一种新的多肽——人磺基转移酶17.05和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人磺基转移酶１７．０５，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如神经性疾病、肿瘤、免疫性疾病、炎症、发育紊乱症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人磺基转移酶１７．０５的多核苷酸的用途。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人磺基转移酶17.05，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。基转移酶HNK-1ST属于磺基转移酶基因家族，是一种II型膜蛋白，它的催化亚基有两条同源序列。Lys128，Arg189，Asp190，Pro191和Ser197是该酶的保守序列。Arg189，Pro191和Ser197对于结合供体PAPS以及维持转移硫酸基到受体分子都很重要。若Lys128和Asp190分别被替换为Arg和Gly，该酶仍保留部分活性，但该酶与受体的亲和力显著下降，Lys128和Asp190包含与受体结合位中或十分接近受体结合位。Arg189在结合PAPS的3′端磷酸是关键的。在3′-PB位点，Arg189和Ser197能直接与PAP的3′端磷酸相互作用。此两个氨基酸对HNK-1ST活力影响大。Asp190和Pro191的改变使二级结构中的β-折叠转变为α-螺旋，Asp190能帮助稳定这一转变，因而改变PAP结合位点的核心结构，直接影响HNK-1ST的活性，Pro191与维持酶的稳定性有关。催化亚基的5′-PBS的氨基酸包含于受体—供体的相互反映中。对于所有磺基转移酶，Lys128在5′-PBS都是保守的，它能与PAP的5′端磷酸形成氢键，而具有催化活性。整个保守序列的3′-PB提供了一个和3′的磷酸酯的羟基结合的氢键。。1997年Edgar Ong等人克隆所得的HNK-1ST基因是HNK-1ST家族的新成员。它的表达产物催化形成硫酸酯，它将一硫酸基团加到糖蛋白或糖脂上。它主要分布在神经系统和自然杀伤细胞的各类粘连分子中，并且在细胞之间及细胞与底物之间起重要作用。它的转录本在胎儿脑中含量高，而在胎儿肺、肾和肝中则低。它是第一个被证实可作为包含在外周无髓鞘神经中的一自主抗原，其抗原决定簇为磺基-3Glcβ1→3Galβ1→4GlcNAcβ1→R。与GlcAT-P比较，HNK-1ST的转录本在不同组织中的分布更广泛。HNK-1ST在组织中作用于糖脂受体，而GlcAT-P则作用于糖蛋白。。磺基转移酶对于糖脂、糖蛋白的硫酸化很重要，在生物体内控制膜上糖类的硫酸化，其表达异常可能导致膜结构异常，从而引发各种疾病。它在生物体内通常与神经系统疾病相关，并可用于诊断和治疗有关疾病。通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本专利技术的多肽的表达谱与人磺基转移酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本专利技术被命名为人磺基转移酶17.05。由于如上所述人磺基转移酶17.05蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人磺基转移酶17.05蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人磺基转移酶17.05蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人磺基转移酶17.05以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人磺基转移酶17.05的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人磺基转移酶17.05的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人磺基转移酶17.05的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人磺基转移酶17.05的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人磺基转移酶17.05的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人磺基转移酶17.05异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中196-666位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-1973位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人磺基转移酶17.05蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人磺基转移酶17.05蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人磺基转移酶17.05表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组的或合成蛋白质及其片段在合适的动物或细胞中诱导特定免疫反应以及与特异性抗体结合的能力。“激动剂”是指当与人磺基转移酶17.05结合时，一种可引起该蛋白质改变从而调节该蛋白质活性的分子。激动剂本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人磺基转移酶１７．０５，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]