红景天甙在防治糖尿病性血管损伤中的应用制造技术

本发明专利技术公开了红景天甙在防治糖尿病性血管损伤中的应用，其中红景天甙的分子式为C14H20O7。本发明专利技术通过实验证实红景天甙能够提高糖诱导的平滑肌细胞凋亡抑制模型细胞的凋亡率，提高平滑肌细胞中促凋亡相关蛋白表达和miR‑195‑3p的表达水平，降低抗凋亡相关蛋白的表达等指标，本发明专利技术首次公开了红景天甙对于miR‑195‑3p的调节作用，因此红景天甙能够用于防治糖尿病性血管损伤，且在防治由高血糖诱导的动脉管壁异常增厚作用中发现新机制。

The application of Salidroside in the prevention and treatment of diabetic vascular injury

The present invention discloses the application of Salidroside in the prevention and treatment of diabetic vascular injury, in which the molecular formula of salidroside is C14H20O7. The present invention is confirmed by experiments that salidroside can enhance the apoptosis of smooth muscle cell apoptosis induced by inhibition of sugar model cell rate, improve the expression level of apoptosis related protein expression of miR and promoting 195 3p in smooth muscle cells, decrease the expression of apoptosis related protein and other indicators, the invention firstly discloses the Salidroside regulation for miR 195 3P, so salidroside can be used for prevention of diabetic vascular injury, and in the prevention and treatment of hyperglycemia induced by arterial wall thickened have discovered a new mechanism of action.

【技术实现步骤摘要】
红景天甙在防治糖尿病性血管损伤中的应用
本专利技术属于生物医药
，具体涉及红景天甙在防治糖尿病性血管损伤中的应用。
技术介绍
最新资料显示，我国已成为世界上糖尿病患者最多的国家，世界上糖尿病患者人数也在逐年增加，并预计2030年患者人数将曾至3.66亿，目前诊断病例中90％为2型糖尿病。这些数据表明2型糖尿病在世界范围内造成了巨大威胁。它是以慢性高血糖为特征的代谢紊乱，长期不治或治疗不当可能会导致糖尿病慢性并发症(Diabetesmellituschroniccomplication，DCC)，包括：糖尿病血管损伤、糖尿病神经病等，这些慢性并发症也是糖尿病致死致残的重要原因。所以，如何有效防治糖尿病并发症，改善糖尿病人的生存质量，是目前需要解决的重大问题。血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells，VSMC)的增殖和迁移是动脉粥样硬化斑块形成、高血压等糖尿病血管并发症的共同病理特征。当血管受损或疾病状况下，VSMC重新获得增殖、迁移及合成大量细胞外基质的能力，VSMC增殖和凋亡的平衡被打破，通常为增殖增多和凋亡抑制，导致血管壁增厚、管腔狭窄、血管顺应性降低及血管重构。因此，VSMC是动脉粥样硬化预防和治疗的重要靶点。如果可以改变其凋亡抑制，寻找药物发挥作用的新机制，改善其血管平滑肌的异常积累，对改善糖尿病性血管损伤的进程和治疗技术的发展具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供红景天甙在防治糖尿病性血管损伤中的应用。本专利技术是通过以下技术方案来实现：本专利技术公开了红景天甙在制备防治糖尿病性血管损伤的药物和/或保健品中的应用，红景天甙的分子式为C14H20O7，结构如下式：优选地，所述的药物和/或保健品为防治高血糖引起的动脉管壁增厚的药物和/或保健品。优选地，所述的药物和/或保健品为促进平滑肌细胞凋亡的药物和/或保健品。优选地，所述的药物和/或保健品为促进动脉血管中膜平滑肌细胞凋亡的药物和/或保健品。优选地，所述的药物和/或保健品为促进平滑肌细胞中促凋亡蛋白表达和/或抑制平滑肌细胞中抗凋亡蛋白表达的药物和/或保健品。优选地，所述的促凋亡蛋白为促凋亡家族蛋白Bax，抗凋亡蛋白为抗凋亡家族蛋白Bcl-2。优选地，所述的药物和/或保健品为促进平滑肌细胞凋亡过程中的终末剪切酶CleavedCaspase-3表达的药物和/或保健品。优选地，所述的药物和/或保健品为促进平滑肌细胞中microRNA表达的药物和/或保健品。进一步优选地，所述的microRNA为能够调节平滑肌细胞凋亡的microRNA。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益的技术效果：本专利技术公开了红景天甙在防治糖尿病性血管损伤药物作用新机制的应用，红景天甙是从红景天中提取的一种活性单体，红景天甙的分子式为C14H20O7。本专利技术首次提出红景天甙能够用于防治糖尿病性血管损伤，具有良好的临床应用前景，因而能够制备防治糖尿病性血管损伤的药物和/或保健品。进一步地，通过实验证明了红景天甙对高糖条件下动脉血管平滑肌细胞凋亡抑制有明显的改善作用，本专利技术提供的红景天甙能够提高高糖诱导的平滑肌细胞凋亡抑制模型平滑肌细胞凋亡率和促凋亡蛋白表达量，降低抗凋亡蛋白表达量，提高miR-195-3p的表达水平等指标，因此红景天甙能够用于防治糖尿病性血管损伤，尤其是能够用于防治由高血糖诱导的动脉管壁异常增厚。进一步地，通过实验证明本专利技术提供的红景天甙能够通过上调miR-195-3p和促凋亡家族蛋白Bax的表达，并能够抑制Bcl-2的表达，因此该防治糖尿病性血管损伤的机制为能够通过促进miR-195-3p和促凋亡蛋白的表达同时抑制抗凋亡蛋白的表达而促进平滑肌细胞发生凋亡，且随着红景天甙浓度的增加，平滑肌细胞发生凋亡的数目逐渐增多，实现防治糖尿病性血管损伤的作用。附图说明图1为通过Hoechst+PI染色法检测红景天甙对平滑肌细胞凋亡能力的影响结果图；其中，(a)为Hoechst+PI染色法检测红景天甙对大鼠胸主动脉平滑肌细胞系A7r5细胞凋亡的结果；(b)为0uM、10uM、100uM、250uM、500uM的红景天甙对大鼠胸主动脉平滑肌细胞系A7r5细胞凋亡影响的剂量曲线结果；(c)为100uM的红景天甙对大鼠胸主动脉平滑肌细胞系A7r5细胞凋亡影响的时间曲线结果；图2为红景天甙对miR-195-3p表达水平调控结果图；其中，(a)为高糖与低糖处理以及高糖加红景天甙处理后miR-195-3p在平滑肌细胞差异表达的结果图；(b)为单纯转染miR-195-3p后平滑肌细胞miR-195-3p表达结果图；(c)为单纯转染miR-195-3p后平滑肌细胞凋亡率结果图；(d)为转染mir-193-3p后与红景天甙共同作用时平滑肌细胞miR-195-3p表达结果图；(e)为转染mir-193-3p后与红景天甙共同作用时平滑肌细胞凋亡率结果图；图3为Westernblot法检测转染miR-195-3pmimic、inhibitor后和红景天甙对平滑肌细胞内凋亡相关蛋白表达水平的影响结果图；其中，(a)为凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的Westernblot蛋白表达图；(b)为凋亡相关蛋白Caspase-3和CleavedCaspase-3的Westernblot蛋白表达图；(c)、(d)、(e)分别为(a)、(b)的统计图。具体实施方式下面结合具体的实施例对本专利技术做进一步的详细说明，所述是对本专利技术的解释而不是限定。本专利技术提供了一种红景天甙作用新的机制，即红景天甙在防治糖尿病性血管损伤中的新机制，其所述的糖尿病性血管损伤为高血糖诱导的动脉管壁异常增厚，具体分子式为C14H20O7，分子量为C14H20O7，分子式结构为：本专利技术所述的红景天甙为市场采购获得，购自西格玛奥德里奇贸易有限公司(Sigma-Aldrich)识别码为CAS：10338-51-9。本专利技术通过进一步的研究，检测了该红景天甙对高糖诱导的平滑肌细胞凋亡抑制有明显的改善作用，并进一步发现其可以调节miR-195-3p的表达，且miR-195-3p对平滑肌细胞凋亡有调节作用。其中，miR-195-3p序列为“ccaatattggctgtgctgctcca”，来源于Pubmed数据库。下面对本专利技术提供的红景天甙防治糖尿病性血管损伤作用和促进平滑肌细胞凋亡及其对平滑肌细胞内miR-195-3p表达的调节作用具体试验和结果进行详细说明。1、红景天甙对高糖诱导的平滑肌细胞凋亡抑制的影响实验方法：采用Hoechst+PI染色法检测红景天甙对高糖条件下平滑肌细胞凋亡能力的影响。所选细胞系为：大鼠胸主动脉平滑肌细胞系A7r5，细胞接种于含有10％胎牛血清的DMEM高糖培养基中，置于体积分数为5％的CO2，温度为37℃的培养箱中常规培养。取对数生长期的平滑肌细胞，以15000个/孔接种于24孔板培养过夜。待细胞贴壁后，将红景天甙以不同浓度(0、10、100、250、500μmol/L)加入孔中，在培养不同时间(0、12、24、36、48、72h)后，加入Hoechst和PI染色液，浓度为10uL/mL，培养箱中孵育25分钟，用无菌PBS冲洗3次，每次5分钟，荧光显微镜下拍摄，计算凋亡率。凋亡率计算公式为：(凋亡细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
红景天甙在制备防治糖尿病性血管损伤的药物和/或保健品中的应用，其特征在于，红景天甙的分子式为C14H20O7，结构如下式：

【技术特征摘要】
1.红景天甙在制备防治糖尿病性血管损伤的药物和/或保健品中的应用，其特征在于，红景天甙的分子式为C14H20O7，结构如下式：2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物和/或保健品为防治高血糖引起的动脉管壁增厚的药物和/或保健品。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物和/或保健品为促进平滑肌细胞凋亡的药物和/或保健品。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的药物和/或保健品为促进动脉血管中膜平滑肌细胞凋亡的药物和/或保健品。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的药物和/或保健品为促进平滑肌细胞中促凋亡蛋白表达和/或抑制平滑肌细胞中抗凋亡蛋白表达的药物和/...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋继波，谢满江，陈励，张斌，张亚娟，
申请(专利权)人：中国人民解放军第四军医大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61