。数据表示为五次单独的实验的平均值。图4显示了用ASCP(5μM)染色30分钟的HeLa细胞的(A和B)荧光图像和(C)明场图像，其中分别聚焦在线粒体(A)和细胞核(B)。λex＝460-490nm；比例尺＝30μm。(D和E)用(D)ASCP(5μM)和(E)MitoTrackerGreen(MTG；200nM)染色的HeLa细胞的共聚焦图像。(F)表示(D)和(E)的合并图像。条件：对于ASCP，λex＝405nm且λem＝600-700nm；对于MTG，λex＝488nm且λem＝500-540nm；比例尺＝20μm。图5显示了在具有1％DMSO的HEPES(pH7.4)缓冲溶液中，与不同磷脂囊泡(22μM)、DNA(100μg/mL)和RNA(100μg/mL)混合的ASCP的(A)吸收光谱和(B)PL光谱。浓度：10μM；λex＝460nm。图6显示了用ASCP(5μM)染色30分钟的HeLa细胞的6(A和B)共聚焦图像和(C)明场图像。条件：(A)λex＝405nm；λem＝500-650nm；(B)λex＝560nm；λem＝650-750nm。图7显示了在用或未用核糖核酸酶或脱氧核糖核酸酶进行处理的情况下，用(A-C)ASCP(10μM)染色2小时和用(D-F)SYTORNASelect(5μM)染色2小时的HeLa细胞的荧光图像。图8显示了在连续激发下采集的用(A和C)ASCP和(B和D)SYTORNASelect染色的HeLa细胞的共聚焦图像。(E)不同扫描次数的ASCP(黑色)和SYTORNASelect(红色)的荧光发光的信号(％)。条件：对于ASCP，λex＝560nm且λem＝650-750nm；对于SYTORNASelect，λex＝488nm，λem＝500-600nm。图9显示了ASCP-2P在DMSO溶液中的吸收光谱。图10显示了(A)ASCP-2P在具有不同甲苯分数(ft)的甲苯/DMSO混合物中的PL光谱和(B)ASCP-2P在640nm处的相对发光强度(I/I0)相比其甲苯/DMSO混合物的组成的图谱。I0＝ASCP-2P在纯DMSO溶液中的发光强度。浓度：10μM；λex＝460nm。图11显示了在PBS溶液中在有和无脂质囊泡(22μM)的情况下，ASCP-2P(10μM)的PL光谱。λex＝460nm。图12显示了(A)在不同白光照射下ASCP-2P(10μM)与H2DCFDA(5μM)在PBS溶液中的PL图谱，和(B)含有不同AIEgen(10μM)和H2DCFDA(5μM)的PBS溶液在534nm处的荧光强度，随不同白光照射时间的变化。λex＝495nm。图13显示了在不同白光照射下在PBS溶液中，(A)H2DCFDA(5μM)与不同AIEgen(10μM)(B：ASCP；C：TPE-PY；和D：TPE-IQ)的PL光谱。λex＝495nm。图14显示了用ASCP-2P(5μM)和MitoTrackerDeepRed(MTDR，50nM)共染的A549癌细胞的(A和B)共聚焦图像和(C)用明场的合并的图像。共聚焦图像显示了通过使用H2DCFDA作为ROS指示剂的接受不同处理的A549癌细胞的细胞内ROS水平。(D)探针+，光-；(E)探针+，光+；(F)探针+，光+，NAC+。条件：(A)ASCP-2P：λex＝488nm，λem＝620-640nm；(B)MTDR：λex＝633nm，λem＝655-675nm；(D-F)H2DCFDA：λex＝488nm，λem＝510-530nm。图15显示了在黑暗中与ASCP-2P一起孵育的A549细胞的细胞活力(黑色)，用白光照射预处理1分钟然后在黑暗中与ASCP-2P一起孵育的A549细胞的细胞活力(红色)，以及用白光照射1分钟然后在黑暗中与ASCP-2P和NAC一起孵育的A549细胞的细胞活力(蓝色)。图16显示了(A)不同处理时的克隆形成和(B)(A)的克隆形成测定的定量数据。**表示P<0.01。图17显示了(A)用不同的常用的本文档来自技高网...

【技术保护点】
制备用于生物学应用的具有聚集诱导发光性质的红色荧光AIEgen的方法，其包括将选自叔氨基、烷氧基和咪唑基的供体与选自氰基、吡啶盐和吲哚盐的受体组合。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.11.10 US 62/285,8261.制备用于生物学应用的具有聚集诱导发光性质的红色荧光AIEgen的方法，其包括将选自叔氨基、烷氧基和咪唑基的供体与选自氰基、吡啶盐和吲哚盐的受体组合。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述AIEgen的荧光信号为约600nm。3.制备AIEgen的方法，其包括构建供体-受体AIE衍生物化合物中的化合物，其中所述供体-受体AIE衍生物包含选自以下的通式的骨架结构：其中R、R’、R”和R”’独立地选自：H、并且其中n为0至20的整数。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述AIEgen显示出红色荧光。5.根据权利要求3所述的方法，其中所述AIEgen用于肺癌细胞的荧光细胞成像。6.根据权利要求3所述的方法，其中所述供体-受体AIE衍生物能靶向选自线粒体、核仁、溶酶体、细胞膜和脂滴的特定细胞器。7.用作染料的包含供体-受体AIE衍生物化合物的AIEgen，其中所述供体-受体AIE衍生物包含选自以下的通式的骨架...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐本忠，于义勇，
申请(专利权)人：香港科技大学，
类型：发明
国别省市：中国香港,81