The invention belongs to the field of biotechnology, and specifically relates to the preparation and application of nano gene medicine based on chitosan CS and CRISPR/Cas9 plasmid. The chitosan dissolved in acetic acid solution, and chitosan acetic acid solution into the water, add in proportion to the quality of chitosan and CRISPR chitosan encapsulated CRISPR/Cas9 nanoparticles made of novel gene drugs, in order to achieve better results or targeted gene transfection into the exogenous gene, thus achieving the gene delivery of drugs to cells. The invention of CS and CRISPR based on the optimal feed ratio of new nano composite CRISPR@CS, can significantly improve the gene transfection efficiency in cells and deliver more genes into the cells play a role, is expected to be widely used for gene delivery in the field of gene therapy drugs.
【技术实现步骤摘要】
CRISPR/Cas9纳米基因系统的制备及其在转染方面的应用
本专利技术属于生物
,具体涉及一种基于壳聚糖(CS)和CRISPR/Cas9质粒构建的纳米基因药物的制备及细胞转染应用。
技术介绍
甲壳素在自然界中存在量极高,来源丰富,是地球上仅次于纤维素的生物多糖,广泛存在于动物、植物、各类真菌等中,研究发现特别是甲壳纲动物(蟹、虾等)含量最高,可达58%~85%,其次为昆虫纲等,其含量可达20%~60%;另外在其他类生物,如软体动物、环节动物、原生动物、绿藻、真菌等,也含一定量的甲壳素。壳聚糖(Chitosan)是甲壳素中糖基上的N-乙酰氨基被去除后得到的一种衍生物,一般而言,壳聚糖呈直链,以β-(1,4)糖苷键连接各单元,N-乙酰氨基脱去55%以上可称之为壳聚糖,或者说,脱乙酰甲壳素能溶到1%乙酸或者1%盐酸中的量达到1%或者以上,该脱乙酰甲壳素就可以称之为壳聚糖。通常情况下,壳聚糖呈一种白色、无味的半透明固体,平均分子质量一般从几万至数百万不等。不溶于水和一般有机试剂,只有在醋酸溶液中,壳聚糖中的氨基葡萄糖单元上的游离氨基被质子化以后才能被溶解。但大量的 ...
【技术保护点】
一种CRISPR/Cas9纳米基因系统的制备方法,其特征在于:所述纳米基因系统是一种基于壳聚糖CS和CRISPR结合的新型纳米复合物CRISPR@CS,其是通过CS包载CRISPR或DNA构建的。
【技术特征摘要】
1.一种CRISPR/Cas9纳米基因系统的制备方法,其特征在于:所述纳米基因系统是一种基于壳聚糖CS和CRISPR结合的新型纳米复合物CRISPR@CS,其是通过CS包载CRISPR或DNA构建的。2.根据权利要求1所述的CRISPR/Cas9纳米基因系统的制备方法,其特征在于:室温下,配置体积分数0.1%的醋酸溶液待用,用电子天平称取壳聚糖CS加入到配好的醋酸溶液中,将醋酸缓慢滴加至壳聚糖完全溶解,磁...
【专利技术属性】
技术研发人员:邵敬伟,吴鹏宇,沈志春,张冰晨,
申请(专利权)人:福州大学,
类型:发明
国别省市:福建,35
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