【技术实现步骤摘要】
用于固定金属离子色谱法(IMAC)的螯合基团的固定本申请是申请号为200880105756.5、申请日为2008年8月6日的中国专利技术专利申请的分案申请。本专利技术涉及用于将多羧酸结合到固相的方法。此外，本专利技术涉及具有被固定的多羧酸的固相和使用该固相例如用于纯化重组多肽的方法。用于纯化重组蛋白质的非常有力的策略是“His-标记”的使用，所述“His-标记”一般包括6-10个连续组氨酸。His-标记与Ni2+-离子的游离配位点紧密结合。它们可以通过高浓度的咪唑释放，所述高浓度的咪唑竞争在Ni2+上的配位点。特定吸收和解吸的此种循环可以用于所需蛋白质的一步纯化，导致100或甚至更多的富集因子。这种技术最广泛使用的变体使用经由ε -氨基基团与琼脂糖珠偶联的NaNa-双(羧甲基)_赖氨酸。活性基团是加载Ni2+的NTA (氮川三乙酸)，而间隔物是氨基丁基基团。然而，此种Ni2+-NTA-基质具有几个严重缺点，例如关于Na Na-双(羧甲基)-赖氨酸的高成本。另外的缺点是被固定的Ni2+-离子的不稳定性。因为NTA仅具有关于Ni2+-的4个配位点，所以Ni2+离子从基质中容易地泄漏并且污染蛋白质样品。由于至少2个原因存在严重问题:Ni2+是偏毒性的重金属，并且它催化不希望有的蛋白质样品氧化。此外，NTA结合的Ni2+容易地通过蛋白质保护试剂例如DTT (二硫苏糖醇)还原，并且随后从基质中释放。最后，金属螯合蛋白酶抑制剂例如EGTA或EDTA无法与Ni2+-NTA-基质组合，因为它们从这种基质中提取Ni2+-离子。US6, 670, 159描述了用于制备基于NTA...
【技术保护点】
具有6个或更多配位基团的固定螯合剂用于固定金属离子色谱法（IMAC）的用途，其中所述固定螯合剂是具有式(Ib)结构的具有被固定的多羧酸的固相：其中SP是固相；和PCA是多羧酸特别是氨基多羧酸残基，或其盐。FDA0000386959180000011.jpg
【技术特征摘要】
2007.08.06 EP 07015389.5;2008.07.14 EP 08012686.51.具有6个或更多配位基团的固定螯合剂用于固定金属离子色谱法(IMAC)的用途，其中所述固定螯合剂是具有式(Ib)结构的具有被固定的多羧酸的固相: 2.权利要求1的用途，其中所述固定螯合剂是具有6个或更多配位基团的多羧酸酯，所述配位基团选自氨基、羧基、甲酰胺和氧肟酸盐基团。3.权利要求1或2的用途，其中所述多羧酸选自乙二胺四乙酸(EDTA)、乙二醇-双(2-氨基乙醚)-N，N，N’，N’_四乙酸(EGTA)、二乙烯三胺五乙酸(DPTA)和三乙烯四胺-N, N，N，，N，，N，，，N，，-六乙酸(T...
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