The method of detecting the concentration of Kama in blood is to use liquid chromatography analysis instrument and ultraviolet detector to calibrate the standard solution. The standard curve equation is y = a*x+b, and the blood samples are measured. The liquid chromatography analysis instrument and ultraviolet detector are also used after the treatment of the blood to be detected. The sample of the measured blood was detected and the y value of the measured blood was obtained. The measured blood y was replaced by the standard curve equation. The relative concentration of the target object in the sample of the blood was calculated to be x, and the concentration of the working fluid of the internal standard was known. Combined with high performance liquid chromatography (HPLC), the standard method is accurate, fast and specific. It has a high degree of separation and sensitivity. It provides reliable experimental data for the clinical C Masi Bing blood concentration monitoring. It is more convenient for doctors to provide accurate C Masi Bing drug delivery scheme for patients in time.
【技术实现步骤摘要】
一种检测血液中卡马西平含量的液相色谱分析方法
本专利技术涉及精神类药物的临床血药浓度监测
,尤其涉及一种检测血液中抗癫痫药物卡马西平浓度的方法。
技术介绍
卡马西平(Carbamazepine,CBZ),分子式C15H12N2O,其化学结构为5H-二苯并[b,f]氮杂卓-5-甲酰胺,具体结构如图1所示。CBZ常用于对抗癫痫发作,是简单部分性发作尤其是复杂部分性癫痫的首选药物,对大发作、局限性发作和混合型癫痫亦有疗效。此外,另有临床精神疾病研究指出,其可用于治疗精神分裂症和双相型障碍等。该药物有效浓度为4-12mg/L,具有安全范围小、体内代谢个体差异大、毒性较强等特点,且其疗效和不良反应与血液中药物浓度密切相关,需要根据血药浓度调整给药方案,故有必要对其进行临床血药浓度监测。目前,卡马西平血药浓度测定的常见方法有:紫外分光光度法、荧光偏振免疫法、高效液相色谱法、气相色谱-质谱联用法、液相色谱-质谱联用法等。在众多的方法中,液相色谱法为测定卡马西平的首选方法。以往方法存在前处理复杂、干扰因素多、分析时间长、灵敏度不高、定性定量不够准确的问题。
技术实现思路
针对上述技术问题,本专利技术目的是提供一种检测血液中卡马西平药物浓度的方法,该方法准确、快速、特异性强,具有较高的分离度。本专利技术采用以下技术方案:本专利技术的一种检测血液中卡马西药物浓度的方法,其中:它包括以下步骤:(一)标准溶液的标定首先将至少三种不同浓度的标准工作液10μL分别和10μL内标工作液及由1∶1体积比例甲醇与水组成的80μL复溶液混合制成至少三种标准溶液,上述标准溶液分别在转速为12 ...
【技术保护点】
一种检测血液中卡马西药物浓度的方法,其特征在于:它包括以下步骤:(一)标准溶液的标定首先将至少三种不同浓度的标准工作液10μL分别和10μL内标工作液及由1∶1体积比例甲醇与水组成的80μL复溶液混合制成至少三种标准溶液,上述标准溶液分别在转速为1200‑2000rpm下涡旋混匀30s‑1min后,使用液相色谱分析仪器和紫外检测器对上述标准溶液进行检测,得出上述至少三种标准溶液的卡马西和内标色谱图,在上述卡马西和内标色谱图中分别得到标准目标物峰面积与内标物峰面积,以上述至少三个标准目标物峰面积与内标物峰面积的比值作为标准曲线图的纵坐标y,以上述标准工作液浓度与内标工作液浓度的比值即相对浓度为作为标准曲线图的横坐标x,将以上检测所得至少三组数据进行线性回归,拟合得到标准曲线方程为y=a*x+b,并且得出权重系数a和b;所述标准工作液为卡马西溶液,所述内标工作液为环庚米特溶液;(a)标准工作液的配制:精确称取卡马西标准品15mg置于10ml容量瓶,用含水量为0%‑25%的甲醇溶液进行溶解,并定容于10ml,得到标准储备液A,将标准储备液A用含水量为30%‑60%的甲醇溶液的稀释液进行稀释, ...
【技术特征摘要】
1.一种检测血液中卡马西药物浓度的方法,其特征在于:它包括以下步骤:(一)标准溶液的标定首先将至少三种不同浓度的标准工作液10μL分别和10μL内标工作液及由1∶1体积比例甲醇与水组成的80μL复溶液混合制成至少三种标准溶液,上述标准溶液分别在转速为1200-2000rpm下涡旋混匀30s-1min后,使用液相色谱分析仪器和紫外检测器对上述标准溶液进行检测,得出上述至少三种标准溶液的卡马西和内标色谱图,在上述卡马西和内标色谱图中分别得到标准目标物峰面积与内标物峰面积,以上述至少三个标准目标物峰面积与内标物峰面积的比值作为标准曲线图的纵坐标y,以上述标准工作液浓度与内标工作液浓度的比值即相对浓度为作为标准曲线图的横坐标x,将以上检测所得至少三组数据进行线性回归,拟合得到标准曲线方程为y=a*x+b,并且得出权重系数a和b;所述标准工作液为卡马西溶液,所述内标工作液为环庚米特溶液;(a)标准工作液的配制:精确称取卡马西标准品15mg置于10ml容量瓶,用含水量为0%-25%的甲醇溶液进行溶解,并定容于10ml,得到标准储备液A,将标准储备液A用含水量为30%-60%的甲醇溶液的稀释液进行稀释,分别在含有5.00mg/L-400.0mg/L卡马西的范围内配置出各标准工作液,并在-80℃条件下保存;(b)内标工作液的配制:精确称取环庚米特标准品10mg置于10mL容量瓶,用含水量为0%-25%甲醇溶解,并定容于10mL,得到标准储备液B,将标准储备液B用含水量为30%-60%的甲醇溶液的稀释液进行稀释,得到浓度为300mg/L的内标工作液,并在-20℃条件下保存;(二)检测血液的离心取待检测血液至少5ml,在离心速度为3500rpm下离心10min,取上清液得血清或血浆,上述血清或血浆置于-20℃冷冻下保存至分析前备用;(三)待测样品处理(c)用移液枪移取10μL步骤(b)中所述内标工作液于1.5ml离心管中,然后加入100μL步骤(二)中所述血清或血浆,在1200-2000rpm的转速下涡旋震荡混合20s-1min;(d)用移液枪移取800uL的乙酸乙酯加入步骤(c)的离心管中,在1200-2000rpm的转速下涡旋震荡混合4-6min,再在10000-15000rpm的转速下高速离心4-6min,得到上清液;(e)取步骤(d)上清液600uL放入另一支1.5ml离心管中,在常温下用N2缓慢吹干;(f)...
【专利技术属性】
技术研发人员:魏斌,王超,贾永娟,倪君君,
申请(专利权)人:北京和合医学诊断技术股份有限公司,
类型:发明
国别省市:北京,11
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