一种快速测定鱼肝油中EPA和DHA含量的方法技术

本发明专利技术涉及一种鱼肝油中ω‑3不饱和脂肪酸EPA、DHA的测定方法，该方法采用柱前衍生对鱼肝油中的EPA、DHA进行衍生化后，用气相色谱法对其进行测定，按加校正因子内标法计算鱼肝油中的EPA、DHA含量。本发明专利技术的方法包括下列步骤：1.鱼肝油柱前衍生化反应制备脂肪酸甲酯溶液；2.EPA甲酯、DHA甲酯相对校正因子测定；3.EPA、DHA气相色谱含量测定；4.按加校正因子内标法计算EPA和DHA的含量。

【技术实现步骤摘要】
一种快速测定鱼肝油中EPA和DHA含量的方法
本专利技术属于医药
，具体涉及一种快速测定鱼肝油及其鱼肝油软胶囊中EPA和DHA的方法。
技术介绍
鱼肝油是从鱼类肝脏提取出的主要含有维生素A、维生素D及各种脂肪酸等天然化合物的脂肪油，各国药典均有收载。鱼肝油中含有二十多种脂肪酸，其中EPA、DHA为其特有脂肪酸。EPA(二十碳五烯酸)和DHA(二十二碳六烯酸)属ω-3多不饱和脂肪酸，陆地上的动植物体内几乎没有，在鱼类肝脏中含量最高，EPA、DHA是人体不可缺少的重要营养素，其生理活性作用众所周知。目前国内鱼肝油市场鱼龙混杂，尤其是国产药用级鱼肝油产品质量堪忧，基本是人工合成的维生素A、D及植物油勾兑而成，基本不含有EPA和DHA，已经不再是鱼肝油，实际是维生素AD制剂。故有必要建立一种快速、简便、准确、可靠的鱼肝油中EPA、DHA含量测定方法，以规范国内鱼肝油市场。鱼肝油中EPA、DHA含量测定国内外标准均未见收载，文献报道的测定方法大多采用柱前衍生气相色谱外标法，柱前衍生化方法比较复杂，甲酯化反应催化剂也大多使用14％三氟化硼甲醇溶液。三氟化硼为毒性试剂，腐蚀性强，且易燃易爆，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速测定鱼肝油中EPA和DHA含量的方法，其特征在于，所述方法包括下列步骤：(1)鱼肝油柱前衍生化反应制备脂肪酸甲酯溶液，包括皂化反应、甲酯化反应、提取盐析与脱水：a.皂化反应：精密称取供试品100mg置20mL带螺口反应瓶中，加1.5mL氢氧化钠甲醇溶液，漩涡混合30秒，于90℃中加热20min，取出冷却，得皂化反应溶液；b.甲酯化反应:于皂化反应溶液中，加入2mL硫酸甲醇溶液，漩涡混合30秒，于100℃中加热10min，取出冷却，得甲酯化反应溶液；c.提取盐析：于甲酯化反应溶液中精密加入2mL浓度为5mg/mL二十三烷酸甲酯异辛烷溶液，漩涡混合1min，加5mL饱和氯化钠溶液，振摇，静...

【技术特征摘要】
1.一种快速测定鱼肝油中EPA和DHA含量的方法，其特征在于，所述方法包括下列步骤：(1)鱼肝油柱前衍生化反应制备脂肪酸甲酯溶液，包括皂化反应、甲酯化反应、提取盐析与脱水：a.皂化反应：精密称取供试品100mg置20mL带螺口反应瓶中，加1.5mL氢氧化钠甲醇溶液，漩涡混合30秒，于90℃中加热20min，取出冷却，得皂化反应溶液；b.甲酯化反应:于皂化反应溶液中，加入2mL硫酸甲醇溶液，漩涡混合30秒，于100℃中加热10min，取出冷却，得甲酯化反应溶液；c.提取盐析：于甲酯化反应溶液中精密加入2mL浓度为5mg/mL二十三烷酸甲酯异辛烷溶液，漩涡混合1min，加5mL饱和氯化钠溶液，振摇，静置分层；d.脱水处理：取上清液转移至装有无水硫酸钠的试管中，振摇，使脱水，脱水后溶液即为脂肪酸甲酯溶液；(2)EPA甲酯、DHA甲酯相对校正因子测定：a.混合标准溶液制备：称取二十三烷酸甲酯、EPA甲酯、DHA甲酯各50mg置10mL棕色容量瓶中，加异辛烷溶解并稀释至刻度，摇匀，得混合标准溶液，平行制备二份；b.气相色谱检测；(3)EPA、DHA含量测定：a.供试品溶液制备：精密称取样品100mg，置20mL带螺口反应瓶中，加1.5mL氢氧化钠甲醇溶液，旋紧瓶盖，漩涡混合30秒，于90℃中加热20min，取出冷却；加2mL硫酸甲醇溶液，漩涡混合30秒，于100℃加热10min，取出冷却；加入2mL内标溶液，漩涡混合1min，立即加5mL饱和氯化钠溶液，振摇，静置分层；取上清液转移至装有无水硫酸钠的试管中，振摇，脱水，得供试品溶液；b.气相色谱检测。2.根据权利要求1所述的一种快速测定鱼肝油中EPA和DHA含量的方法，其特征在于，步骤(1)皂化反应中所用的氢氧化钠甲醇溶液的质量分数为2％；甲酯化反应中所用的硫酸甲醇溶液的质量分数为5％。3....

【专利技术属性】
技术研发人员：王琼芬，刘婷，郑平安，徐虹，石婧，
申请(专利权)人：舟山市食品药品检验检测研究院，
类型：发明
国别省市：浙江,33