一种测定白术多糖的单糖组成的方法技术

本发明专利技术公开了一种测定白术多糖的单糖组成的方法，其包括如下步骤：1)制备白术多糖水解样品；2)制备混合单糖标准品；3)柱前衍生化处理：分别将步骤1)所得白术多糖水解样品和步骤2)所得混合单糖水解标准品与0.5mol/L的PMP甲醇溶液及0.3mol/L的NaOH溶液混合，充分振摇，70℃水浴条件下反应30min，后冷却至室温，加入0.3mol/L的盐酸进行中和，再加入氯仿进行萃取，离心，弃去有机层，重复萃取2～3次，得上层水液，经0.22μm微孔滤膜过滤，分别得白术多糖衍生化处理溶液和混合单糖衍生化处理溶液，备用；4)高效液相色谱法分析：确定白术多糖的单糖组成及其含量。本发明专利技术灵敏度高、样品用量少、稳定性好，实现了操作简单且较低成本地检测白术多糖中的单糖组成。

A method for the determination of monosaccharide composition of Polysaccharides from Atractylodes macrocephala

The invention discloses a method for the determination of composition of Atractylodes macrocephala polysaccharide monosaccharide, which comprises the following steps: 1) preparing polysaccharide hydrolysis samples; 2) were prepared by mixing the monosaccharide standards; 3) Pre column derivatization: Step 1) the Atractylodes macrocephala polysaccharide samples and hydrolysis step 2) mixed PMP and 0.3mol/L methanol solution of the mixing of monosaccharide standards and the hydrolysis of 0.5mol/L NaOH solution, shake well, reaction 30min 70 DEG C water bath conditions, after cooling to room temperature, add 0.3mol/L of hydrochloric acid neutralization, adding chloroform extraction, centrifugation, discarding the organic layer, repeated the extraction 2~3 times, to the upper water solution by 0.22, m microporous membrane filtering, respectively polysaccharide derivatization solution and mixed solution of monosaccharide derivatization, standby; 4) analysis by high performance liquid chromatography to determine the monosaccharide composition and content of polysaccharide of atractylodes. The invention has high sensitivity, less sample dosage and good stability, and realizes the simple and lower composition of monosaccharide in the polysaccharide of Atractylodes macrocephala.

【技术实现步骤摘要】
一种测定白术多糖的单糖组成的方法
本专利技术涉及测定方法领域，特别涉及测定多糖的单糖组成。
技术介绍
中药多糖具有增强免疫力、抗应激、抗病毒等广泛的生物学活性，已在畜牧兽医领域得到广泛的应用，也是新兽药研究的热点。但目前的现状是兽用中药多糖的质量控制标准的不完善(仅检测总糖含量)，致使一些假、劣的多糖产品屡屡出现，危害养殖业的发展。因此开展兽用中药多糖质量控制的研究，是创制新型多糖药物或饲料添加剂的重要前提。一般来说，多糖所具有的药理活性往往与其单糖组成是密切相关的，因此在检测总糖含量时还需对其单糖组成进行定性分析。由于多糖和单糖都不具有紫外吸收，无法直接对其进行测定。在用高效液相色谱法分析多糖组成及其含量时，一般采用凝胶色谱柱与示差折光检测器或蒸发光散射检测器等仪器，这些方法不仅灵敏度低、基线噪音大、柱温对结果影响较大、测定过程中易发生单糖转化并且这些仪器与色谱柱价格高昂。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对上述现有技术的不足，提供一种测定白术多糖的单糖组成的方法，其实现了方法简单且低成本地对白术多糖的单糖组成进行检测。本专利技术所采取的技术方案是：一种测定白术多糖的单糖组成的方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定白术多糖的单糖组成的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)制备白术多糖水解样品：取白术精制多糖与2mol/L的三氟乙酸溶液混合后于95～98℃下水浴处理7～9h，用4mol/L的氢氧化钠溶液中和至中性，离心去上清液得白术多糖水解样品，备用；2)制备混合单糖标准品：取D‑甘露糖、鼠李糖、D‑葡萄糖、D‑核糖、D‑半乳糖醛酸、D‑半乳糖和阿拉伯糖共溶于水得混合单糖标准品，备用；3)柱前衍生化处理：分别将步骤1)所得白术多糖水解样品和步骤2)所得混合单糖水解标准品与0.5mol/L的PMP甲醇溶液及0.3mol/L的NaOH溶液混合，充分振摇，70℃水浴条件下反应30min，后冷却至室温，加入...

【技术特征摘要】
1.一种测定白术多糖的单糖组成的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)制备白术多糖水解样品：取白术精制多糖与2mol/L的三氟乙酸溶液混合后于95～98℃下水浴处理7～9h，用4mol/L的氢氧化钠溶液中和至中性，离心去上清液得白术多糖水解样品，备用；2)制备混合单糖标准品：取D-甘露糖、鼠李糖、D-葡萄糖、D-核糖、D-半乳糖醛酸、D-半乳糖和阿拉伯糖共溶于水得混合单糖标准品，备用；3)柱前衍生化处理：分别将步骤1)所得白术多糖水解样品和步骤2)所得混合单糖水解标准品与0.5mol/L的PMP甲醇溶液及0.3mol/L的NaOH溶液混合，充分振摇，70℃水浴条件下反应30min，后冷却至室温，加入0.3mol/L的盐酸进行中和，再加入氯仿进行萃取，离心，弃去有机层，重复萃取2～3次，得上层水液，经0.22μm微孔滤膜过滤，分别得白术多糖衍生化处理溶液和混合单糖衍生化处理溶液，备用；4)高效液相色谱法分析：通过高效液相色谱法分别对...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨鸿，王少杰，邓桦，张勇军，巴娟，
申请(专利权)人：佛山科学技术学院，
类型：发明
国别省市：广东,44