一种钢筋混凝土污水管腐蚀产物中微生物细胞的提取方法技术

本发明专利技术涉及一种钢筋混凝土污水管腐蚀产物中微生物细胞的提取方法，主要步骤包括：按照要求分别配制焦磷酸钠溶液、蔗糖溶液以及氯化钠溶液，在焦磷酸钠溶液中加入混凝土或钢筋腐蚀产物，破碎混合均匀后，加入至蔗糖溶液中，离心，取上层清液再离心，去一半上清液，加入氯化钠溶液，再离心，去上清液。本发明专利技术在提取微生物DNA之前，先从腐蚀产物中提取微生物细胞的方法，大大提高了后续DNA提取、PCR扩增以及高通量测序的便利性及有效性，极大地拓展了微生物研究在钢筋混凝土污水管道以及其他腐蚀性环境中的应用。

A method for extracting microorganism cells from corrosion products of reinforced concrete sewer pipes

The invention relates to a method for extracting microbial cells of reinforced concrete sewage pipe corrosion products, mainly comprising the following steps: in accordance with the requirements of separately prepared sodium pyrophosphate solution, sucrose solution and Sodium Chloride Solution, with concrete or steel corrosion in sodium pyrophosphate solution, crushing and mixing evenly, add to the sucrose solution, centrifugal, take the upper the supernatant centrifugal supernatant, half, to join Sodium Chloride Solution, and then centrifuged to supernatant. The present invention before the extraction of microbial DNA, first extraction method of microbial cells from corrosion products, greatly improving the subsequent DNA extraction, PCR amplification and high-throughput sequencing of the convenience and effectiveness, greatly expand the application of microbial research in reinforced concrete sewer pipes and other corrosive environments.

【技术实现步骤摘要】
一种钢筋混凝土污水管腐蚀产物中微生物细胞的提取方法
本专利技术属于模拟管道装置检测方法
，主要涉及一种钢筋混凝土污水管腐蚀产物中微生物细胞的提取方法。
技术介绍
市政排水管网是重要的城市基础设施，对城市的发展建设，人民生活水平的提高，以及生态环境的维护意义重大。管网腐蚀严重影响着城市输水安全，一方面由于腐蚀产物的释放而影响输送水质，另一方面腐蚀产物在管壁的累积易造成输水能力的下降、能耗的增加甚至引发爆管、污染环境。钢筋混凝土管作为一种典型的排水管道，在污水、污泥、气态硫化氢以及管道内壁微生物的作用下，腐蚀问题极为严重。其中，微生物作用是造成污水管腐蚀的主要因素。在硫酸盐还原菌、硫氧化细菌、铁细菌及真菌等多种生物作用下，混凝土材质中原有水化硅酸钙和氢氧化钙极易转变为钙矾石和石膏两种主要腐蚀产物，结构疏松，机械强度低，极易产生破损、地面塌陷、污水泄漏等事故。另一方面，随着混凝土保护层的腐蚀、机械破坏甚至剥落，管道中内嵌的钢筋也极易在微生物的作用下发生腐蚀，造成管道机械强度的骤然下降，甚至引发爆管。综上，钢筋混凝土污水管道的微生物腐蚀研究意义重大。然而，混凝土、钢筋腐蚀产物复杂的理化本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种钢筋混凝土污水管腐蚀产物中微生物细胞的提取方法，其特征在于，该提取方法包括如下步骤：(1)、配置0.2％的焦磷酸钠溶液，用硫酸调节其pH为2‑4，高温高压灭菌；(2)、配置1.33g/ml的蔗糖溶液，再经过0.22um的滤膜过滤消毒；(3)、配置0.8％的氯化钠溶液，高温高压灭菌；(4)、在鹰嘴管中加入体积为25‑30ml的0.2％且pH为2‑4的焦磷酸钠溶液，再加入质量为1‑1.5g的混凝土或钢筋腐蚀产物，搅拌混合均匀；(5)、在70‑80kHz工作频率下，利用超声波破碎仪对上述步骤(4)搅拌混合物进行破碎得到腐蚀产物焦磷酸钠混合匀浆，操作两次，每次30s；破碎的同时将鹰嘴管置于冰冷容器...

【技术特征摘要】
1.一种钢筋混凝土污水管腐蚀产物中微生物细胞的提取方法，其特征在于，该提取方法包括如下步骤：(1)、配置0.2％的焦磷酸钠溶液，用硫酸调节其pH为2-4，高温高压灭菌；(2)、配置1.33g/ml的蔗糖溶液，再经过0.22um的滤膜过滤消毒；(3)、配置0.8％的氯化钠溶液，高温高压灭菌；(4)、在鹰嘴管中加入体积为25-30ml的0.2％且pH为2-4的焦磷酸钠溶液，再加入质量为1-1.5g的混凝土或钢筋腐蚀产物，搅拌混合均匀；(5)、在70-80kHz工作频率下，利用超声波破碎仪对上述步骤(4)搅拌混合物进行破碎得到腐蚀产物焦磷酸钠混合匀浆，操作两次，每次30s；破碎的同时将鹰嘴管置于冰冷容器中防止混合匀浆温度过高；(6)、另取出一支新的鹰嘴管，加入体积为25-30ml的1.33g/ml的蔗糖溶液；(7)、将上述步骤(5)中破碎得到的腐蚀产物焦磷酸钠混合匀浆缓慢倒入上述步骤(6)...

【专利技术属性】
技术研发人员：田一梅，宋雅荣，张茹芳，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：天津,12