The invention provides a method for purifying Niumo B0 in Kangding, the first from the fermentation broth of bacteria residue extraction Niumo Kangding B0 crude, crude treated by membrane filtration and added to the filtrate in the adsorbent to form solid adsorption Niumo Kangding B0, and the solids of supercritical CO2 fluid extraction, adding solvent crystallization to the extract, and finally to HILIC silica bonded filler as stationary phase, ethanol water solution as mobile phase, the crystals were separated by column chromatography effluent was collected in Niumo Kangding B0, Kangding B0 Niumo to obtain pure products; the method can well to realize the separation of PB0 and PC0, stable and efficient by Niumo Kangding B0, the purity of HPLC was 99.4%, the purity of HPLC isomers of PC0 low to 0.01 0.04%, compared with the existing purification methods, the invention has the advantages of simple operation, production The advantage of good quality.
【技术实现步骤摘要】
一种纽莫康定B0的纯化方法
本专利技术涉及化学领域，尤其涉及一种纽莫康定BO的纯化方法。
技术介绍
纽莫康定B0(PneumocandinB0，简称PB0)是由真菌产生的次级代谢物，是合成抗真菌药物卡泊芬净(Caspofungin)的中间体。卡泊芬净是首个被美国食品与药品管理局批准用于临床的棘球白素B类药物，是一种β-(1，3)-葡聚糖合成酶的非竞争性抑制剂，可影响真菌细胞壁的合成，从而具有抗真菌的活性。纽莫康定B0由真菌发酵产生，发酵过程中会产生与PB0结构相似的多种产物如纽莫康定A0(简称PA0)，也有PB0的异构体纽莫康定C0(简称PC0)，从发酵液中分离PB0的方法非常复杂。申请号为201110328804.0的中国专利“一种高纯度肺囊康定B0的制备方法”采用大孔树脂处纯化，再用聚合物微球分离的方式得到了98％以上纯度的纽莫康定B0精粉，但专利没有具体说明HPLC的检测方式是否将PB0的异构体PC0从PB0峰中彻底分离开。申请号为201210326890.6的中国专利“卡泊芬净前体pnemocandinB0组分的纯化方法”先采用反相硅胶柱分离，再采用正向硅...
【技术保护点】
一种纽莫康定B0的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)过滤纽莫康定发酵液，取菌渣，并以醇类溶剂为萃取剂，对所述菌渣进行萃取；所得萃取液经膜过滤法过滤，得过滤液备用；(2)向所述过滤液中加入吸附剂，使纽莫康定B0富集于所述吸附剂上；(3)对吸附有纽莫康定B0的吸附剂进行CO2超临界萃取，将所得萃取液进行结晶处理，得到含纽莫康定B0的晶体；(4)以HILIC模式反相键合硅胶为固定相，乙醇水溶液为流动相，对所述含纽莫康定B0的晶体进行柱层析分离，收集富含纽莫康定B0的流出液，即得。
【技术特征摘要】
1.一种纽莫康定B0的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)过滤纽莫康定发酵液，取菌渣，并以醇类溶剂为萃取剂，对所述菌渣进行萃取；所得萃取液经膜过滤法过滤，得过滤液备用；(2)向所述过滤液中加入吸附剂，使纽莫康定B0富集于所述吸附剂上；(3)对吸附有纽莫康定B0的吸附剂进行CO2超临界萃取，将所得萃取液进行结晶处理，得到含纽莫康定B0的晶体；(4)以HILIC模式反相键合硅胶为固定相，乙醇水溶液为流动相，对所述含纽莫康定B0的晶体进行柱层析分离，收集富含纽莫康定B0的流出液，即得。2.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：步骤(1)中，所述醇类溶剂为70-80％的甲醇水溶液或60-70％的乙醇水溶液。3.根据权利要求1或2所述的纯化方法，其特征在于：步骤(1)中，所述膜过滤法选自超滤、纳滤中的一种或两种；优选地，所述膜过滤法具体为：先采用孔径为4500-5500道尔顿的超滤膜过滤所述萃取液，再采用孔径为900-980道尔顿的纳滤膜过滤。4.根据权利要求3所述的纯化方法，其特征在于：步骤(2)中，所述吸附剂选自硅藻土、活性氧化铝中的一种或两种；优选地，所述吸附剂的加入量为所述过滤液中纽莫康定B0重量的5-6倍。5.根据权利要求1或4所述的纯化方法，其特征在于：步骤(2)中，加入吸附剂前，还包括除去所述过滤液中水的步骤，具体为：以甲醇或乙醇为置换剂，采用纳滤法置换过滤液中的水；优选地，置换至所得溶液中甲醇或乙醇浓度达95％以上，纽莫康定B0含量为200-250g/L。6.根据权利要求1或2或4所述的纯化方法，其特征在于：步骤(3)中，所述CO2超临界萃取的操作为：以乙醇为夹带剂，先于35-40℃，19-20MPa条件下对吸附有纽莫康定B0的吸附剂进行一次萃取，弃去萃出物；然后向一次萃取后剩余的固形物中加入夹带剂，于45-50℃，29-30MPa条件下进行二次萃取，得含纽莫康定B0的乙醇萃取液。7.根据权利要求6所述的纯化方法，其特征在于：一次萃取中，吸附剂与夹带剂的质量体积比为100g：100-150mL；二次萃取中，固形物与夹带剂的质量体积比为100g：180-220mL。8.根据权利要求1或...
【专利技术属性】
技术研发人员：何勇崴，岳光，张葵，
申请(专利权)人：北大方正集团有限公司，北大医药重庆大新药业股份有限公司，北大医疗产业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11
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