激发型抗人CD40单克隆抗体的制备方法及其应用技术

本发明专利技术提供一种激发型抗人ＣＤ４０单克隆抗体的制备方法以及应用，以高表达ＣＤ４０分子的多发性骨髓瘤细胞株为免疫原，以不表达ＣＤ４０分子的多发性骨髓瘤细胞株为阴性对照，经免疫，细胞融合、筛选、鉴定获得稳定分泌特异性鼠抗人ＣＤ４０的杂交瘤细胞株，制备抗肿瘤生物制剂。它不仅可使Ｂ细胞扩增，还可以使外围血来源的单核细胞扩增和分化成熟为树突状细胞，以及激发Ｔ细胞的功能，扩增和诱导ＤＣｓ成熟一步完成，使临床应用成为可能。用单抗诱导ＣＤ４０表达阳性的肿瘤细胞生长抑制、凋亡及增强肿瘤细胞免疫原性，用于体外激发Ｔ淋巴细胞，并用于过继治疗肿瘤。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及生物
，具体说是一种激发型抗人CD40单克隆抗体的制备方法及其应用。恶性肿瘤是严重危害人类健康的疾病，尽管随着化放疗和手术疗法等手段的不断提高，许多肿瘤患者可获得临床意义上的缓解，但仍不能免避肿瘤残留细胞复发所致的死亡。肿瘤的发生是由逃避免疫监视的变异细胞恶性增殖，其逃避机制之一是由于机体抗原递呈细胞特别是树突状细胞在数量和功能上的异常，致使机体的肿瘤抗原特异性T细胞处于免疫耐受状态。因此通过改变T细胞免疫耐受状态并激发机体特异性抗肿瘤免疫应答，以清除和控制肿瘤残留细胞，成为肿瘤免疫治疗的重要手段。树突细胞(dendritic cells，DCs)是体内专业的抗原递呈细胞，是初次和再次免疫应答有力的开启者。DCs是唯一可以激发幼稚性T细胞的抗原递呈细胞，且较其它抗原细胞包括巨噬细胞(Mφ)和B细胞的抗原递呈作用强100倍以上，在诱导机体特异性细胞免疫中起着极其重要的作用。DCs激发T细胞依赖的免疫反应，在体外诱导并经抗原刺激的DCs回输入体内也可迁移到淋巴组织，并致敏T细胞，激发细胞免疫反应。因而，采用DCs体外激发或同时负载肿瘤抗原或者将目的基因转染DCs本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种激发型抗人ＣＤ４０单克隆抗体的制备方法，其特征在于：将高表达ＣＤ４０分子的多发性骨髓瘤细胞株（ＸＧ２）为免疫原，免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠；免疫小鼠脾脏细胞与小鼠ＳＰ２／０细胞株进行融和，以高表达ＣＤ４０分子的肿瘤细胞株阳性对照和不表达ＣＤ４０分子的多发性骨髓瘤细胞株（ＸＧ７、ＸＧ１）阴性对照，用间接免疫荧光法对杂交瘤培养上清进行筛选、蛋白鉴定及Ｉｇ亚类鉴定，经复筛及亚克隆后获得稳定分泌特异鼠抗人ＣＤ４０杂交瘤细胞株，并再体外持续传代，分批冻存；规模化细胞培养或生产腹水、分离纯化和单抗的特性鉴定并获得激发型抗人ＣＤ４０单抗纯品。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：张学光，周照华，王江方，邱玉华，施勤，
申请(专利权)人：苏州大学医学生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]