一种基于RAA荧光法检测十二指肠钩虫的引物、试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种基于RAA荧光法检测十二指肠钩虫的引物、试剂盒，属于分子生物学技术领域。所述引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物具有如序列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列；所述下游引物具有如序列表中SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。本发明专利技术提供的引物适用于RAA荧光法检测，并且能够准确地检测出十二指肠钩虫，特异性达100％。本发明专利技术还提供了一种基于RAA荧光法检测十二指肠钩虫的试剂盒，所述试剂盒方便准确地鉴定十二指肠钩虫的存在，仅需5～20min即可完成，无需通过高温使DNA解旋，在30～42℃下进行等温扩增即可完成检测。

【技术实现步骤摘要】
一种基于RAA荧光法检测十二指肠钩虫的引物、试剂盒
本专利技术属于分子生物学
，具体涉及一种基于RAA荧光法检测十二指肠钩虫的引物、试剂盒。
技术介绍
十二指肠钩口线虫(Ancylostomaduodenale)，简称十二指肠钩虫，其成虫寄生在人体的小肠上段，以口囊内的钩齿咬附肠粘膜，以血液、淋巴液，脱落上皮细胞为食，虫体有不断更换咬咐部位的特点。由于机械性损伤，引起消化功能紊乱、患者出现腹部不适、腹痛、恶心、呕吐、腹胀、腹泻等症状，使患者长期慢性失血而导致贫血。钩虫病呈全球性分布，约7亿人感染，已成为非常严重的公共卫生问题。我国也是钩虫病流行较严重的国家，据2004年第二次全国人体重要寄生虫病现状调查显示，我国钩虫感染率为6.12％，感染人数高达3930万，并且这个数据没有减缓的迹象。目前检测钩虫病的技术包括病原学检测技术、免疫学检测技术和分子生物学检测技术。钩虫病的病原学检测技术主要采用幼虫培养，虫卵检查和成虫检验等，最常用的方法是虫卵检查，Tarafder等人利用虫卵检查方法检测5624份人粪便样本钩虫感染情况，该方法费时费力且需要专业经验，准确率也低，存在漏检问题(Es本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于RAA荧光法检测十二指肠钩虫的引物，所述引物包括上游引物和下游引物，其特征在于，所述上游引物具有如序列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列；所述下游引物具有如序列表中SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种基于RAA荧光法检测十二指肠钩虫的引物，所述引物包括上游引物和下游引物，其特征在于，所述上游引物具有如序列表中SEQIDNo.1所示的核苷酸序列；所述下游引物具有如序列表中SEQIDNo.2所示的核苷酸序列。2.一种基于RAA荧光法检测十二指肠钩虫的试剂盒，包括RAA基础荧光通用反应试剂、反应缓冲液、阴性质控品、阳性质控品和临界阳性质控品，其特征在于，还包括探针和权利要求1所述的引物；所述探针具有如序列表中SEQIDNo.3所示的核苷酸序列。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述探针采用修饰基团进行修饰；所述修饰基团包括荧光报告基团和荧光淬灭基团；荧光报告基团修饰在探针序列离5'端碱基数32bp的位置上；荧光淬灭基团修饰在探针序列离3'端碱基数16bp的位置上，荧光报告基团与淬灭基团之间间隔3个碱基位置。4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光报告基团包括FAM、HEX、TET、JOE、VIC、ROX、Cy3或Cy5；所述荧光淬灭基团包括TAMRA、Eclipse、...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴洋，王晓婷，倪碧娴，茅范贞，曹俊，郭利川，刘燕红，王智宏，应清界，
申请(专利权)人：江苏省血吸虫病防治研究所，江苏奇天基因生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32