一种Sn‑1,3专一性固定化脂肪酶的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种Sn‑1,3专一性固定化脂肪酶的制备方法，包括如下步骤：S1.对大孔树脂进行预处理去除杂质；S2.将脂肪酶溶解于缓冲液中，离心取上层清液，即为酶液；S3.取步骤S1得到的酶液，加入步骤S1预处理好的大孔树脂，振揺，抽滤，洗涤，干燥，得到固定化脂肪酶；其中，所述大孔树脂包括非极性大孔吸附树脂A和弱极性大孔吸附树脂B。该方法所制得的固定化酶固定化率可达93%~97%，酶活回收率可达98%~118.9%。通过酶学性质研究发现，本发明专利技术得到固定化脂肪酶具有较好的酯化活力和高的Sn‑1,3专一性，催化酯化率可达96%以上，同时具有较好的操作稳定性，可重复使用50次。

A preparation method of Sn 1,3 specificity of immobilized lipase

The invention discloses a preparation method of Sn 1,3 specificity of immobilized lipase, which comprises the following steps: S1. impurity removal pretreatment of macroporous resin; S2. lipase dissolved in buffer solution, centrifuged supernatant, the enzyme solution; S3. enzyme solution obtained in step S1, add step S1 resin, good vibration rolling pretreatment, filtration, washing, drying, by immobilized lipase; wherein, the macroporous resin including nonpolar macroporous adsorption resin A and weak polar macroporous adsorption resin B. The immobilized enzyme immobilized by this method can reach 93%~97%, and the recovery rate of the enzyme can reach 98%~118.9%. Through the characterization of the study found that the immobilized lipase has good esterification activity and high Sn 1,3 specificity, catalytic esterification rate is above 96%, and has good stability, can be used repeatedly for 50 times.

【技术实现步骤摘要】
一种Sn-1,3专一性固定化脂肪酶的制备方法
本专利技术涉及脂肪酶固定化
，更具体地，涉及专利技术名称一种Sn-1,3专一性固定化脂肪酶的制备方法。
技术介绍
脂肪酶是一类特殊的酰基水解酶，作为生物催化剂时，既可在油水界面上催化酯水解反应（ROOR*+H20→→RCOOH+R*OH），又可催化合成反应，包括酯化（RCOOH+R*OH→→ROOR*+H20）、酯交换（RCOOR*+R#COOR→→ROOR+R#COOR*）、醇解（RCOOR*+R#OH→→ROOR#+R*OH）和酸解（RCOOR*+R#COOH→→R#COOR*+RCOOH），基于此，它是一种重要的工业酶制剂。游离脂肪酶在使用过程中容易存在如下缺陷：①酶的价格昂贵，只能使用一次，使用成本高；②在非水体系中不溶解，反应过程中容易聚集，影响酶活；③容易受外界因素（如温度、pH值等）改变而失活。如果将脂肪酶固定化，不仅可以提高酶的稳定性，而且易于分离、可使用连续使用、降低生产成本。国内外大量的研究表明，油脂中三酰甘油的1,3位和2位的脂肪酸对油脂的理化、营养和生理特性方面有较大的差异，其中以1,3位功能性最佳。由于Sn本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种Sn‑1,3专一性固定化脂肪酶的制备方法，包括如下步骤：S1.对大孔树脂进行预处理去除杂质；S2.将脂肪酶溶解于缓冲液中，离心取上层清液，即为酶液；S3.取步骤S2得到的酶液，加入步骤S1预处理好的大孔树脂，振揺，抽滤，洗涤，干燥，得到固定化脂肪酶；其特征在于，所述大孔树脂包括非极性大孔吸附树脂和弱极性大孔吸附树脂。

【技术特征摘要】
1.一种Sn-1,3专一性固定化脂肪酶的制备方法，包括如下步骤：S1.对大孔树脂进行预处理去除杂质；S2.将脂肪酶溶解于缓冲液中，离心取上层清液，即为酶液；S3.取步骤S2得到的酶液，加入步骤S1预处理好的大孔树脂，振揺，抽滤，洗涤，干燥，得到固定化脂肪酶；其特征在于，所述大孔树脂包括非极性大孔吸附树脂和弱极性大孔吸附树脂。2.根据权利要求1所述的Sn-1,3专一性固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，所述非极性大孔吸附树脂包括MA-NP6、MI-BN4、MI-300IDA、LX-1000EP、GDX-104、LX-1000HA、LX-EP120、LX-EP130、LX-201A、SD300、DM11、D354、D730、SIP1100、SIP1200中的至少以一种；所述弱极性大孔吸附树脂包括MI-WP8、GDX-501、D201、D301、HPD400、HPD500、DowexA-1、D401、DiaionCR-10、LSC-100、LSC-200中的至少一种。3.根据权利要求1或2所述的Sn-1,3专一性固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，所述大孔树脂中非极性大孔吸附树脂与弱极性大孔吸附树脂的质量比为1:1~1:2。4.根据权利要求1或2所述的Sn-1,3专一性固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，所述脂肪酶与大孔树脂的质量比为1:0.5~1:2。5....

【专利技术属性】
技术研发人员：刘放，曹庸，戴伟杰，黄匆，
申请(专利权)人：广东惠尔泰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44