一种诊治肺腺癌的分子标记物制造技术

本发明专利技术提供了一种诊治肺腺癌的分子标记物。研究表明在人和鼠的肺腺癌组织血管中，血管性血友病因子(von Willebrand factor，vWF)的mRNA和蛋白水平都显著升高。我们观察到A549细胞条件培养基使HUVECs中的vWF上调，表明肺腺癌细胞分泌的一种或多种因子使vWF上调。试验研究表明转录因子GATA3，是内皮细胞中对A549细胞分泌物做出应答的转录调节因子，导致结合到vWF基因启动子+220 GATA位点的增加和表达的增强。

A molecular marker for diagnosis and treatment of lung adenocarcinoma

The present invention provides a molecular marker for the diagnosis and treatment of lung adenocarcinoma. The study showed that in the lung adenocarcinoma tissues of human and mouse, von Willebrand factor (von Willebrand factor, vWF) mRNA and protein levels were significantly increased. We observed that the A549 cell conditioned medium up-regulated the vWF in HUVECs, indicating that one or more factors secreted by the lung adenocarcinoma cells make vWF up-regulated. Experiments show that the transcription factor GATA3, transcription responds to A549 cell secretion in endothelial cells leads to regulatory factor binding to vWF gene promoter +220 loci of GATA and increased expression enhancement.

【技术实现步骤摘要】
一种诊治肺腺癌的分子标记物
本专利技术属于医药
，具体涉一种诊治肺腺癌的分子标记物。
技术介绍
肺癌是严重危害人类健康和生命的疾病，在世界范围内其发病率和死亡率均已跃居至癌症的首位。在中国，肺癌是发病率和死亡率上升速度最快的恶性肿瘤，已取代肝癌成为恶性肿瘤死亡的首要因素。腺癌是肺癌最主要的组织学类型，占所有病例的50％以上，是肺癌防治和研究的重点之一。与其他恶性肿瘤一样，早发现、早诊断、早治疗是降低肺腺癌死亡率的关键。肺腺癌大多起源于较小的支气管粘膜分泌液的上皮细胞，大多数腺癌位于肺组织的周围，呈球形肿块，靠近胸膜部位。在周围型肺癌中，肺腺癌的发病率居肺癌各组织学类型之首，且其发病率呈明显升高趋势。肺腺癌患者中女性病人较多，发病年龄也较小。尽管临床和实验肿瘤学均取得很多新的进展，但是肺腺癌的预后仍不如人意，而造成肺腺癌高死亡率的主要原因是患者在确诊时肿瘤细胞通常已发生了侵袭和转移，缺乏有效的治疗措施。目前临床上肺腺癌早期诊断主要依赖于X线检查、支气管镜检查、放射性核素检查、细胞学检查、剖胸探查、ECT检查、纵隔镜检查等。现有的检查手段很难将肺腺癌与肺其他类型的肿瘤以及胸膜间皮瘤区别开。虽然以往有大量研究意图阐述和解释肺腺癌患者致病的具体原因，但是肺腺癌发生发展的分子生物学机制目前仍不清楚，因此，探寻肺癌细胞的恶性转化过程中的分子生物学的变化，以探寻新的有效的肺腺癌临床诊断、治疗和预后检测的标记物，阐明肺腺癌的分子机制是目前肺腺癌临床治疗和研究中面临和亟待解决的问题。
技术实现思路
针对上述现有技术的不足，专利技术人经长期的技术与实践探索，发现在人和鼠的肺腺癌组织血管中，血管性血友病因子(vonWillebrandfactor，vWF)的mRNA和蛋白水平都显著升高。我们观察到A549细胞条件培养基使HUVECs中的vWF上调，表明肺腺癌细胞分泌的一种或多种因子使vWF上调。我们的实验结果表明，转录因子GATA3，而非转录因子ERG，是内皮细胞中对A549细胞分泌物做出应答的转录调节因子，导致结合到vWF基因启动子+220GATA位点的增加和表达的增强。具体的，本专利技术涉及以下技术方案：本专利技术的第一个方面，提供了vWF/或GATA3基因及其表达产物在制备诊断肺腺癌产品中的应用；进一步的，所述产品能够通过检测肺组织中vWF基因/或GATA3表达水平来诊断患者是否患有肺腺癌，vWF/或GATA3基因的高表达与肺腺癌的发生发展相关。进一步的，所述检测vWF/或GATA3基因的表达水平的产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯片检测vWF/或GATA3基因及其表达产物的表达水平以诊断肺腺癌的产品。其中，所述用芯片诊断肺腺癌的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与vWF/或GATA3蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与vWF/或GATA3基因的核酸序列杂交的探针。进一步，所述基因芯片可用于检测包括vWF/或GATA3基因在内的多个基因(如与肺腺癌相关的多个基因)的表达水平。所述蛋白质芯片可用于检测包括vWF/或GATA3蛋白在内的多个蛋白质(如与肺腺癌相关的多个蛋白质)的表达水平。通过同时检测多个肺腺癌的标志物，可大大提高肺腺癌诊断的准确率。本专利技术的另一个方面，提供一种诊断肺腺癌的产品，所述产品能够通过检测肺组织中vWF/或GATA3基因的表达水平来诊断肺腺癌。进一步的，所述产品包括包括芯片、或试剂盒；其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；其中，蛋白芯片包括与vWF蛋白/或GATA3蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与vWF/或GATA3基因的核酸序列杂交的探针。进一步，所述基因芯片可用于检测包括vWF/或GATA3基因在内的多个基因(如，与肺腺癌相关的多个基因)的表达水平。所述蛋白质芯片可用于检测包括vWF/或GATA3蛋白在内的多个蛋白质(如与肺腺癌相关的多个蛋白质)的表达水平。通过同时检测多个肺腺癌的标志物，可大大提高肺腺癌诊断的准确率。本专利技术的另一个方面，提供vWF基因及其表达产物在制备治疗肺腺癌的药物中的应用。进一步的，所述药物包括vWF基因和/或其表达产物的抑制剂。所述抑制剂包括抑制vWF基因表达的物质、抑制vWF基因表达产物稳定性的物质、和/或抑制vWF基因表达产物活性的物质。进一步的，所述抑制剂为抑制转录因子GATA3活性的物质，优选为GATA3siRNA。本专利技术还提供一种治疗肺腺癌的药物，所述药物包括vWF基因和/或其表达产物的抑制剂。所述抑制剂包括抑制vWF基因表达的物质、抑制vWF基因表达产物稳定性的物质、和/或抑制vWF基因表达产物活性的物质。进一步的，所述抑制剂为抑制转录因子GATA3活性的物质，优选为GATA3siRNA。进一步的，所述药物还包含一种或多种药学上或食品学上可接受的辅料。所用辅料可为固态或液态。固态形式的制剂包括粉剂、片剂、分散颗粒、胶囊、药丸及栓剂。粉剂及片剂可包含约0.1％至约99.9％的活性成分。适当的固体辅料可以是碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、糖或者乳糖。片剂、粉剂、药丸及胶囊为适于口服用的固态剂型。液态形式的制剂包括溶液、悬浮液及乳液，其实施例为非经肠注射用水溶液或水-丙二醇溶液，或添加甜味剂及造影剂的口服溶液。此外，还可制成注射用小水针、注射用冻干粉针、大输液或小输液；优选的，所述药物为固体口服制剂、液体口服制剂或注射剂；进一步优选的，所述药物为片剂、分散片、肠溶片、咀嚼片、口崩片、胶囊、糖衣剂、颗粒剂、干粉剂、口服溶液剂、注射用小水针、注射用冻干粉针、大输液或小输液。本专利技术有益效果：本专利技术提供了一种诊治肺腺癌的分子标记物。我们的研究表明在人和鼠的肺腺癌组织血管中，血管性血友病因子(vonWillebrandfactor，vWF)的mRNA和蛋白水平都显著升高。我们观察到A549细胞条件培养基使HUVECs中的vWF上调，表明肺腺癌细胞分泌的一种或多种因子使vWF上调。我们的实验结果表明，是转录因子GATA3，而不是ERG，是内皮细胞中对A549细胞分泌物做出应答的转录调节因子，导致结合到vWF基因启动子+220GATA位点的增加和表达的增强。因此通过判断受试者肺组织中vWF的表达，判断是否患有肺腺癌，从而指导临床医师给受试者提供预防方法或者治疗方案。附图说明图1为采用免疫组化检测临近正常肺组织和肺腺癌组织芯片(TMAs)中vWF的表达图，箭头指向vWF阳性内皮细胞；图2A为采用qRT-PCR技术分析同一病患的肺腺癌组织和正常组织中的vWFmRNA表达水平，n＝3；*,P<0.05；**,P<0.01；图2B为采用免疫荧光染色检测临近正常肺组织和肺腺癌组织中vWF表达水平，箭头指向血管中的vWF阳性染色细胞；图3A为采用qRT-PCR技术分析小鼠肺腺癌组织和正常组织中的vWFmRNA表达水平，n＝5；**,P<0.01；图3B为采用免疫荧光染色检测小鼠正常肺组织和Lewis肺癌组织中的vWF表达水平；图4A为采用A549细胞培养上清和对照组培养人脐静脉内皮细胞后其vWFmRNA相对表达量；n＝6；*,P<0.05；图4B为采用A549细胞培养上清和对照组培养人脐静本文档来自技高网...

【技术保护点】
vWF/或GATA3基因及其表达产物在制备诊断肺腺癌产品中的应用。

【技术特征摘要】
1.vWF/或GATA3基因及其表达产物在制备诊断肺腺癌产品中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品能够通过检测肺组织中vWF/或GATA3基因表达水平来诊断患者是否患有肺腺癌。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测vWF/或GATA3基因的表达水平的产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯片检测。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，用芯片诊断肺腺癌的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与vWF/或GATA3蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与vWF/或GATA3基因的核酸序列杂交的探针。5.一种诊断肺腺癌的产品，其特征在于，所述产品能够通过检测肺组织中vWF/或GATA3基因的表达水平来诊断肺腺癌。6.如权利要求5所述产品，其特征在于，所述产品包括包括芯片、或试剂盒；其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；其中，蛋白芯片包括与vWF/或GATA3蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与vWF/或GATA3基因的核酸序列杂交的探针。7.vWF基因及其表达产物在制备治疗肺腺癌...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘炬，徐英华，董凤云，臧琦，刘静，
申请(专利权)人：山东省千佛山医院，
类型：发明
国别省市：山东,37