一种用于检测白血病病毒载量的标准品及其检测方法技术

本发明专利技术公开了一种用于检测Ｆｒｉｅｎｄ鼠白血病病毒载量的标准品，以及用该标准品通过实时荧光定量聚合酶链式反应方法（Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ　ＲＴ－ＰＣＲ法）检测Ｆｒｉｅｎｄ鼠白血病病毒载量的方法。在检测过程中包括白血病病毒核酸（ＲＮＡ）的提取及含量测定、用引物对逆转录扩增获得核酸片段、实时荧光定量聚合酶连式反应（Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ　ＰＣＲ）检测等步骤，本发明专利技术检测Ｆｒｉｅｎｄ鼠白血病病毒载量与常规ＰＣＲ检测方法相比，具有较好的特异性，所检测的基因扩增产物为欲检测的目的基因产物，并且具有较好的线性关系，适合应用于对Ｆｒｉｅｎｄ鼠白血病病毒（Ｆｒ．ＭｕＬＶ）载量的检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学领域，涉及一种用于检测Friend鼠白血病病毒 (Fr. MuLV)载量的标准品以及用该标准品通过实时荧光定量聚合酶链式反 应方法(Real-time RT-PCR法)检测Friend鼠白血病病毒(Fr.MuLV)载 量的方法。技术背景白血病病毒(leukemia virus),是一类肿瘤病毒，它是骨髓性白血病 或淋巴性白血病等各种白血病的病因，有许多毒株。在组织培养的细胞体系 中，有时可以引起骨髓芽球和淋巴球等特定的靶细胞发生转化，但缺乏普遍 性。感染于纤维芽细胞后会发生增殖，但不引起转化。主要有三类(1)禽 白血病病毒(Avian leukosis virus, ALV):为V. Ellerman禾口 0. Bang (1908) 所分离。(2)鼠白血病病毒(Murine leukosi s virus, MuLV): 由L. Gross (1951)分离，后来又从自然产生的及放射线或致癌物诱发的白血病体中分 离出来。(3)其他1960年以后自各种实验动物及猿猴中分离的白血病病毒， 主要是猫白血病病毒(Feline leukemixvirus， Fe本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测Ｆｒｉｅｎｄ鼠白血病病毒载量的标准品，是用引物对逆转录扩增获得核酸片段，其特征在于所述病毒基因序列的引物对分别是：　５′－ＣＡＡＣＣＡＣＣＣＴＣＴＧＴＧＧＡＣＴＴ－３′和５′－ＴＧＴＡＡＡＣＣＧＧＡＴＡＧＣＣＡＡＧＧ－３′ ；　５′－ＣＧＴＧＴＴＣＡＡＣＧＣＴＣＴＣＡＡＡＡ－３′和５′－ＣＡＡＧＴＣＣＡＣＡＧＡＧＧＧＴＧＧＴＴ－３′；　５′－ＧＴＧＧＣＣＴＡＣＣＴＧＴＣＣＡＡＡＡＡ－３′和５′－ＧＡＡＧＣＡＧＡＧＣＣＴＧＧＴＡＧＴＧＧ－３′；　 　５′－ＣＴＧＧＡＡＧＣＣＣＴＣＣＴＣＴＴＣＴＴ－３′和５′－ＡＡＧＴＡＡＧＣＣＣＴＧＧＧＴＣＣＴ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：崔晓兰，时宇静，郭姗姗，
申请(专利权)人：崔晓兰，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]