一种RNA保存液及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种RNA保存液，其包含金精三甲酸铵盐、防腐剂和苯丁抑制素盐酸盐；所述防腐剂选自甘氨酸、ε‑聚赖氨酸或半胱氨酸。本发明专利技术提供的RNA保存液可以有效防止游离RNA的降解，为RNA提供稳定的环境，延长RNA的保存时间，同时不影响RNA后续的检测效率和检测结果的准确性。

【技术实现步骤摘要】
一种RNA保存液及其用途
本专利技术属于生物
，具体涉及一种RNA保存液及其用途。
技术介绍
核糖核酸(Ribonucleicacid,RNA)存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。由至少几十个核糖核苷酸通过磷酸二酯键连接而成的一类核酸，因含核糖而得名。每个RNA分子都由核苷酸单元长链组成，每个核苷酸单元含有一个含氮碱基、一个核糖和一个磷酸基。含RNA的生物样品一旦从体内采集分离，它的RNA会变得非常不稳定，极易被降解。且RNA是单链结构，在提取过程或保存过程中都极易发生降解。因此，RNA的提取和保存过程需要进行严格的处理，防止RNA发生特异或非特异的降解。RNA为细胞的主要成分之一，参与细胞的各种功能活动，是生物学、医学和药学等生命有关学科的重要研究对象，RNA检测更是分子生物学研究的一个重要技术，包括生物芯片、基因表达矩阵分析(ArrayAnalysis)和定量RT-PCR检测等。大多数情况下，由于各种各样的原因，RNA从生物样本中提取出来后并不能立刻得到检测，而需进行保存，以便后续的研究使用。因此，RNA保存过程中的质量和完整性会显著影响检测结果的准确性和可靠性。在生物样品中广泛存在并极度稳定的RNase对RNA的水解作用很强，许多RNase对RNA的降解作用不需任何辅助因子，给RNA的纯化、储存和使用带来极大困难。因此，一种能够有效防止RNA降解，不影响后续检测结果的RNA保存液，对RNA的分子生物学检测非常重要，也是目前RNA保存迫切需要解决的技术难题。
技术实现思路
基于此，本专利技术的目的之一在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种RNA保存液，可以有效防止游离RNA降解，为RNA提供稳定的环境，延长RNA的保存时间。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种RNA保存液，包含金精三甲酸铵盐、防腐剂和苯丁抑制素盐酸盐；所述防腐剂选自甘氨酸、ε-聚赖氨酸或半胱氨酸。优选地，所述RNA保存液包含金精三甲酸铵盐、甘氨酸和苯丁抑制素盐酸盐，且所述金精三甲酸铵盐、甘氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的摩尔比为(100～500)：(80000～200000)：(0.02～0.06)。优选地，所述金精三甲酸铵盐、甘氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的摩尔比为300：100000：0.04。优选地，所述RNA保存液包含金精三甲酸铵盐、ε-聚赖氨酸和苯丁抑制素盐酸盐，且所述金精三甲酸铵盐、ε-聚赖氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的质量比为(0.047～0.237)：(20～40)：(0.0000069～0.000021)。优选地，所述金精三甲酸铵盐、ε-聚赖氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的质量比为0.142：30：0.000014。优选地，所述RNA保存液包含金精三甲酸铵盐、半胱氨酸和苯丁抑制素盐酸盐，且所述金精三甲酸铵盐、半胱氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的摩尔比为(100～500)：(50000～100000)：(0.02～0.06)。优选地，所述金精三甲酸铵盐、半胱氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的摩尔比为300：75000：0.04。本专利技术还提供了所述RNA保存液在RNA保存中的用途。优选地，所述RNA包括mRNA、miRNA、snRNA、scRNA、端粒酶RNA、反义RNA和核酶。优选地，所述RNA溶液中RNA保存液的组分金精三甲酸铵盐的摩尔浓度为100～500μM，甘氨酸的摩尔浓度为80～200mM，ε-聚赖氨酸的质量浓度为2～4mg/ml，半胱氨酸的摩尔浓度为5～10mM，苯丁抑制素盐酸盐的摩尔浓度为20～60nM。优选地，所述RNA溶液中RNA保存液的组分金精三甲酸铵盐的摩尔浓度为300μM，甘氨酸的摩尔浓度为100mM，ε-聚赖氨酸的质量浓度为3mg/ml，半胱氨酸的摩尔浓度为7.5mM，苯丁抑制素盐酸盐的摩尔浓度为40nM。本专利技术还提供了一种RNA保存试剂盒，所述试剂盒含有上述RNA保存液。相对于现有技术，本专利技术的有益效果为：(1)本专利技术RNA保存液的组分和用量是专利技术人通过大量的研究和分析得来的，可有效防止RNA降解，使其更稳定，更易保存；(2)本专利技术保存液在保存过程中不会影响RNA的特性，保证了后续检测结果的效率和准确性。具体实施方式为更好的说明本专利技术的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本专利技术作进一步说明。实施例1本专利技术RNA保存液的一种实施例，包含金精三甲酸铵盐、甘氨酸和苯丁抑制素盐酸盐，且所述金精三甲酸铵盐、甘氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的摩尔比为100：80000：0.02。实施例2本专利技术RNA保存液的一种实施例，包含金精三甲酸铵盐、甘氨酸和苯丁抑制素盐酸盐，且所述金精三甲酸铵盐、甘氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的摩尔比为500：200000：0.06。实施例3本专利技术RNA保存液的一种实施例，包含金精三甲酸铵盐、甘氨酸和苯丁抑制素盐酸盐，且所述金精三甲酸铵盐、甘氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的摩尔比为300：100000：0.04。实施例4本专利技术RNA保存液的一种实施例，包含金精三甲酸铵盐、ε-聚赖氨酸和苯丁抑制素盐酸盐，且所述金精三甲酸铵盐、ε-聚赖氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的质量比为0.047：20：0.0000069。实施例5本专利技术RNA保存液的一种实施例，包含金精三甲酸铵盐、ε-聚赖氨酸和苯丁抑制素盐酸盐，且所述金精三甲酸铵盐、ε-聚赖氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的质量比为0.237：40：0.0000069。实施例6本专利技术RNA保存液的一种实施例，包含金精三甲酸铵盐、ε-聚赖氨酸和苯丁抑制素盐酸盐，且所述金精三甲酸铵盐、ε-聚赖氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的质量比为0.142：30：0.000014。实施例7本专利技术RNA保存液的一种实施例，包含金精三甲酸铵盐、半胱氨酸和苯丁抑制素盐酸盐，且所述金精三甲酸铵盐、半胱氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的摩尔比为100：50000：0.02。实施例8本专利技术RNA保存液的一种实施例，包含金精三甲酸铵盐、半胱氨酸和苯丁抑制素盐酸盐，且所述金精三甲酸铵盐、半胱氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的摩尔比为500：100000：0.06。实施例9本专利技术RNA保存液的一种实施例，包含金精三甲酸铵盐、半胱氨酸和苯丁抑制素盐酸盐，且所述金精三甲酸铵盐、半胱氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的摩尔比为300：75000：0.04。实施例10本专利技术RNA保存试剂盒的一种实施例，包含以下浓度的组分：金精三甲酸铵盐300uM、甘氨酸100mM、ε-聚赖氨酸30mg/ml、半胱氨酸75mM和苯丁抑制素盐酸盐40nM。实施例11本实施例对专利技术所述RNA保存液对RNA的保存效果进行研究。1、实验设计利用Trizol法提取293T细胞的RNA，分别利用实施例1～9中的RNA保存液在不同条件下对提取获得的RNA溶液进行保存，并设置不使用RNA保存液的对照组，所述对照组中添加相同体积的DEPC水，具体如表1所示：表1实验设计2、实验方法利用Trizol法提取293T细胞的RNA，测定浓度和OD260nm/OD280nm比值(1.86)后，平均分为20个组，按表1的设计添加RNA保存液或DEPC水。将各组样品保存在相应的条件下，3周后利用NanoDrop2000超微量分光光度计分别测定各组样品RNA的浓度，同时利用以下公式计算RNA的降解率：降解率％＝(实验前本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种RNA保存液，其特征在于，包含金精三甲酸铵盐、防腐剂和苯丁抑制素盐酸盐；所述防腐剂选自甘氨酸、ε‑聚赖氨酸或半胱氨酸。

【技术特征摘要】
1.一种RNA保存液，其特征在于，包含金精三甲酸铵盐、防腐剂和苯丁抑制素盐酸盐；所述防腐剂选自甘氨酸、ε-聚赖氨酸或半胱氨酸。2.根据权利要求1所述的RNA保存液，其特征在于，包含金精三甲酸铵盐、甘氨酸和苯丁抑制素盐酸盐，且所述金精三甲酸铵盐、甘氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的摩尔比为(100～500)：(80000～200000)：(0.02～0.06)。3.根据权利要求1所述的RNA保存液，其特征在于，包含金精三甲酸铵盐、ε-聚赖氨酸和苯丁抑制素盐酸盐，且所述金精三甲酸铵盐、ε-聚赖氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的质量比为(0.047～0.237)：(20～40)：(0.0000069～0.000021)。4.根据权利要求1所述的RNA保存液，其特征在于，包含金精三甲酸铵盐、半胱氨酸和苯丁抑制素盐酸盐，且所述金精三甲酸铵盐、半胱氨酸和苯丁抑制素盐酸盐的摩尔比为(100～500)：(50000～100000)：(0.02～0.06...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈嘉昌，陈肖燕，柳俊，蒋圆玲，张瑶，
申请(专利权)人：广州市金圻睿生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：广东,44