用于治疗炎症性肠病的模型、方法和组合物技术

本发明专利技术提供了包括但不限于肠道炎症和/或纤维样变性、炎症性肠病、结肠炎、急性结肠炎和慢性结肠炎的多种病况的模型，以及使用这些模型设计、筛选和开发用于这些病况的治疗的方法。本发明专利技术还提供了用于治疗这些病况的方法、组合物和试剂盒。

Models, methods, and compositions for the treatment of inflammatory bowel disease

The present invention provides a variety of conditions including but not limited to intestinal inflammation and / or fibrosis, inflammatory bowel disease, colitis, acute colitis and chronic colitis model, and methods of treatment using the model design, selection and development for these conditions. The invention also provides a method for the treatment of these conditions, the composition and kit.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗炎症性肠病的模型、方法和组合物
本专利技术涉及用于治疗病况和用于设计、筛选和开发用于病况的治疗的各种模型、系统、组合物、方法和试剂盒。所述病况包括但不限于肠道炎症和/或纤维样变性、炎症性肠病、结肠炎、急性结肠炎和慢性结肠炎。
技术介绍
本文引用的所有出版物、专利、专利申请和参考文献均通过引用而整体并入本文，其程度如同特别地且单独地指出每个单独的出版物、专利、专利申请或参考文献均通过引用而并入。以下描述包含可能有助于理解本专利技术的信息。这并非承认本文提供的任何信息是现有技术或与当前要求保护的专利技术相关，或明确或暗含引用的任何出版物是现有技术。炎症性肠病(IBD)的两种常见形式克罗恩病(CD)和溃疡性结肠炎(UC)是胃肠道的慢性、复发性炎性病症。每种形式的炎症性肠病均在二十至四十岁时达到发病的高峰年龄，并且在欧洲血统人群中的患病率平均约为每100,000个中100-150个(D.K.Podolsky,NEnglJMed347,417(2002)；E.V.Loftus,Jr.,Gastroenterology126,1504(2004))。尽管IBD的确切病因仍有待阐明，但广泛接受的假设是普遍存在的共生肠细菌引发了介导遗传易感个体的肠组织损伤的不适当的、过度活跃的、持续的粘膜免疫应答(D.K.Podolsky,NEnglJMed347,417(2002))。为了治疗IBD，已经制备了几种药物以靶向除TL1A以外的免疫途径。然而，这些现有的药物仅在约50％的时间有效，并且常常随着时间的推移变得无效。虽然TL1A和DR3在相同的信号通路中，但我们在两种不同的动物模型中证明阻断TL1A而不阻断DR3具有有益的效果。因此在本专利技术的各个实施方案中，我们提供了靶向TL1A以治疗IBD患者的新的治疗方法，所述IBD患者包括但不限于那些对现有药物没有响应或对现有药物失去响应的患者。
技术实现思路
结合意在示例性和说明性而非限制范围的系统、组合物和方法来描述和说明以下实施方案及其方面。本专利技术的各个实施方案提供了一种病况的模型。在各个实施方案中，所述病况为肠道炎症和/或纤维样变性、炎症性肠病和/或慢性结肠炎。在一些实施方案中，所述模型为一定数量的过表达或组成型表达TL1A和/或DR3的细胞。在一些实施方案中，所述模型为已经注射了一定数量的过表达或组成型表达TL1A和/或DR3的细胞的动物。在一些实施方案中，所述模型为具有过表达或组成型表达TL1A和/或DR3的转基因的转基因动物。在一些实施方案中，所述模型为敲除TL1A和/或DR3基因的基因敲除动物。在各个实施方案中，所述模型表现出纤维性狭窄、胃肠(GI)道炎症、体重减轻和/或疾病活动指数增加。在各个实施方案中，所述模型具有DSS诱导的结肠炎。在各个实施方案中，所述模型为过继转移诱导的结肠炎。本专利技术的各个实施方案提供了一种鉴别药剂对病况有治疗作用的方法。所述方法可包括：提供所述病况的模型；将所述药剂施用于所述模型；检测所述模型中的一个或多个变化以确定所述药剂是否抑制TL1A活性；以及将被确定为抑制TL1A活性的药剂鉴别为对所述病况有治疗作用。在各个实施方案中，所述病况为肠道炎症和/或纤维样变性、炎症性肠病和/或慢性结肠炎。本专利技术的各个实施方案提供了一种治疗、预防受试者的病况、降低受试者患有病况的可能性、降低受试者的病况的严重性和/或减缓受试者的病况的进展的方法。所述方法可包括：提供抑制TL1A活性的药剂；以及向所述受试者施用治疗有效量的所述药剂，从而治疗、预防所述受试者的病况、降低所述受试者患有病况的可能性、降低所述受试者的病况的严重性和/或减缓所述受试者的病况的进展。在各个实施方案中，所述病况为肠道炎症和/或纤维样变性、炎症性肠病和/或慢性结肠炎。在各个实施方案中，所述药剂为抗TL1A抗体或其功能片段。本专利技术的各个实施方案提供了一种组合物。所述组合物可包含：抑制TL1A活性的药剂。在各个实施方案中，所述药剂为抗TL1A抗体或其功能片段。本专利技术的各个实施方案提供了一种用于治疗、预防受试者的病况、降低受试者的病况的严重性和/或减缓受试者的病况的进展的试剂盒。所述试剂盒可包含：一定数量的抑制TL1A活性的药剂；以及使用所述药剂治疗、预防所述受试者的病况、降低所述受试者患有病况的可能性、降低所述受试者的病况的严重性和/或减缓所述受试者的病况的进展的说明书。在各个实施方案中，所述药剂为抗TL1A抗体或其功能片段。附图说明示例性实施方案在附图中示出。意在说明本文公开的实施方案和附图被认为是说明性的而非限制性的。图1根据本专利技术的各个实施方案图示了TL1A-DR3信号传导。TL1A是TNF超家族成员，且唯一已知的受体为DR3。TL1A在几种自身免疫模型中是致病的并且具有多效性，如凋亡、增殖、纤维样变性和免疫活化。Tl1a或Dr3缺陷在自身免疫性疾病模型中具有保护性。已经在如实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)、过敏性肺部炎症(ALI)和胶原/抗原诱导的关节炎模型(CIA或AIA)等几种模型中发现TL1A或DR3缺陷可预防自身免疫性疾病。也有证据表明Tl1a和Dr3涉及肠道动态平衡和IBD。TL1A和DR3可能在肠道炎症中具有致病性。在肠中，已经发现TL1A促进Th-1、-2、-9、-17、ILC2和ILC3。遗传学研究还发现TNFSF15多态性与增加的TL1A表达和IBD有关。还显示阻断TL1A抗体可以逆转两种鼠结肠炎模型。具有组成型Tl1a表达的小鼠在结肠炎模型中发展了自发性回肠炎和恶化的回肠-盲肠炎症。然而，TL1A和DR3缺陷在结肠炎模型中的作用还没有被真正研究过。因此，我们研究了TL1A和DR3缺陷在与其他非肠道自身免疫性疾病模型相似的慢性结肠炎的鼠模型中是否具有保护性。图2根据本专利技术的各个实施方案图示了Tl1a和Dr3KO小鼠的产生。我们独立地获得了Tl1a和Dr3KO小鼠。对于Tl1aKO，转录和翻译位点和外显子1被删除。对于Dr3KO，外显子2至5被删除。通过在回肠组织上使用qPCR，我们在此证明了TL1Ako小鼠不具有TL1A表达，而DR3KO小鼠不具有DR3表达。图3根据本专利技术的各个实施方案图示了慢性DSS诱导的结肠炎设置。我们用来测试TL1A和DR3缺陷对肠道炎症的影响的第一个模型为慢性DSS模型。在该模型中，在4周内用2％DSS的4个周期处理WT、DR3KO和TL1AKO小鼠。在4周结束时，分析小鼠肠道炎症和免疫功能的差异。图4根据本专利技术的各个实施方案图示了Tl1a-/-(而非Dr3-/-)改善了临床DSS诱导的结肠炎。疾病活动指数(DAI)由体重减轻、粪便潜血和一致性测量构成。DAI越高，肠道炎症越严重。在这里我们看到TL1AKO小鼠与DR3KO或WT相比具有较低的DAI评分，表明它与其他两组相比具有较轻的临床结肠炎。图5根据本专利技术的各个实施方案图示了Tl1a(而非Dr3)中的缺陷减少了结肠炎症。检查了3个小鼠组的结肠组织学。我们在这里证明了与TL1AKO相比，WT和DR3KO结肠具有增加的炎性浸润、溃疡和隐窝结构损失。组织学评分被定量，并且我们在这里证明与其他两组相比，TL1A缺陷导致结肠的组织学炎症显著减少。图6根据本专利技术的各个实施方案图示了采用Tl1a-本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鉴别药剂对病况有治疗作用的方法，该方法包括：提供所述病况的模型；将所述药剂施用于所述模型；检测所述模型中的一个或多个变化以确定所述药剂是否抑制TL1A活性；以及将被确定为抑制TL1A活性的药剂鉴别为对所述病况有治疗作用。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.05.15 US 62/162,5591.一种鉴别药剂对病况有治疗作用的方法，该方法包括：提供所述病况的模型；将所述药剂施用于所述模型；检测所述模型中的一个或多个变化以确定所述药剂是否抑制TL1A活性；以及将被确定为抑制TL1A活性的药剂鉴别为对所述病况有治疗作用。2.如权利要求1所述的方法，其中所述病况为肠道炎症和/或纤维样变性、炎症性肠病和/或慢性结肠炎。3.如权利要求1所述的方法，其中所述模型为一定数量的过表达或组成型表达TL1A和/或DR3的细胞。4.如权利要求3所述的方法，其中通过包括以下步骤的方法从具有过表达或组成型表达TL1A和/或DR3的转基因的转基因动物获得所述细胞：从所述转基因动物获得包含细胞群体的样品；将所述样品分选成过表达或组成型表达TL1A和/或DR3的细胞的第一亚群，和不过表达或组成型表达TL1A或DR3中任一种的细胞的第二亚群；以及将所述第一亚群与所述第二亚群分离，从而分离过表达或组成型表达TL1A和/或DR3的细胞。5.如权利要求1所述的方法，其中所述模型为已经注射了一定数量的过表达或组成型表达TL1A和/或DR3的细胞的动物。6.如权利要求5所述的方法，其中所述动物为免疫缺陷型啮齿类动物。7.如权利要求1所述的方法，其中所述模型为具有过表达或组成型表达TL1A和/或DR3的转基因的转基因动物。8.如权利要求7所述的方法，其中所述TL1A和/或DR3的过表达或组成型表达对细胞类型具有特异性。9.如权利要求8所述的方法，其中所述细胞类型为髓样细胞。10.如权利要求9所述的方法，其中所述髓样细胞为抗原呈递细胞(APC)或树突细胞(DC)。11.如权利要求8所述的方法，其中所述细胞类型为淋巴样细胞。12.如权利要求11所述的方法，其中所述淋巴样细胞为T...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·Q·施，S·R·塔尔干，金沢吉武，J·比尔斯伯勒，
申请(专利权)人：西达赛奈医疗中心，
类型：发明
国别省市：美国,US