酿酒酵母重组乙型肝炎病毒表面抗原流加补料发酵工艺制造技术

本发明专利技术提供了一种利用啤酒酵母工程菌生产乙肝表面抗原的新方法，该方法包括如下步骤：１）所述啤酒酵母工程菌的种子发酵步骤；２）利用步骤１）制得的种子进行发酵培养的步骤；和３）从步骤２）所得的发酵混合物中分离纯化出乙肝表面抗原的步骤；该方法的特征在于，在上述在步骤２）中以腺嘌呤的重量计，以低于１４ｍｇ／升.小时的速率向培养基中流加腺嘌呤、腺苷、腺苷一磷酸、腺苷二磷酸或腺苷三磷酸。本发明专利技术的方法可显著提高提高重组ＨＢｓＡｇ表达水平。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种利用啤酒酵母工程菌生产乙肝表面抗原的方法，其中所述的啤酒酵母工程菌株的受体菌是腺嘌呤、亮氨酸营养缺陷型的；所述的啤酒酵母工程菌包含重组２μ质粒但不含天然的２μ质粒；所述重组２μ质粒包含编码乙肝表面抗原的基因，该基因的５’端和３’端分别与３－磷酸甘油醛脱氢酶启动子和乙醇脱氢酶终止子可操作连接；所述重组２μ质粒还包含编码亮氨酸的基因，该基因的５’端和３’端分别与启动子和终止子可操作连接；该方法包括如下步骤：　　　　１）所述啤酒酵母工程菌的种子发酵步骤；　　　　２）利用步骤１）制得的种子进行发酵培养的步骤；和　　　　　３）从步骤２）所得的发酵混合物中分离纯化出乙肝表面抗原的步骤；　　　　该方法的特征在于，在上述在步骤２）中以腺嘌呤的重量计，以低于１４ｍｇ／升.小时的速率向培养基中流加腺嘌呤、腺苷、腺苷一磷酸、腺苷二磷酸或腺苷三磷酸。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：马民强，汪和睦，周根喜，张德友，
申请(专利权)人：北京天坛生物制品股份有限公司，天津博荟生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]