戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶制造技术

一种从假单胞菌中克隆的并经基因工程方法改造的，长为２．３ｋｂ的ＧＬ－７ＡＣＡ酰化酶基因，并测得其全序列。构建了该基因的高表达重组质粒ｐＫＫＣＡｌ，该质粒转化至大肠杆菌菌株ＪＭ１０９，得到的基因工程菌株ＪＭ１０９／ｐＫＫＣＡｌ在普通的ＬＢ培养基中，勿需添加诱导剂即能高效表达ＧＬ－７ＡＣＡ酰化酶，粗抽液中的酶比活可达３．５单位每毫克蛋白。（*该技术在2017年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种从假单胞菌中克隆的戊二酰－７－氨基头孢烷酸酰化酶基因，其特征在于该基因经基因工程方法改造后得到的２．３ｋｂ的ＤＮＡ片段，它编码ＧＬ－７ＡＣＡ酰化酶的核苷酸序列及相应的氨基酸序列如下： １ ＡＴＧＧＧＡＡＴＴＣＣＧＡＣＣＴＣＧＡＣＧＣＣＧＣＡＧＧＣＧＣＣＧＡＴＴＧＣＧＧＣＣＴＡＴＡＡＡＣＣＧＡＧＡＡＧＣＡＡＴ ６０ １ ＭｅｔＧｌｙＩｌｅＰｒｏＴｈｒＳｅｒＴｈｒＰｒｏＧｌｎＡｌａＰｒｏＩｌｅＡｌａＡｌａＴｙｒＬｙｓＰｒｏＡｒｇＳｅｒＡｓｎ ２０ ６１ ＧＡＧＡＴＣＣＴＧＴＧＧＧＡＣＧＧＣＴＡＣＧＧＣＧＴＣＣＣＧＣＡＣＡＴＣＴＡＣＧＧＣＧＴＣＧＡＣＧＣＧＣＣＣＴＣＡＧＣＣ １２０ ２１ ＧｌｕＩｌｅＬｅｕＴｒｐＡｓｐＧｌｙＴｙｒＧｌｙＶａｌＰｒｏＨｉｓＩｌｅＴｙｒＧｌｙＶａｌＡｓｐＡｌａＰｒｏＳｅｒＡｌａ ４０ １２１ ＴＴＣＴＡＣＧＧＣＴＡＴＧＧＣＴＧＧＧＣＣＣＡＧＧＣＧＣＧＣＡＧＣＣＡＣＧＧＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＣＴＧＣＧＣＣＴＧＴＡＴ １８０ ４１ ＰｈｅＴｙｒＧｌｙＴｙｒＧｌｙＴｒｐＡｌａＧｌｎＡｌａＡｒｇＳｅｒＨｉｓＧｌｙＡｓｐＡｓｎＩｌｅＬｅｕＡｒｇＬｅｕＴｙｒ ６０ １８１ ＧＧＡＧＡＡＧＣＧＣＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＧＣＣＧＡＡＴＡＣＴＧＧＧＧＣＣＣＧＧＡＴＴＡＣＧＡＡＣＡＧＡＣＧＡＣＣＧＴＣ ２４０ ６１ ＧｌｙＧｌｕＡｌａＡｒｇＧｌｙＬｙｓＧｌｙＡｌａＧｌｕＴｙｒＴｒｐＧｌｙＰｒｏＡｓｐＴｙｒＧｌｕＧｌｎＴｈｒＴｈｒＶａｌ ８０ ２４１ ＴＧＧＣＴＧＣＴＧＡＣＣＡＡＣＧＧＣＧＴＧＣＣＧＧＡＧＣＧＣＧＣＴＣＡＧＣＡＧＴＧＧＴＡＴＧＣＧＣＡＧＣＡＧＴＣＧＣＣＴ ３００ ８１ ＴｒｐＬｅｕＬｅｕＴｈｒＡｓｎＧｌｙＶａｌＰｒｏＧｌｕＡｒｇＡｌａＧｌｎＧｌｎＴｒｐＴｙｒＡｌａＧｌｎＧｌｎＳｅｒＰｒｏ １００ ３０１ ＧＡＴＴＴＣＣＧＣＧＣＣＡＡＣＣＴＣＧＡＣＧＣＣＴＴＣＧＣＧＧＣＧＧＧＣＡＴＣＡＡＣＧＣＣＴＡＴＧＣＧＣＡＧＣＡＧＡＡＣ ３６０ １０１ ＡｓｐＰｈｅＡｒｇＡｌａＡｓｎＬｅｕＡｓｐＡｌａＰｈｅＡｌａＡｌａＧｌｙＩｌｅＡｓｎＡｌａＴｙｒＡｌａＧｌｎＧｌｎＡｓｎ １２０ ３６１ ＣＣＣＧＡＣＧＡＣＡＴＣＴＣＧＣＣＣＧＡＣＧＴＧＣＧＧＣＡＧＧＴＧＣＴＧＣＣＧＧＴＴＴＣＣＧＧＣＧＣＣＧＡＣＧＴＧＧＴＧ ４２０ １２１ ＰｒｏＡｓｐＡｓｐＩｌｅＳｅｒＰｒｏＡｓｐＶａｌＡｒｇＧ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王恩多，李勇，姜卫红，赵国屏，杨蕴刘，
申请(专利权)人：中国科学院上海生物化学研究所，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]