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新型重组人组织因子途径抑制物活性肽及其制备方法技术

技术编号:1745218 阅读:204 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术属生物技术领域,具体涉及具有抗凝和抗栓活性的重组人组织因子途径抑制物活性肽和制备方法及其应用。本发明专利技术根据对全长组织因子途径抑制物的结构及其生化特性的分析,设计了新型rhTFPI-AP1和rhTFPI-AP2结构。将突变后组织因子途径抑制物结构域1和结构域2基因与真核表达载体pPIC9K重组,转化甲醇营养型酵母GS115,筛选高表达工程菌。工程菌经发酵扩增,离心收集上清液,经三步法纯化rhTFPI-AP1和rhTFPI-AP2。所得产品冻干后,具有抗凝和抗栓活性,对于预防血栓性疾病的发生有明显的作用。(*该技术在2021年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属生物
,具体涉及新型重组人组织途径抑制物活性肽。更具体地,本专利技术涉及新型重组人组织途径抑制物活性肽1和活性肽2,与全长人组织途径抑制物相比,活性肽1保持抗组织因子/因子VIIa活性,活性肽2保持抗因子Xa活性。本专利技术还涉及本重组人组织因子途径抑制物活性肽的制备方法及其应用。近年来,研究人员使用重组人TFPI进行了一系列的动物实验和若干临床实验,结果表明TFPI对于冠状动脉血栓形成、脓毒血症、弥漫性血管内凝血、中风、癌症、急性呼吸窘迫综合征和缺血再灌注损伤等均有很好的疗效,而且出血的危险性明显低于低分子肝素,是一种安全性好,疗效高的抗凝和抗血栓药物(Jeske W,et al.Seminars in thrombosis and hemostasis,1996;22(2)213-219)。TFPI是分子量约40kd的单链糖蛋白,由276个氨基酸残基组成。TFPI的结构包括氨基端区,三个Kunitz型蛋白酶抑制区(结构域)。每个结构域均是51个氨基酸残基组成的环状结构,有三对二硫键。结构域1的活性位点位于Lys36-Ala37,结构域2的活性位点位于Arg本文档来自技高网...

【技术保护点】
新型重组人组织因子途径抑制物活性肽,其特征在于改变人组织因子途径抑制物结构域1和结构域2的结构,获得保持hTFPⅠ特异、高效抗组织因子(TF)/FVⅡa的活性肽1和抗FXa活性的活性肽2,活性肽1rhTFPⅠ-AP1具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列和SEQ ID NO:3的核甘酸序列,活性肽2rhTFPⅠ-AP2具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列和SEQ ID NO:4的核甘酸序列。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:马端宋后燕
申请(专利权)人:复旦大学
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]

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