一种多肽－－尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶-51.59和编码这种多肽的?制造技术

本发明专利技术公开了一种多肽－尿苷二磷酸－半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶－５１．５９，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如糖尿病、甲状腺功能亢进、高血压、痴呆、偏瘫、胃肠功能紊乱等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的尿苷二磷酸－半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶－５１．５９的多核苷酸的用途。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶-51.59，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。髓鞘是由特化的胶质细胞形成的，在外围神经是施旺细胞，在中枢神经系统是少突胶质细胞。髓鞘的形成可以加速传导，而且代谢能量得以节约。髓鞘的70％是脂类，而其中的大部分是半乳糖脑苷脂(galgactocerebrosides，GalC)。GalC的出现在少突神经胶质细胞的分化中是作为早期特异标志的。生物合成半乳糖脑苷脂的关键酶是尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶(UDP-galctose ceramide galactosyltransferase，CGT；EC 2.4.1.45)，它可以催化半乳糖从UDP-半乳糖到神经酰胺，从大鼠脑中的髓鞘中的CGT酶，发现有一个1623bp的开放阅读框，编码541氨基酸的核蛋白，它的最初转录产物在N-端有20个氨基酸的信号序列，并推论有3个N-糖基化位点，在C-端有一个23个氨基酸的跨膜区(Schulte，S et al.，Proc Natl Acad Sci USA(1993)9010265-10269)。而从人的CGT基因的研究表明，它是位于染色体4q26，对它的cDNA研究发现它至少含有5个以上的外显子，并且每个长度接近40kd.(Bosio，A et al.，Genomics(1995)28607-609)。从小鼠的CGT基因序列研究发现，它与大鼠的CGT和人的CGT高度同源，分别达到了95.9％和90％，而蛋白水平上同源达到了98.7％和97.6％，并且结构上类似。对于脊椎动物而言，CGT这种能够催化合成髓鞘中最主要的脂的酶，在进化上缺乏变化，可能强调了髓鞘层和它的主要成分的重要性(Bosio.A et al.，Genomics(1996)35，223-226)。本专利技术的人的基因与尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶在蛋白水平上有35％的同一性和56％的相似性。故认为本专利技术的新蛋白为一种新的人的尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶，命名为尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶-51.59，并以此推断其与尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶相似，并具有相似的生物学功能。由于如上所述尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶-51.59蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶-51.59蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶-51.59蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶-51.59以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶-51.59的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶-51.59的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶-51.59的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶-51.59的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶-51.59的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶-51.59异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中232-1641位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-2791位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶-51.59蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶-51.59蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于尿苷二磷酸-半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶-51.59表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－尿苷二磷酸－半乳糖苷神经酰胺葡糖醛基胶原转移酶－５１．５９，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]