一种抗真菌环脂肽棘白菌素B的制备方法技术

本发明专利技术提供一种抗真菌环脂肽棘白菌素B的制备方法，包括下列步骤：1)固液分离ECB发酵液；2)大孔吸附树脂ADS‑17或X‑5富集；3)大孔吸附树脂经热无水甲醇洗脱，合并洗脱液；4)洗脱液浓缩，加氯化钠溶液，搅拌降温析晶，ECB粗品滤饼干燥；5)ECB粗品滤饼用甲醇过滤后，滤液上反相树脂柱XT30；6)反相树脂柱XT30洗脱液浓缩，加氯化钠溶液，搅拌降温析晶，ECB滤饼干燥；7)收集ECB干品。该方法能简单有效的解决副产物洗脱困难，浪费溶剂的问题。能有效完成含水ECB的固液分离，显著减少产品降解。该方法简单易行，适于工业化生产，并能将棘白菌素B最终纯度提高到99％以上。

Preparation of an antifungal cyclosporin acanthomycin B

The invention provides a cyclic lipopeptide antifungal echinocandin B preparation method comprises the following steps: 1) the solid-liquid separation ECB fermentation liquid; 2) macroporous adsorption resin ADS 17 or X 5 enrichment; 3) macroporous adsorption resin by hot anhydrous methanol elution with eluent; 4 the eluent is concentrated, and Sodium Chloride Solution), stirring temperature crystallization, ECB crude cake drying; 5) ECB crude cake with methanol after filtration, the filtrate on the RP resin column XT30; 6) by XT30 resin and eluted with Sodium Chloride Solution, stirring, cooling crystallization, ECB cake drying; 7) collect ECB dry goods. This method can easily and effectively solve the problem of the elution of by-products and the waste of solvent. It can effectively complete the solid-liquid separation of the water bearing ECB, and significantly reduce the degradation of the product. This method is simple, suitable for industrial production, and can increase the final purity of acanthomycin B to more than 99%.

【技术实现步骤摘要】
一种抗真菌环脂肽棘白菌素B的制备方法
本专利技术属于药物化学领域，具体涉及一种抗真菌环脂肽棘白菌素B的制备方法。
技术介绍
棘白菌素类是新一代全身性抗真菌药，作用机理为抑制1，3-β-D葡聚糖合成酶活性，从而抑制真菌细胞壁的合成。其独特的作用靶点和确切的疗效，使其与多烯类，三唑类等药物成为抗真菌药物家族重要成员。目前已经上市的此类药物有：卡泊芬净、米卡芬净和阿尼芬净。阿尼芬净具有无首过效应的特点，主要用于治疗念珠菌和曲霉菌引起的严重感染。阿尼芬净是由发酵产物棘白菌素B(EchinocandinB，ECB)为原料，经化学或酶反应脱去亚油酸侧链，形成亲水性六元环肽母核，再经合成反应加上戊氧基三苯基甲酸侧链而得。根据美国专利US4024235和US4024246，棘白菌素B可由Aspergillusnidulans，Aspergillusrugulosus发酵得到，本身在体外具有抗真菌活性。目前所用EchinocandinB发酵，存在产量不高，色素较重，结构类似物较多的问题。EchinocandinB具有两亲性质，不溶于水和非极性溶剂，易溶于低级醇类，化学性质不稳定，易降解。Echinoc本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗真菌环脂肽棘白菌素B的制备方法，其特征在于，该方法包括下列步骤：1)固液分离棘白菌素B发酵液，棘白菌素B即ECB；2)大孔吸附树脂ADS‑17或X‑5富集；3)大孔吸附树脂经热无水甲醇洗脱，合并洗脱液；4)洗脱液浓缩，加氯化钠溶液，搅拌降温析晶，ECB粗品滤饼干燥；5)ECB粗品滤饼用甲醇过滤后，滤液上D318离子交换树脂柱；6)D318离子交换树脂柱洗脱液浓缩，加氯化钠溶液，搅拌降温析晶，ECB滤饼干燥；7)收集ECB干品。

【技术特征摘要】
1.一种抗真菌环脂肽棘白菌素B的制备方法，其特征在于，该方法包括下列步骤：1)固液分离棘白菌素B发酵液，棘白菌素B即ECB；2)大孔吸附树脂ADS-17或X-5富集；3)大孔吸附树脂经热无水甲醇洗脱，合并洗脱液；4)洗脱液浓缩，加氯化钠溶液，搅拌降温析晶，ECB粗品滤饼干燥；5)ECB粗品滤饼用甲醇过滤后，滤液上D318离子交换树脂柱；6)D318离子交换树脂柱洗脱液浓缩，加氯化钠溶液，搅拌降温析晶，ECB滤饼干燥；7)收集ECB干品。2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述棘白菌素B发酵液由高产菌株CGMCCNo.8987发酵制备。3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤1)，具体包括如下步骤：取菌丝体，加入助滤剂珍珠岩，板框过滤收集棘白菌素B菌饼；菌饼用原发酵液体积40-80％的丙酮浸泡，充分搅拌，脱色除杂剂活性炭以质量体积比g/100ml计为0.5-2％，搅拌均匀，直接板框过滤，收集滤液。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2)，具体包括如下步骤：滤液加水调节丙酮浓度至20-40％，上大孔吸附树脂ADS-17或X-5富集。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3)，具体包括如下步骤：无水甲醇加热至45-50℃，直接洗脱大孔吸附树脂，合并甲醇洗脱液；所述无水甲醇洗脱大孔吸附树脂3～5个柱体积。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤4)，具体包括如下步骤：甲醇洗脱液浓缩至1倍柱体积左右，加等体积的以质量体积比g/100ml计浓度为5％-15％的氯化钠溶液，充分搅拌降温至2-10℃析晶，过滤得湿滤饼；湿滤饼于30-40℃干燥，得ECB粗品滤饼。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤5)，ECB粗品滤饼用少量40-60％...

【专利技术属性】
技术研发人员：张贵民，赵德立，薛国希，
申请(专利权)人：鲁南制药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37