葡萄糖脱氢酶DNA分子、载体和菌株及应用制造技术

本发明专利技术涉及基因工程领域，具体涉及生产葡萄糖脱氢酶的DNA分子、蛋白或多肽序列，载体和菌株及应用。所述葡萄糖脱氢酶DNA分子，其碱基序列为SEQ ID NO.1所示；或者选自编码如下蛋白质(a)或(b)的基因：(a)SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列组成的多肽或蛋白质；(b)在(a)限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有葡萄糖脱氢酶活性的由(a)衍生的多肽或蛋白质。本发明专利技术将突变体基因同质粒pBAD进行连接更加稳定，而且在阿拉伯糖的诱导下，发酵酶活更高，可达到2400U/mL以上，具有表达量高，发酵控制简单等特点，适宜规模化生产。

Glucose dehydrogenase DNA molecule, carrier and strain and its application

The present invention relates to the field of genetic engineering, in particular to the DNA molecule, protein or polypeptide sequence of glucose dehydrogenase, carrier and strain and its application. The glucose dehydrogenase DNA molecule and its nucleotide sequence of SEQ ID NO.1 shown; or from the following encoding protein (a) or (b) gene (a) polypeptide or protein composed of amino acid sequence of SEQ ID represented by NO.2; (b) in (a) after substitution, deletion or add one or several amino acids and glucose dehydrogenase activity in the amino acid sequence defined by (a) polypeptide or protein derivatives. The invention is more stable to connect the mutant gene homogenous pBAD. Moreover, under the induction of Arabia sugar, the fermentation enzyme activity is higher, and it can achieve more than 2400U/mL. It has the characteristics of high expression and simple fermentation control, so it is suitable for large-scale production.

【技术实现步骤摘要】
葡萄糖脱氢酶DNA分子、载体和菌株及应用
本专利技术涉及基因工程领域，具体涉及一种生产葡萄糖脱氢酶的突变体和工程菌的构建方法，尤其涉及一种生产葡萄糖脱氢酶的DNA分子、蛋白或多肽序列，载体和菌株及应用。
技术介绍
(1)高血脂作为现代社会危害人类健康的三大(三高：高血糖、高血脂、高血压)杀手之一，作为医疗诊治的重要对象。高脂血症常引起动脉粥样硬化进而导致冠心病、高血压和脑血管疾病。他汀类药物是降血脂的首选药物作用。目前已上市或正处于开发中的他汀类药物有罗素伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、罗伐他汀、匹伐他汀等多种。他汀类药物全球产值可达到200亿美元。目前他汀类药物的合成工艺路线存在可改进的地方，A6到A7以及C2到C3步骤，采用深冷条件下硼烷还原，对设备要求高且生产不安全。美国专利US5399722、US5286883、中国专利200610027347.0报道这类合成方法。(2)度洛西汀是一种5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂，是一种抗抑郁药；孟鲁司特是一种对阿斯匹林敏感的哮喘患者以及预防运动诱发的支气管收缩进行治疗的药物。两种药物全球产值均可达到40本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种葡萄糖脱氢酶DNA分子，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示；或者选自编码如下蛋白质(a)或(b)的基因：(a)SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列组成的多肽或蛋白质；(b)在(a)限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有葡萄糖脱氢酶活性的由(a)衍生的多肽或蛋白质。

【技术特征摘要】
1.一种葡萄糖脱氢酶DNA分子，其碱基序列如SEQIDNO.1所示；或者选自编码如下蛋白质(a)或(b)的基因：(a)SEQIDNO.2所示的氨基酸序列组成的多肽或蛋白质；(b)在(a)限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有葡萄糖脱氢酶活性的由(a)衍生的多肽或蛋白质。2.根据权利要求1所述的DNA分子，其特征在于，在(a)限定的氨基酸序列中经过取代的一个或几个氨基酸且具有葡萄糖脱氢酶活性的由(a)衍生的多肽或蛋白质的第149位为亮氨酸，第170位为赖氨酸。3.根据权利要求1或2所述的DNA分子，其特征在于，碱基序列SEQIDNO.1利用SEQIDNO.3序列的149位氨基酸和170位氨基酸突变得到。4.根据权利要求3所述的DNA分子，其特征在于，用于149位氨基酸突变的引物序列为SEQIDNO.4和SEQIDNO.5。5.根据权利要求4所述的DNA分子，其特征在于，用于170位氨基酸突变的引物序列为SEQIDNO.6和SEQIDNO.7。6.一种蛋白质或者多肽序列，选自以下多肽或蛋白质中的一种：(a)SEQIDNO.2所示的氨基酸序列组成的多肽或蛋白质；(b)在(a)限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或...

【专利技术属性】
技术研发人员：余华顺，俞学锋，李知洪，姚鹃，戴秋红，龚大春，王健，李建华，邹林汉，吴尧，李明，
申请(专利权)人：安琪酵母股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42