本发明专利技术公开了以HSP65为表位支架的多T细胞表位结核基因疫苗，在载体中插入嵌合有来自结核分枝杆菌抗原的5个T细胞表位多肽基因的HSP65蛋白的全长基因。该疫苗的制备方法是在HSP65全长基因中插入5个来自结核分枝杆菌抗原中的T细胞表位基因EAST-61-60、Ag85B721-765、MTB10.47-33、PPE25721-765和PE1910-54。该结核基因疫苗通过将基因疫苗与脱乙酰壳聚糖形成纳米颗粒复合物滴鼻免疫小鼠，证实可诱导针对HSP65载体的血清IgG和肺SIgA应答，同时诱导多结核抗原表位特异性的较强的分泌高水平IFNγ的细胞免疫应答，是一种潜在预防和治疗结核病的疫苗。
【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种以热休克蛋白65为表位支架的多T细胞表位结核基因疫苗，其特征在于：由一个载体构成，在所述的载体中插入有结核分枝杆菌H37Rv株来源的热休克蛋白65（HSP65）的全长基因，所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的HSP65的全长基因中嵌合有来自结核分枝杆菌抗原的5个T细胞表位多肽基因，所述的5个T细胞表位分别是结核分枝杆菌H37Rv株来源的ESAT‑6蛋白的1～60位基因，结核分枝杆菌H37Rv株来源的Ag85B蛋白的721～765位基因，结核分枝杆菌H37Rv株来源的MTB10.4蛋白的7～33位基因，结核分枝杆菌H37Rv株来源的PPE25蛋白的 721～765位基因，结核分枝杆菌H37Rv株来源的PE19蛋白的10～54位基因，所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的热休克蛋白65基因的DNA序列如SEQ ID NO：2所示，所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的ESAT‑6蛋白的1～60位基因的DNA序列如SEQ ID NO:4所示，所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的Ag85B蛋白的721～765位基因的DNA序列如SEQ ID NO:6所示，所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的MTB10.4蛋白的7～33位基因的DNA序列如SEQ ID NO:8所示，所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的PPE25蛋白的 721～765位基因的DNA序列如SEQ ID NO:10所示，所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的PE19蛋白的10～54位基因的DNA序列如SEQ ID NO:12所示，在结核分枝杆菌H37Rv株来源的的HSP65全长基因中的第438位碱基后插入结核分枝杆菌H37Rv株来源的ESAT‑6蛋白的1～60位基因、第453位碱基后插入结核分枝杆菌H37Rv株来源的Ag85B蛋白的721～765位基因、第471位碱基后插入结核分枝杆菌H37Rv株来源的MTB10.4蛋白的7～33位基因、第1185位碱基后插入结核分枝杆菌H37Rv株来源的PPE25蛋白的721～765位基因和结核分枝杆菌H37Rv株来源的PE19蛋白的10～54位基因，所述的MTB10.4蛋白的7～33位基因后嵌入gccgcctac基因序列，嵌合了结核分枝杆菌H37Rv株来源的5个T细胞表位基因的结核分枝杆菌H37Rv株来源的热休克蛋白65的全长基因所构成的外源目的基因的DNA序列如SEQ ID NO：14所示。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：徐薇，吴曼丽，熊飞，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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