一种药物组合物的检测方法技术

本发明专利技术提供一种药物组合物的检测方法，所述的药物组合物为含有贯叶金丝桃提取物、刺五加提取物或二者的混合提取物的药物组合物，利用液相色谱法其进行检测。所述液相色谱检测条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为乙腈，流动相B为弱酸溶液，检测波长为260nm,流速为1.0ml/min，柱温为35℃,采用梯度洗脱。该方法具有快速、高效、稳定、准确等优点，能够快速、有效地对药物组合物进行检测。

A method for the detection of drug composition

The invention provides a method for the detection of a pharmaceutical composition. The pharmaceutical composition is a pharmaceutical composition containing a mixture of extract of Hypericum Hypericum, extract of Acanthopanax senticosus or two, and is detected by liquid chromatography. The test conditions of liquid chromatography are: chromatography column: Eighteen alkyl silane bonded silica as filler; mobile phase A is acetonitrile, mobile phase B is weak acid solution, detection wavelength is 260nm, flow rate is 1.0ml/min, column temperature is 35 C, gradient elution is used. The method is rapid, efficient, stable and accurate, and can be used for rapid and effective detection of pharmaceutical compositions.

【技术实现步骤摘要】
一种药物组合物的检测方法
本专利技术涉及药物检测领域，具体涉及一种药物组合物的检测方法。
技术介绍
贯叶金丝桃已经有2400年的使用历史，近年来对贯叶金丝桃的研究热点放在抗抑郁功效方面含有多种具生物活性的化学成分，其中主要是苯并二蒽酮类化合物、有机酸类化合物、金丝桃素和伪金丝桃素；多种芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素、萹蓄苷、穗花杉双黄酮、间苯三酚类化合物等；其中以芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素、萹蓄苷、穗花杉双黄酮为主要化合物。现代药理证明，芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素、绿原酸、萹蓄苷等均对在小鼠FST中均表现出明显的抗抑郁活性，是贯叶金丝桃抗抑郁症的主要活性成分。最新研究证实，穗花杉双黄酮（AF）在小鼠动物模型中表现出显著的抗抑郁和抗焦虑作用其作用强度均高于传统药物丙咪嗪和地西泮，且药物安全谱宽，没有不良影响（ISHOLAIO，CHATTERJEEM，TOTAS，eta1．AntidepressantandanxiolyticeffectsofamentoflavoneisolatedfromCnestisfer-rugineainmice．PharmacolBiochemBehav，2012，103(2)：322—33）。刺五加为五加科植物刺五加的干燥根和根茎或茎，具有益气健脾、补肾安神、益精壮骨之功效。现代研究表明，刺五加中含有丰富的具有广泛药理活性的皂苷类、黄酮类及有机酸类化合物，如刺五加苷A、B、C、D、E、绿原酸等（刺五加的研究进展，国土与自然资源研究，李丽辉等，2008）。2010年版《中国药典》虽以紫丁香苷(刺五加苷B)质量分数作为刺五加主要质量控制指标，但文献研究表明刺五加尚含有小分子有机酸如绿原酸、原儿茶酸等主要活性成分，紫丁香苷和绿原酸均是刺五加发挥药效作用的主要成分（HPLC法测定刺五加、五加皮与红毛五加皮中3种成分的含量，广东药学院学报，2015年10月第31卷第5期）。由此可见，可见紫丁香苷、绿原酸均是刺五加十分重要的指标性成分。舒肝解郁胶囊是由贯叶金丝桃和刺五加为原料，采用现代制药工艺制备而成的中成药，具有疏肝解郁、健脾安神的功效，临床常用于轻、中度抑郁症属肝郁脾虚证者，症见情绪低落、兴趣下迟滞、入睡困难、早醒、多梦、紧张不安、急躁易怒、食少纳呆、胸闷、疲乏无力、多汗、疼痛、舌苔白或腻，脉弦或细。由于舒肝解郁胶囊同时包含了贯叶金丝桃和刺五加两种药材的多种化学成分，包括：金丝桃苷、芦丁、槲皮素、槲皮苷、萹蓄苷、异槲皮苷、穗花杉双黄酮以及紫丁香苷、绿原酸等，这些化学成分分别涉及黄酮类、有机酸类、糖类化合物等不同化学结构，理化性质各有不同，在定性和定量检测中常常互相干扰，要利用HPLC方法准确将目标物质同其他杂质有效分离并且定量分析存在较大难度，成方制剂的质量控制更为困难。《中国药典（2015版）》和韩林等所介绍的高效液相色谱检测方法（金丝桃苷含量的RP-HPLC法测定，时珍国医国药2012年第23卷第10期）均无法检测出槲皮素；例如钱秋霞等所报道的方法，（HPLC法测定不同干燥方法的贯叶连翘中黄酮类化合物的含量，中草药,2001，32,5）其分离度达不到分离要求（分离度一般要求大于1.5），其主要物质峰中还包含大量杂质；李萍等人（HPLC测定贯叶金丝桃中黄酮的含量，李萍等，药学学报，2002）采用乙腈-磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱，流速1.0ml/min，检测波长254nm，用于检测贯叶金丝桃中4中黄酮类成分（芦丁、金丝桃苷、萹蓄苷、槲皮素）的检测，申请人将该方法用于金丝桃苷、芦丁、槲皮素、槲皮苷、异槲皮苷及紫丁香苷同时测定时发现在上述色谱条件下，紫丁香苷和异槲皮苷的分离度分别为0.8和1.47，均不符合要求，且槲皮素附近基线起伏较大，无法进行准确定量；魏淑梅等人（HPLC法测定刺五加总苷总黄酮软胶囊中刺五加苷E含量，魏淑梅等，黑龙江医药，2011）建立了以乙腈-0.1%冰乙酸（14:86）为流动相，流速1.0ml/min，检测波长210nm的HPLC方法，用于刺五加总苷总黄酮软胶囊中刺五加苷E的含量测定，但该方法用于上述6种化学成分的同时测定时，紫丁香苷分离度仅1.2，且附近基线波动较大，黄酮类成分响应太低，且75min内未见槲皮素出峰。可见，现有技术公开的单一种类化学成分的检测方法无法满足舒肝解郁胶囊中多种类化学成分的同时定性和定量。为了能更全面、更有效的进行舒肝解郁胶囊的质量控制，有必要建立一个快速、简便、准确可靠的分析方法，以用于舒肝解郁胶囊中多种指标成分的同时定性和定量分析。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种快速、简便、准确可靠的分析方法，用于含有贯叶金丝桃提取物、刺五加提取物或二者的混合物中多种指标成分的同时定性和定量分析。本专利技术提供一种药物组合物的质量检测方法，该方法包括以下步骤：取适量药物组合物制备成供试品溶液，利用液相色谱法对其进行检测，其中所述液相色谱的色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为乙腈，流动相B为弱酸溶液，采用梯度洗脱；其中所述药物组合物为含有贯叶金丝桃提取物、刺五加提取物或二者的混合物。本专利技术提供的药物组合物的检测方法，其所述的梯度洗脱条件优选为：本专利技术提供的药物组合物的检测方法，其中所述液相色谱检测条件中弱酸溶液为乙酸、甲酸、磷酸、三氟乙酸，优选乙酸。本专利技术提供的药物组合物的检测方法，其中所述液相色谱检测条件中弱酸溶液浓度为0.1%-0.4%，优选0.2%。本专利技术提供的药物组合物的检测方法，其中所述液相色谱检测条件中，柱温为25-35℃，优选35℃；流速为0.8-1.2ml/min，优选1.0ml/min，进样体积为10μl。本专利技术提供的药物组合物的检测方法，其中所述供试品溶液的制备方法优选为，取适量药物组合物，用含醇溶液溶解，提取，过滤，即得；其中所述含醇溶液为含有80%或以上的甲醇或乙醇的溶液；更优选为80%甲醇溶液；所述提取方法优选为超声提取。上述供试品溶液的制备方法优选含有如下步骤：取含有贯叶金丝桃提取物、刺五加提取物或二者的混合物，混匀，研细，取约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇25ml，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。上述含贯叶金丝桃提取物、刺五加提取物或二者的混合物中活性成分优选为贯叶金丝桃和刺五加制备而成；更优选为舒肝解郁胶囊。本专利技术所使用的色谱柱为常规的以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，如C18(2)5μm，250×4.6mm、SHIMaDzuVP-ODS(250×4.6mm,5μm)、AgilentC18(250×4.6mm,5μm)、PhenomenexLunaC18(250×4.6mm,5μm)、PhenomenexLunaC18(150×4.6mm,5μm)等；以规格为250×4.6mm,5μm效果更优。本专利技术通过考察二极管阵列检测器（DAD检测器检测）检测含有贯叶金丝桃提取物、刺五加提取物或二者的混合物（如舒肝解郁胶囊内容物）时，获知吸收波长在205nm、220nm、260nm、300nm和360nm附近均出现吸收峰值，其中检测波长为205、220nm时，梯度基线漂移大；检测波长为300n本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种药物组合物的检测方法，其特征在于取适量药物组合物制备成供试品溶液，利用液相色谱法对其进行检测；所述液相色谱色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为乙腈，流动相B为弱酸溶液，采用梯度洗脱；所述药物组合物为含有贯叶金丝桃提取物、刺五加提取物或二者的混合物。

【技术特征摘要】
1.一种药物组合物的检测方法，其特征在于取适量药物组合物制备成供试品溶液，利用液相色谱法对其进行检测；所述液相色谱色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为乙腈，流动相B为弱酸溶液，采用梯度洗脱；所述药物组合物为含有贯叶金丝桃提取物、刺五加提取物或二者的混合物。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述弱酸溶液为乙酸、甲酸、磷酸、三氟乙酸，优选乙酸；所述弱酸溶液浓度为0.1％-0.4％，优选0.2％。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述梯度洗脱条件为：4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述检测波长为260nm。5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述柱温为30℃-35℃，优选35℃。6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述流速为0.8-1.2ml/min，优选1.0ml/min；所述色谱柱规格为250×4.6mm,5μm；所述进样体积为10μl。7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述供试品溶液的制备方法包含以下步骤：取适量药物组合物，用含醇溶液溶解，提取，过滤，即得；其中所述含醇溶液为含有80％或以上的甲醇或乙醇的溶液；更优选为80％甲醇溶液；所述提取方法优选为超声提取。8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述含有贯叶金丝桃提取物、刺五加提取物或二者的混合物中活...

【专利技术属性】
技术研发人员：柯潇，陈海燕，罗旭，杨宋琪，
申请(专利权)人：四川济生堂药业有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51