一种复合益生菌腐熟剂及其制备方法与应用技术

本申请提供一种复合益生菌腐熟剂及其制备方法与应用，所述复合益生菌腐熟剂由植物乳杆菌P‑8菌剂、植物乳杆菌C2菌剂、枯草芽孢杆菌HM‑66菌剂、地衣芽孢杆菌BL‑S菌剂以及稀释载体混合复配，其中两种植物乳杆菌菌剂的活菌数量均≥2×10

Compound probiotics decomposing agent and preparation method and application thereof

The application provides a compound probiotic maturing agent and its preparation method and application. The compound probiotic maturing agent is composed of Lactobacillus plantarum P 8, Lactobacillus plantarum C2, Bacillus subtilis HM 66, Bacillus lichenibacillus, BL S bactericide and dilution carrier, among which two kinds of Lactobacillus bacteria are alive. The number of bacteria was more than 2 * 10

【技术实现步骤摘要】
一种复合益生菌腐熟剂及其制备方法与应用
本专利技术属于生物
，具体涉及一种复合益生菌腐熟剂及其制备方法与应用。
技术介绍
随着规模化、集约化畜禽养殖场的不断增多，禽畜粪便排放量也逐渐增多，绝大部分的畜禽粪便并未被当作一种有利的资源进行利用，而被任意地排放或丢弃到环境中，使很大一部分资源变成了环境污染源，不仅给环境造成了相当大的负面影响，也给环境和居民生活带来不利影响。实际上，大规模的畜禽粪污，是巨大的资源库，畜禽粪便不同于许多工业污染源，其中含有丰富的有机物质，此外还含有大量农作物生长所必需的氮、磷、钾等多种营养成分。如果得到适宜的发酵处理后施用于农田中，对于增强土壤的持续生产力、改善士壤的结构、提高土壤的肥力具有重要的作用。但是传统的禽畜粪便堆肥常因腐熟不彻底或无害化效果不佳而存在很大的潜在危害。畜禽粪便中存在大量大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、线虫等病原菌，如果不能进行有效的无害化处理会导致病原菌的传播，不仅引发作物发病，更有可能影响人类健康。并且，如果将发酵不充分的畜禽粪便有机肥施到土壤中，当具备了发酵条件时，有机肥便会重新启动发酵，在此过程中，微生物分解有机质的过程中消耗土壤中的氧气，致使土壤处于暂时性缺氧状态，同时发酵产生的热量无法迅速散开，并且该过程会大量争夺土壤中的氮元素，造成植物可利用的氮素缺少，造成作物生长受到抑制。并且施入腐熟不彻底的有机肥在继续发酵分解的过程中产生甲烷、氨等有害气体，污染周围环境，滋生大量蚊蝇，蚕食作物茎叶并污染环境。此外，传统的禽畜粪便腐熟周期太长，这样不仅无法进行规模化生产，而且会造成严重的养分流失。因此，需要开发一种能够使粪肥发酵过程中热量及时散开、提高粪肥中氮元素含量、腐熟效率高的腐熟剂。
技术实现思路
为解决上述技术问题，本申请提出一种复合益生菌腐熟剂及其制备方法与应用，以解决粪肥发酵过程中热量不能及时散开，粪肥中氮元素含量低的问题。第一方面，提供一种复合益生菌腐熟剂，包括植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)C2，其保藏编号为CGMCCNo.14532；枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)和地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)。结合第一方面，在第一方面第一种可能的实现方式中，其中植物乳杆菌C2的有效活菌数≥2×1011CFU/g，枯草芽孢杆菌的有效活菌数≥1×1011CFU/g，植物乳杆菌的有效活菌数≥2×1011CFU/g，地衣芽孢杆菌的有效活菌数为≥1×1011CFU/g。结合第一方面第一种可能实现的方式，在第一方面第二种可能的实现方式中，所述复合乳酸菌微生态制剂中总有效活菌数为≥1×1010CFU/g，优选为1.6×1010CFU/g。结合第一方面第二种可能实现的方式，在第一方面第三种可能的实现方式中，还包括保护剂，所述保护剂组分包括：脱脂乳粉30-35g/L，脱盐乳清粉15-20g/L，工业海藻糖15-20g/L，维生素C3-4g/L，卵磷脂0.05-0.08g/L，余量为蒸馏水，pH值7.0±0.2；优选地，所述保护剂组分包括：脱脂乳粉32g/L，脱盐乳清粉18g/L，工业海藻糖18g/L，维生素C3.5g/L，卵磷脂0.06g/L，余量为蒸馏水，pH值7.0；和/或，所述复合益生菌腐熟剂中保护剂的重量百分含量为8-40％，优选为30％。结合第一方面至第一方面第三种任一项可能实现的方式，在第一方面第四种可能的实现方式中，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌HM-66，其保藏编号为CGMCCNo.6733；植物乳杆菌为植物乳杆菌P-8，其保藏编号为CGMCCNo.6312；地衣芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌BL-S，其保藏编号为CGMCCNo.6725。第二方面，提供一种复合益生菌腐熟剂的制备方法，包括以下步骤：步骤1，将植物乳杆菌C2、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌和地衣芽孢杆菌分别进行一级发酵，得到对应的一级种子培养液；步骤2，将植物乳杆菌C2、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌和地衣芽孢杆菌的一级种子培养液分别进行二级发酵，得到对应的二级种子培养液；步骤3，将植物乳杆菌C2、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌和地衣芽孢杆菌的二级种子培养液分别接种于不同的发酵培养基中进行三级发酵，得到对应的三级发酵培养液；步骤4，将植物乳杆菌C2、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌和地衣芽孢杆菌的三级发酵培养液分别离心，得到植物乳杆菌C2菌体、枯草芽孢杆菌菌体、植物乳杆菌菌体和地衣芽孢杆菌菌体；步骤5，将植物乳杆菌C2菌体、枯草芽孢杆菌菌体、植物乳杆菌菌体和地衣芽孢杆菌菌体分别与保护剂溶液按质量比1：5-10混合，得到菌悬液，所述菌悬液通过冷冻干燥，分别得到植物乳杆菌C2菌剂、枯草芽孢杆菌菌剂、植物乳杆菌菌剂和地衣芽孢杆菌菌剂；步骤6，将植物乳杆菌C2菌剂、枯草芽孢杆菌菌剂、植物乳杆菌菌剂和地衣芽孢杆菌菌剂按质量比1-4：1-4：1-4：2-7混合，并与稀释载体复配，得到复合益生菌腐熟剂。结合第二方面，在第二方面第一种可能的实现方式中，所述一级种子培养液中植物乳杆菌C2的有效活菌数≥2×109CFU/g，枯草芽孢杆菌的有效活菌数≥1×109CFU/g，植物乳杆菌的有效活菌数≥2×109CFU/g，地衣芽孢杆菌的有效活菌数为≥1×109CFU/g；所述二级种子培养液中植物乳杆菌C2的有效活菌数≥1×109CFU/g，枯草芽孢杆菌的有效活菌数≥2×109CFU/g，植物乳杆菌的有效活菌数≥1×109CFU/g，地衣芽孢杆菌的有效活菌数为≥2×109CFU/g；所述三级发酵培养液中植物乳杆菌C2的有效活菌数≥1×109CFU/g，枯草芽孢杆菌的有效活菌数≥1×109CFU/g，植物乳杆菌的有效活菌数≥1×109CFU/g，地衣芽孢杆菌的有效活菌数为≥1×109CFU/g。结合第二方面，在第二方面第二种可能的实现方式中，所述一级发酵的发酵条件包括：植物乳杆菌C2、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌和地衣芽孢杆菌分别在温度33-37℃，转速50-100r/m条件下培养18-24h；所述二级发酵的发酵条件包括：植物乳杆菌C2、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌和地衣芽孢杆菌的一级种子培养液分别在温度33-37℃，转速50-100r/m条件下培养18-24h；所述三级发酵的发酵条件包括：植物乳杆菌C2、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌和地衣芽孢杆菌的二级种子培养液分别在温度均33-37℃，转速50-100r/m，通风量0.3-1L/min，发酵全程调节发酵液相同pH值为5.6-6.2条件下培养8-12h。结合第二方面，在第二方面第三种可能的实现方式中，所述发酵培养基的组分包括：蔗糖50-80g/L，酵母粉20-40g/L，大豆蛋白胨8-20g/L，MgSO4.7H2O1.5-2.0g/L，MnSO4.5H2O0.08-0.12g/L，吐温-800.8-1.0ml，余量为水，pH7.0；优选地：蔗糖40g/L，脱盐乳清粉10g/L，酵母粉30g/L，大豆蛋白胨15g/L，MgSO4.7H2O2.0g/L，MnSO4.5H2O0.1g/L，吐温-801.0ml，余量为水，pH7.0。第三方面，本申请还提供上述复合益生菌腐熟剂在粪本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种复合益生菌腐熟剂，其特征在于，包括植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)C2，其保藏编号为CGMCC No.14532；枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)和地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。

【技术特征摘要】
1.一种复合益生菌腐熟剂，其特征在于，包括植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)C2，其保藏编号为CGMCCNo.14532；枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)和地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)。2.根据权利要求1所述的复合益生菌腐熟剂，其特征在于，其中植物乳杆菌C2的有效活菌数≥2×1011CFU/g，枯草芽孢杆菌的有效活菌数≥1×1011CFU/g，植物乳杆菌的有效活菌数≥2×1011CFU/g，地衣芽孢杆菌的有效活菌数为≥1×1011CFU/g。3.根据权利要求2所述的复合益生菌腐熟剂，其特征在于，所述复合乳酸菌微生态制剂中总有效活菌数为≥1×1010CFU/g，优选为1.6×1010CFU/g。4.根据权利要求3所述的复合益生菌腐熟剂，其特征在于，还包括保护剂，所述保护剂组分包括：脱脂乳粉30-35g/L，脱盐乳清粉15-20g/L，工业海藻糖15-20g/L，维生素C3-4g/L，卵磷脂0.05-0.08g/L，余量为蒸馏水，pH值7.0±0.2；优选地，所述保护剂组分包括：脱脂乳粉32g/L，脱盐乳清粉18g/L，工业海藻糖18g/L，维生素C3.5g/L，卵磷脂0.06g/L，余量为蒸馏水，pH值7.0；和/或，所述复合益生菌腐熟剂中保护剂的重量百分含量为8-40％，优选为30％。5.根据权利要求1-4任一项所述的复合益生菌腐熟剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌HM-66，其保藏编号为CGMCCNo.6733；植物乳杆菌为植物乳杆菌P-8，其保藏编号为CGMCCNo.6312；地衣芽孢杆菌为地衣芽孢杆菌BL-S，其保藏编号为CGMCCNo.6725。6.权利要求1-5任一项所述的复合益生菌腐熟剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，将植物乳杆菌C2、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌和地衣芽孢杆菌分别进行一级发酵，得到对应的一级种子培养液；步骤2，将植物乳杆菌C2、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌和地衣芽孢杆菌的一级种子培养液分别进行二级发酵，得到对应的二级种子培养液；步骤3，将植物乳杆菌C2、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌和地衣芽孢杆菌的二级种子培养液分别接种于不同的发酵培养基中进行三级发酵，得到对应的三级发酵培养液；步骤4，将植物乳杆菌C2、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌和地衣芽孢杆菌的三级发酵培养液分别离心，得到植物乳杆菌C2菌体、枯草芽孢杆菌菌体、植物乳杆菌菌体和地衣芽孢杆菌菌体；步骤5，将植物乳杆菌C2菌体、枯草芽孢杆菌菌体、植物乳杆菌菌体和地衣芽孢杆菌菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄卫强，张永军，
申请(专利权)人：内蒙古和美科盛生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：内蒙古,15