快速检测海藻施万氏菌的试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术提供一种快速检测海藻施万氏菌的试剂盒，试剂包括：（ａ）ＤＮＡ提取试剂：含缓冲试剂Ａ和细胞裂解试剂Ｂ，（ｂ）ＰＣＲ反应试剂：包括反应预混试剂Ｃ和反应引物试剂Ｄ，试剂Ｃ含有１０倍ＰＣＲ反应缓冲液、热聚合酶和灭菌双蒸水，试剂Ｄ：包括特异引物ＶＰ↓［０３］，特指５‘↑［－］ａｇｃｃｇｃａａｇａｇｃｃｔａｔｃａａｇｇａ；ＶＰ↓［０４］特指５‘↑［－］ａｔｃｃｔｔａｔｔｃａｃｃｇｇａｇｔｃｔｔｇ、ｄＮＴＰ及ＭｇＣｌ↓［２］，（ｃ）电泳和显色试剂。本发明专利技术还提供一种使用这种试剂盒快速测检海藻施万氏菌的方法，其优点是快速、准确。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种快速检测海藻施万氏菌的试剂盒，其特征是试剂包括：（ａ）ＤＮＡ提取试剂：含缓冲试剂Ａ和细胞裂解试剂Ｂ，试剂Ａ含有ＮａＣｌ、三羟基甲基氨基甲烷、乙二胺四乙酸和曲拉通Ｘ－１００，它们的浓度分别为：０．１－０．３Ｍ、１－１００ｍＭ ｐＨ ８．０、０．１－１０ｍＭ ｐＨ８．０和０－２０％；试剂Ｂ含有溶菌酶和三羟基甲基氨基甲烷，浓度分别为１－１０ｍｇ／ｍｌ和１－１００ｍＭ ｐＨ８．０；（ｂ）ＰＣＲ反应试剂：包括反应预混试剂Ｃ和反应引物试剂Ｄ，试剂Ｃ含有１０倍ＰＣＲ反 应缓冲液、热聚合酶和灭菌双蒸水，含量分别为２．５－５．０μｌ、０．５－２．５个单位和１８－３５．５μｌ；试剂Ｄ：包括特异引物对ＶＰ↓［０３］和ＶＰ↓［０４］、ｄＮＴＰ及ＭｇＣｌ↓［２］，含量分别为０．２－３μＭ和０．２－３μＭ、２０－２ ００μＭ及０．５－１０ｍＭ；特异引物ＶＰ↓［０３］特指５‘－ａｇｃｃｇｃａａｇａｇｃｃｔａｔｃａａｇｇａ；ＶＰ↓［０４］特指５‘－ａｔｃｃｔｔａｔｔｃａｃｃｇｇａｇｔｃｔｔｇ；（ｃ）电泳和显色试剂，包括试剂Ｅ和试剂Ｆ，试剂Ｅ：为 ５０倍电泳缓冲液，含三羟基甲基氨基甲烷－乙酸和乙二胺四乙酸，浓度分别为０．０４Ｍ和０．００１Ｍ；试剂Ｆ：０．８－２％琼脂糖和０．５－２０μｇ／ｍｌ溴乙锭。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈偿，胡超群，沈琪，任春华，
申请(专利权)人：中国科学院南海海洋研究所，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]