改善质谱检测微生物结晶的方法及产品技术

本发明专利技术提供了一种通过改善微生物样本二次结晶的方法，包括在乙腈水溶液中分别加入3‑羟基‑2‑吡啶甲酸、柠檬酸二胺溶液以配制基质溶液，然后加入特定比例的样本溶液在芯片上进行点样结晶。本发明专利技术还提供了提高质谱检测生物靶分子的准确率的质谱校正方法，包括在具有多个竖直交叉排列的亲水区域定位孔、疏水孔外区域、中心校正孔、验证校正孔、备用校正孔的芯片上，分别点样基质溶液结晶，点样微生物样本并结晶，并通过质谱轰击校正孔位的微生物样本，以对待测样本的质谱结果进行校正。本发明专利技术还提供了适用上述质谱校正和检测的芯片。本发明专利技术改进基质溶液配方，能够获得结晶形态较佳的一次结晶和二次结晶效果，其校正方法有助于获得更加稳定和准确的质谱检测结果。

【技术实现步骤摘要】
改善质谱检测微生物结晶的方法及产品
本专利技术涉及一种通过改善生物样本结晶及校正方式来提高MALDI-TOF质谱检测正确率的方法，能质谱检测微生物，属于质谱检测

技术介绍
基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)技术已成为目前蛋白质组学研究中的经典技术。在该技术的成功应用过程中,合适的样品前处理方法起着首要和关键的作用。只有将合适的样品前处理方法与合适的有机基质结合起来,才能成功实现对核酸和蛋白质等生物大分子的准确鉴定。对于基质、溶剂、盐(金属离子)和样品制备方法的选择是MALDI分析高聚物成败的关键因素。最优化的条件是使样品分子和基质均匀地形成共结晶。MALDI方法分析大分子,重要的关键之一是选择合适的基质。结果表明,效果较佳的基质只有几种。水溶性合成高分子如聚乙二醇(PEG)、聚丙二醇经常出现于早期的MALDI研究中,这是因为分析多肽的基质也可以应用于它们,对于另外一些高分子,可以从高分子和基质的溶解性中找到一些选择基质的思路。一般来说,选择基质时应使基质与高分子的极性比较一致,彼此之间具有兼容性。微阵列芯片以高密度阵列为特征。微阵列技术就是利用分子杂本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种改善质谱检测微生物样本的结晶的方法，步骤包括：(1)采用去离子水与高效液相色谱级的乙腈按照1:1‑0.5:1的体积比混合，得到混合溶液；(2)加入3‑羟基‑2‑吡啶甲酸充分溶解，其中3‑羟基‑2‑吡啶甲酸：混合溶液＝1‑10：100(mg/ml)；(3)取3‑羟基‑2‑吡啶甲酸溶液和柠檬酸二胺溶液，按照1‑3:1体积比混合均匀，过滤即得基质溶液。(4)选取0.5‑1μL基质溶液和0.5‑1μL样本，在芯片上进行点样结晶。

【技术特征摘要】
1.一种改善质谱检测微生物样本的结晶的方法，步骤包括：(1)采用去离子水与高效液相色谱级的乙腈按照1:1-0.5:1的体积比混合，得到混合溶液；(2)加入3-羟基-2-吡啶甲酸充分溶解，其中3-羟基-2-吡啶甲酸：混合溶液＝1-10：100(mg/ml)；(3)取3-羟基-2-吡啶甲酸溶液和柠檬酸二胺溶液，按照1-3:1体积比混合均匀，过滤即得基质溶液。(4)选取0.5-1μL基质溶液和0.5-1μL样本，在芯片上进行点样结晶。2.权利要求1的方法，其中步骤2中加入0.01-0.2mg的3-羟基-2-吡啶甲酸，并且通过2000-3000rpm震荡3-10min，8000-12000rpm离心3-10min，得到3-羟基-2-吡啶甲酸溶液。3.权利要求1的方法，其中步骤3中0.05mg的3-羟基-2-吡啶甲酸。4.权利要求1的方法，其中步骤3中的柠檬酸二胺溶液的配制如下：称量柠檬酸二胺置于离心管中，再加入去离子水进行溶解，其中柠檬酸二胺的重量mg与去离子水体积mL比为1-5：100，在2000-3000rpm震荡3-10min，8000-12000rpm离心3-10min，得到柠檬酸二胺溶液。5.权利要求1的方法，其中步骤4中选取0.75μL基质溶液和0.5μL样本进行结晶。6.权利要求1-5的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：马庆伟，梁飞，周凤丽，安娜，付书辉，梁坤，
申请(专利权)人：北京毅新博创生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11