用清蛋白聚合的血清亲合结合法纯化乙型肝炎表面抗原前-Ｓ-区制造技术

重组体前－Ｓ－ＨＢｓＡｇ通过快速有效两步层析法纯化。破碎表达重组体前－Ｓ－ＨＢｓＡｇ的酵母细胞，澄清细胞内含物，用聚合人类血清清蛋白亲合层析分离该内含物，前－Ｓ－ＨＢｓＡｇ进一步用丁基琼脂糖疏水反应层析纯化。这一过程得到高于９０％纯度的前－Ｓ－ＨＢｓＡｇ。（*该技术在2007年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及纯化酵母表达的重组体前-S-Hepatitis B表面抗原(HBsAg，前S-肝炎B)的一种快速有效方法。已证实该表面抗原肝炎B前-S区是病毒受体位点，在肝炎B病毒进入肝细胞之前，该区结合于肝细胞，Valenzuela et al，Bio/Technology 3∶317-320(1985)，该前-S区结合于聚合的血清清蛋白，认为聚合的血清清蛋白与肝细胞膜有关，因此，含有前-S的，衍生的重组体抗原被称作可诱导抗体的一类抗原，这些抗体能阻断肝炎B病毒与感受性宿主细胞的接触。肝炎B病毒含有前-S的表面抗原已从感染的人类血浆中分离得到，Neurath and Strick，Arch.Virol 6079-81(1979)，最近并用Valenznela，supra描述的标准重组体技术得到。事实上，Neurath和Strick能采用与人类聚合的血清清蛋白选择性结合的方法从HBeAg阳性人类血清中分离小量HBsAg。该HBsAg可用3M硫氰酸钠从连接了聚合的人类血清清蛋白的琼脂糖柱上洗脱。以此方法得到了25倍到80倍纯化血清HBsAg。然而，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种纯化重组体表达的肝炎Ｂ病素前—Ｓ表面抗原的方法，包括：ａ．将含前（２）的抗原连接于聚合的血清清蛋白母体入；ｂ．将该抗原从母体上洗脱，用卤代醋酸碱金属盐；及ｃ．用丁基琼脂糖亲合层析及一合适的洗脱剂进行最后纯化。

【技术特征摘要】
US 1986-4-25 8563251.一种纯化重组体表达的肝炎B病毒前-S表面抗原的方法，包括a.将含前(2)的抗原连接于聚合的血清清蛋白母体入；b.将该抗原从母体上洗脱，用卤代醋酸碱金属盐；及c.用丁基琼脂糖亲合层析及一合适的洗脱剂进行最后纯化。2.据权项1所述的方法，在步骤a中的清蛋白是人类或黑猩猩的血清清蛋白。3.据权项1所述的方法，在步骤a中的清蛋白是人类血清清蛋白。4.据权项1所述的方法，在步骤a中的抗原是前-S(2)-HBsAg，前-S(1)S(2)-HBsAg，前-S(1)S(2)或前-S(2)。5.据权项1所述的方法，在步骤b中的碱...

【专利技术属性】
技术研发人员：E戴尔莱曼，特德F谢弗，威廉J麦卡里尔，
申请(专利权)人：默克公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]