治疗1B型PHA的环状多肽制造技术

包括氨基酸序列SEQ ID NO:1 Gly‑Gln‑Arg‑Glu‑Thr‑Pro‑Glu‑Gly‑Ala‑Glu‑Ala‑Lys‑Pro‑Trp‑Tyr中的至少6个连续氨基酸的环状多肽，用于治疗常染色体隐性1型假性醛固酮减少症(1B型PHA)或用于恢复功能丧失突变型ENaC的Na

Cyclic polypeptide for the treatment of type 1B PHA

A cyclic polypeptide of at least 6 consecutive amino acids in SEQ, Gly, Gln, Arg, Glu, Thr, Arg, Glu, Thr, Thr, Thr, Thr, Thr, Thr, Arg, Thr, or Thr

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】治疗1B型PHA的环状多肽
本专利技术涉及环状多肽及它们在治疗常染色体隐性1型假性醛固酮减少症(1B型PHA)中的用途或用于恢复功能丧失突变型ENaC的Na+离子运输能力的用途。
技术介绍
常染色体隐性(AR)1型假性醛固酮减少症，(1B型PHA)是一种罕见的危及生命的疾病，其在刚出生的前几天呈现出无法茁壮成长、体重减轻、盐耗症、高钾血症和代谢性酸中毒。该病症在1958年被第一次表征(Cheek和Perry，1958)。常染色体隐性1型假性醛固酮减少症是在肾脏、结肠、唾液和汗腺以及肺中存在的钠离子通道(ENaC)已经丧失了促进钠离子(Na+离子)跨越细胞层运动的功能而危及生命的一种病症。功能丧失型ENaC导致尿液和粪便中缺失钠离子并且造成体内严重的盐失衡。主要特征是血液中含有低水平的钠(低钠血症)和高水平的钾(高钾血症)。这种紊乱涉及多个器官系统，因此也被称为系统性1型PHA而使其区别于比较温和的常染色体显性(AD)或肾性1型PHA，在肾性1型PHA情况下盐损失主要局限于肾脏且是由不同基因的突变所引起的(Riepe，2009)。根据对Na的需求、对电解质失衡管理的难易程度、汗液试验结果和基因检测可以区分肾性1型PHA和系统性1型PHA(Amin等人，2013)。值得注意的是，患有系统性而非肾性假性醛固酮减少症的儿童常伴有病因不明的下呼吸道疾病且常被误诊为患有囊胞性纤维症(Hanukoglu等人，1994；Marthinsen等人，1998；Huber等人，2010。)首次诊断患有1b型PHA的新生儿典型地具有升高的肾素值和醛固酮值，但不能维持血压。1B型PHA患者的实验室评估显示出增加的血浆肾素活性，具有高血清醛固酮浓度和已经提到的低钠血症以及高钾血症。对高钾血症进行积极盐置换和控制是必要的以确保存活下来。常染色体隐性I型假性醛固酮减少症(1B型PHA)是由编码上皮钠通道(ENaC)的亚基(α亚基、β亚基、γ亚基)的三种基因中的任意一种的纯合突变和复合杂合突变引起的。由于编码上皮钠通道(ENaC)的α亚基、β亚基和γ亚基的三种基因中的任意一种的突变，因此表达突变体氨基酸序列的ENaC蛋白是不完整的或不同于成熟(非突变型)ENaC。突变型ENaC几乎是无活性的且并不促进钠离子跨越细胞和细胞膜的运输。系统性1型PHA的临床表现发生在新生儿阶段，其通常是根据汗液中Na浓度升高以及鼻腔或直肠中缺乏经上皮压差而做出诊断(Riepe，2009)。临床表型为严重的肾性盐耗、高钾血症、代谢性酸中毒以及血浆肾素和醛固酮水平升高中的一种。患有AR1型PHA的儿童常常表现出由Na-依赖性体液吸收减少和气道表面体液体积变大引起的肺部并发症(Kerem等人，1999)。呼吸系统症状的发作通常在出生几周或几个月内，并经常观察到持续性鼻溢、复发性耳部和鼻窦感染、胸闷、咳嗽和呼吸急促(通常伴随有发热、喘鸣和湿啰音)。在每年可能会发作几次的呼吸系统疾病发作期间，患者的胸部X-射线结果可能显示出支气管增厚、肺膨胀不全和/或小绒毛浸润(Thomas等人，2002)。肺部并发症有时是致命的(Sharma等人，2013)。常染色体隐性I型假性醛固酮减少症是一种终身疾病且随着时间推移没有什么改善(Zennaro等人，2004)。患有1B型PHA的患者都面临着在他们整个人生中都伴随有严重高钾血症和脱水症的危及生命的失盐危象。现阶段，1B型PHA的治疗仅限于对体液和电解质的管理。目前1B型PHA的对症治疗是减少过量肺部液体的β2受体激动剂疗法与恢复电解质平衡的对高钾血症的积极盐置换和控制相结合。
技术实现思路
目前还不存在基于药物使功能丧失突变型ENaC的Na+离子运输能力恢复或至少提高的疗法。因此，本专利技术的目的是提供基于药物使功能丧失突变型ENaC的Na+离子运输能力恢复到生理水平的疗法。该目的通过以下环状多肽得到解决，该环状多肽包括氨基酸序列SEQIDNO:1Gly-Gln-Arg-Glu-Thr-Pro-Glu-Gly-Ala-Glu-Ala-Lys-Pro-Trp-Tyr中的至少6个连续氨基酸，用于在治疗常染色体隐性1型假性醛固酮减少症(1B型PHA)中使用或用于恢复功能丧失突变型ENaC的Na+离子运输能力中使用。虽然目前并不存在基于药物使几乎没有活性的突变型ENaC转变为生理活性的ENaC的疗法，但是已经发现，根据本专利技术的环状多肽使得功能丧失突变型ENaC的Na+离子运输能力恢复至正常水平以补偿氨基酸突变。尽管如下详述的环肽已被描述为调节“正常”(野生型活性)非突变型ENaC的ENaC活性，但令人惊讶的是，环肽还能够补偿氨基酸突变并将功能丧失突变型ENaC恢复至正常水平。在优选的实施方式中，环状多肽包括氨基酸序列SEQIDNO:1中的至少9个连续氨基酸。结果表明，包括SEQIDNO:1的氨基酸序列Thr-Pro-Glu-Gly-Ala-Glu(＝SEQIDNO:5)的环状多肽显示出与ENaC受体的最强结合。因此，在一个实施方式中，优选的是环状多肽包括SEQIDNO:1的氨基酸序列SEQIDNO:5Thr-Pro-Glu-Gly-Ala-Glu。在一个实施方式中，环状多肽以氨基酸序列Gly-Gln-Arg-Glu-Thr-Pro-Glu-Gly-Ala-Glu-Ala-Lys-Pro-Trp-Tyr为特征。存在不同的成环方式以提供根据本专利技术的环状多肽。a)在一个实施方式中，环状环由多肽中用于形成肽主链的若干个单个氨基酸之间的酰胺键和用于成环的两个半胱氨酸氨基酸之间的二硫桥键形成。因此，一个实施方式中，包含在两个半胱氨酸氨基酸之间的二硫键。在该实施方式中，多肽优选地包括SEQIDNO:2Cys-Gly-Gln-Arg-Glu-Thr-Pro-Glu-Gly-Ala-Glu-Ala-Lys-Pro-Trp-Tyr-Cys，其中二硫键形成在SEQIDNO:2中第一位Cys和第17位Cys之间。那么，优选的环状多肽会是SEQIDNO:3也称为AP301。b)在一个实施方式中，环状环由多肽中用于形成环形多肽的若干个单个氨基酸之间的酰胺键形成。在一个实施方式中，该环状环包含非天然氨基酸，如γ-氨基丁酸(GABA)。那么，优选的环状多肽会是SEQIDNO:4也称为AP318。在上述所有实施方式中最优选的是，环状多肽以包括SEQIDNO:1中的至少10个，优选至少14个氨基酸的环状多肽为特征。本专利技术的一个方面涉及包括上述环状多肽的药物组合物。本专利技术涉及含有根据本专利技术的环肽(或根据本专利技术的肽混合物)和药物载体分子的药物组合物。该药物组合物用于治疗1B型PHA。术语“药物组合物”是指含有如上所述使功能丧失突变型ENaC的Na+离子运输能力恢复至正常水平的环肽的任何组合物或制剂。特别地，表达“药物组合物”是指包括根据本专利技术的环肽和药学上可接受的载体分子或辅料(这两个术语可互换使用)的组合物。合适的载体或辅料是本领域技术人员所已知的，例如生理盐水、林格氏溶液、葡萄糖溶液、缓冲液、Hank溶液、泡囊形成化合物、固定油、油酸乙酯、葡萄糖盐、增强等渗性和化学稳定性的物质、缓冲剂和防腐剂。其它合适的载体包括其本身并不诱导患者体内产生对患者有害的抗体的任何载体。示例本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种环状多肽，包括氨基酸序列SEQ ID NO:1Gly‑Gln‑Arg‑Glu‑Thr‑Pro‑Glu‑Gly‑Ala‑Glu‑Ala‑Lys‑Pro‑Trp‑Tyr中的至少6个连续氨基酸，用于在治疗常染色体隐性1型假性醛固酮减少症(1B型PHA)中使用或用于在恢复功能丧失突变型ENaC的Na

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.09.14 EP 15185093.01.一种环状多肽，包括氨基酸序列SEQIDNO:1Gly-Gln-Arg-Glu-Thr-Pro-Glu-Gly-Ala-Glu-Ala-Lys-Pro-Trp-Tyr中的至少6个连续氨基酸，用于在治疗常染色体隐性1型假性醛固酮减少症(1B型PHA)中使用或用于在恢复功能丧失突变型ENaC的Na+离子运输能力中使用。2.根据权利要求1使用的所述环状多肽，其特征在于所述环状多肽包括SEQIDNO:1中的氨基酸序列SEQIDNO:5Thr-Pro-Glu-Gly-Ala-Glu。3.根据权利要求1使用的所述环状多肽，其特征在于所述氨基酸序列SEQIDNO:1中的至少7个连续氨基酸。4.根据权利要求1至3中任一项使用的所述环状多肽，其特征在于所述氨基酸序列SEQIDNO:1Gly-Gln-Arg-Glu-Thr-Pro-Glu-Gly-Ala-Glu-Ala-Lys-Pro-Trp-Tyr。5.根据权利要求1至4中任一项使用的所述环状多肽，其特征在于环状环包含两个半胱氨酸氨基酸之间的二硫键。6.根据权利要求1至5中任一项使用的所述环状多肽，其特征在于所述多肽包括SEQIDNO:2Cys-Gly-Gln-Arg-Glu-Thr-Pro-Glu-Gly-Ala-Glu-Ala-Lys-Pro-Trp-...

【专利技术属性】
技术研发人员：安妮塔·威廉，罗撒·莱门斯格鲁伯，苏珊·简·特佐特佐斯，伯纳德·费希尔，瓦希德·沙比尔，鲁道夫·卢卡斯，
申请(专利权)人：阿佩普蒂科研究和开发有限责任公司，
类型：发明
国别省市：奥地利,AT