The invention relates to a high stability immobilized metal affinity chromatography medium, the agarose gel microspheres dispersed on the surface of silicon nitride and boron nitride as the core, and the agarose gel microspheres with crosslinking amino Oligosaccharin; wherein, the hydroxyl containing agarose molecular agarose gel microspheres in amino Oligosaccharin in at the same time the amino allyl 2,3 epoxy propyl ether bond; the allyl 2,3 epoxy propyl ether and ligand connected; the ligand through ligand supported metal ion. The invention improves the design of the chromatography medium, improves the stability and prolongs the service life of the medium. After repeated use, the invention can still maintain high medium loading capacity and separation effect.
【技术实现步骤摘要】
一种高稳定性固定化金属螯合亲和层析介质
本专利技术涉及一种层析介质，具体涉及一种高稳定性固定化金属螯合亲和层析介质。
技术介绍
蛋白质的分离纯化在基因工程、制药工程等学科领域有着重要的应用，目前分离纯化蛋白质技术有：沉淀法，如盐析、重金属盐沉淀、加热变性、生物碱或酸沉淀等；层析法，如亲和层析、吸附层析、凝胶过滤层析、离子交换层析等；电化学法，如等电聚焦、电泳法；离心法；膜分离技术等等。其中，固定化金属螯合亲和层析技术中的层析介质含有的过渡金属离子，如Cu2+、Ni2+、Fe3+、Co2+等，能够与蛋白表面的色氨酸、半胱氨酸或者组氨酸配位结合，而这些氨基酸种类、数量、空间构象和位置的不同会产生亲和力大小不同，从而选择性的实现分离纯化。相对于传统的分离蛋白质技术，固定化金属螯合亲和层析技术具有如下优势：特异性强，可吸附含有组氨酸、色氨酸、半胱氨酸残基等的蛋白质；金属离子选择多样化，可以根据目标蛋白质的分离特性及条件选择合适的金属离子以及固定螯合相以达到分离纯化目标蛋白的目的，并且金属离子价格相对低廉等。目前已经商业化的固定化金属螯合亲和层析介质包括Ni-NTAAgar...
【技术保护点】
一种高稳定性固定化金属螯合亲和层析介质，其特征在于，以表面分散有氮化硅和氮化硼的琼脂糖凝胶微球为内核，并在所述琼脂糖凝胶微球表面交联有氨基寡糖素；其中，所述琼脂糖凝胶微球表面的琼脂糖分子中所含羟基和氨基寡糖素中所含氨基同时与烯丙基‑2,3‑环氧丙醚键合；所述烯丙基‑2,3‑环氧丙醚还连接有配基；所述配基通过配位固载金属离子。
【技术特征摘要】
1.一种高稳定性固定化金属螯合亲和层析介质，其特征在于，以表面分散有氮化硅和氮化硼的琼脂糖凝胶微球为内核，并在所述琼脂糖凝胶微球表面交联有氨基寡糖素；其中，所述琼脂糖凝胶微球表面的琼脂糖分子中所含羟基和氨基寡糖素中所含氨基同时与烯丙基-2,3-环氧丙醚键合；所述烯丙基-2,3-环氧丙醚还连接有配基；所述配基通过配位固载金属离子。2.根据权利要求1所述的金属螯合亲和层析介质，其特征在于，所述氮化硅、氮化硼和琼脂糖凝胶微球三者的质量比为4～5∶4～5∶100。3.根据权利要求1所述的金属螯合亲和层析介质，其特征在于，所述氨基寡糖素与琼脂糖凝胶微球的质量比为20～25∶100。4...
【专利技术属性】
技术研发人员：瞿欢欢，朱至放，
申请(专利权)人：苏州博进生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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