一种1,5-脱水山梨醇的检测试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术公开了一种1,5‑脱水山梨醇的检测试剂盒及其检测方法。本发明专利技术的检测试剂盒能够使样本在反应循环过程中达到能量供应，消除样本中葡萄糖和试验副产物葡萄糖6‑磷酸、丙酮酸干扰，避免因产物的积累造成的逆反应。在消除葡萄糖及副产物积累后，使1,5‑AG转化成1,5‑脱水‑果糖与过氧化氢，过氧化氢与发光底物反应形成一种持续稳定的化学发光信号。与传统的酶比色法相比，本发明专利技术的检测试剂盒具有灵敏度高、准确性好、特异性高、抗干扰能力强、稳定性好等优点。

A detection kit for 1,5- sorbitol and its detection method

The invention discloses a detection kit for 1,5 sorbitol dehydrated sorbitol and a detection method thereof. The detection kit of the invention can make the sample reach energy supply during the reaction cycle, eliminate the interference of glucose and test side product glucose 6 phosphoric acid and pyruvic acid in the sample, and avoid the inverse reaction caused by the accumulation of the products. After eliminating the accumulation of glucose and the by-products, the 1,5 AG was transformed into a 1,5 dehydrated fructose and hydrogen peroxide, and hydrogen peroxide was reacted with the luminescent substrate to form a continuous and stable chemiluminescence signal. Compared with the traditional enzyme colorimetric method, the detection kit of the invention has the advantages of high sensitivity, good accuracy, high specificity, strong anti-interference ability and good stability.

【技术实现步骤摘要】
一种1,5-脱水山梨醇的检测试剂盒及其检测方法
本专利技术涉及生化试剂
，具体涉及一种1,5-脱水山梨醇的检测试剂盒及其检测方法。
技术介绍
1,5-AG(1,5-脱水山梨醇)与现有的糖尿病指标均呈现出显著的负相关，血液中1,5-AG的减少程度与糖尿病的严重程度显著相关。1,5-AG与其他指标最显著的区别是反映糖尿病病情变化的周期不同，血糖(GLU)反映病人当时血糖状况，糖化白蛋白(GA)反应病人半个月内血糖的平均状况，糖化血红蛋白(HbAlc)反映病人最近2～3个月左右的血糖平均水平，而1,5-AG可以反映近几天至1周的平均血糖水平。目前国内外市场主要采用酶法对1,5-AG进行检测，酶法测定由于其无污染，并可试用与生化仪，操作简单等特点，有利于大规模推广。目前国内外主要采用酶法测定1，5-脱水山梨醇(1,5-AG)，主要有氧化酶法与脱氢酶法两种方法。氧化酶法的原理为，通过吡喃糖氧化酶(PROD)催化1，5-脱水山梨醇(1,5-AG)生成1，5-脱水果糖和H2O2，H2O2在过氧化物酶的作用下使4-AAP和TOOS反应生成醌类有色物质。脱氢酶法的原理为：1,5-脱水山梨醇在AD本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种1,5‑脱水山梨醇的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括用于消除葡萄糖、葡萄糖6‑磷酸和丙酮酸的试剂R1、用于将1,5‑脱水山梨醇转化成1,5‑脱水果糖与过氧化氢的试剂R2和用于检测过氧化氢的发光底物；所述试剂R1包括腺苷三磷酸、己糖激酶、β‑烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、葡萄糖6‑磷酸脱氢酶、磷酸烯醇式丙酮酸、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶；所述试剂R2包括吡喃糖氧化酶。

【技术特征摘要】
1.一种1,5-脱水山梨醇的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括用于消除葡萄糖、葡萄糖6-磷酸和丙酮酸的试剂R1、用于将1,5-脱水山梨醇转化成1,5-脱水果糖与过氧化氢的试剂R2和用于检测过氧化氢的发光底物；所述试剂R1包括腺苷三磷酸、己糖激酶、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、葡萄糖6-磷酸脱氢酶、磷酸烯醇式丙酮酸、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶；所述试剂R2包括吡喃糖氧化酶。2.根据权利要求1所述的1,5-脱水山梨醇的检测试剂盒，其特征在于，所述发光底物为双氧杂环烷类化合物。3.根据权利要求2所述的1,5-脱水山梨醇的检测试剂盒，其特征在于，所述双氧杂环烷类化合物为1，2-二氧杂环丁烷硼酸。4.根据权利要求1所述的1,5-脱水山梨醇的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1包括下述浓度的组分：腺苷三磷酸0.01～10mmol/L、己糖激酶0.1～100KU/L、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸0.01～10mmol/L，葡萄糖6-磷酸脱氢酶0.1～100KU/L、磷酸烯醇式丙酮酸0.01～20mmol/L、丙酮酸激酶1～100KU/L和乳酸脱氢酶1～100KU/L；所述试剂R2包括下述浓度的组分：吡喃糖氧化酶0.01～20KU/L。5.根据权利要求1所述的1,5-脱水山梨醇的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1包括下述浓度的组分：腺苷三磷酸0.3mmol/L、己糖激酶30KU/L、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸0.6mmol/L、葡萄糖6-磷酸脱氢酶6KU/L、磷酸烯醇式丙酮酸3mmol/L、丙酮酸激酶10KU/L和乳酸脱氢酶10KU/L；所述试剂R2包括下述浓度的组分：吡喃糖氧化酶6KU/L...

【专利技术属性】
技术研发人员：张玲，李民友，梁灿，蔺涛，
申请(专利权)人：广州市进德生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44