双歧杆菌的培养和制粉剂新技术制造技术

双歧杆菌的培养和制粉剂新技术，设计了开口少，孔径小，密封严的新型发酵罐，减少了杂菌污染，缩短了培菌时间，降低了运行费用；在培养菌的过程中采用恒温培养，以及在制粉过程中添加溶粉类和糖类保护剂，菌的存活率比现有技术高近１００倍，一升菌液可获干粉００克，菌数１０↑［７］个／ｇ以上，存活期为４－５个月。（*该技术在2017年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及双歧杆菌的培养和制粉剂的技术。双歧杆菌是人体肠道内正常菌群之一，对人体有许多有益的生理功能。因此，目前国内外普遍将双歧杆菌加入含乳制品的饮料中，或与其它乳酸菌混合后制成饮料或口服液等多种保健食品来增加体内双歧杆菌的数量。但双歧杆菌是属专性厌氧菌，在大规模生产中采用普通的厌氧发酵罐进行培养，难以保证厌氧条件，不仅菌的生长缓慢，而且易于杂菌污染。所以近年米，一些单位和生产厂家在培养时采用通入高纯氮气以维持厌氧状态，但这同样未能避免杂菌污染，同时也增加了运行成本。目前生产的双歧杆菌口服液，由于菌体在液体中存活期相当短，在常温条件下存活期不超过4周，特别是在夏季存活期缩短至几天。为解决存活期问题，现不少单位的产品采用粉剂，但在制粉过程中由于使用一般的方法，特别是制粉时采用喷雾干燥，使得不耐热的双歧杆菌在制粉过程中大量甚至全部死亡，这就大大降低了双歧杆菌的使用效果，而直接采用冷冻干燥制粉，制粉过程中菌存活率较低。针对以上在培养双歧杆菌和制粉过程中存在的问题，本专利技术的主要任务在于寻求一套新的培养和制粉工艺，以达到避免杂菌污染，提高生产化培养双歧杆菌数量，提高双歧杆菌在粉剂中的存活率。为达到上述目的，本专利技术采用的技术方案是1．改变制作厌氧培养基的技术，配制厌氧培养基；2．改变培养的工艺条件和创制新的发酵罐以减少杂菌污染；3．采用新的制粉工艺以提高粉剂中菌的存活率和保存期。培养基的制备先将饮用水煮沸，按量加入所需的培养基成分后再沸腾5分钟，以去除培养基溶液中的溶解氧，然后分装于发酵罐中，再加入万分之三的DL-半胱氨酸盐酸盐，将装有培养基的发酵罐放于灭菌器中灭菌，然后冷却→接种。发酵罐的设计双歧杆菌是专性厌氧菌，采用普通的生产性的厌氧发酵罐很难获得高纯度的双歧杆菌，而且运行管理较困难，又易于杂菌污染。因此，新发酵罐的设计主要遵循开口少，孔径小，密封严原则，具体设计出的发酵罐见附图。1．进料口2．接种口3．开关4．提手 5．测温管6．罐体 7．放料口8．盖子9．盖子俯视附图说明图10．胶塞 11．罐脚双歧杆菌的培养；①将高纯度氮气由通气管从发酵罐进料口输入，待罐内空气完全排出后，放入制备好的双歧杆菌培养基(从进料口〔1〕放入)；培养基装到一定的体积后，移开通氮的通气管，迅速用橡胶塞〔1 0〕塞住进料口，盖上并旋紧带有螺旋的盖子〔8〕；②将发酵罐放入高压灭菌柜中，在压力为1.0MPa的压力下灭菌30-35分钟后取出，从测温口〔5〕插入温度计，待灭过菌的培养基温度降至40℃±1℃灭菌时，打开开关〔3〕，从接种口〔2〕接入双歧杆菌，接完菌后，关上开关，用无菌胶塞封口；接种口和开关用保护罩封上。接种后的发酵罐放入恒温培养室中培养。恒温室的温度控制在39℃±1℃范围内。活性双歧杆菌粉剂的制备双歧杆菌在含水较低的情况下保存时间比在液体中高几倍到十几倍。本专利技术依据这一特征，在制粉剂的过程中，一是加入保护剂和填充剂，二是采用冷冻干燥，以降低菌的死亡率，延长保存期。①将培养好的双歧杆菌液从发酵罐的放料口〔7〕放出，在加入灭过菌的浓度为18-22％淀粉保护剂后，离心除去多余水份，在沉淀中加入8-12％的脱脂乳粉，1～6％的海藻糖和其他诸如蔗糖、麦芽糖等(糖浓度为3-8％)，混匀后，进行冷冻干燥24-30小时，使冻于粉含水率低于5％。②将冻干菌粉粉碎，加入灭菌后的食用填充剂。上述过程均在无菌条件下进行。本专利技术的优点①不易污染杂菌，减少倒罐现象；②由于发酵罐密封，不需整个发酵过程通高纯氮气维持厌氧状态，降低了运行费；③采用恒温培养，发酵罐内发酵温差较小，有利于双歧杆菌菌体生长，缩短了培养时间。④制作出的冻干粉在制作过程中双歧杆菌存活率高，比通常高近100倍，一升菌液可获干粉300克，菌粉中的双歧杆菌数大于107个/g，存活期一般为4-5个月甚至更长。实施例采用前面设计的10升发酵罐，按本专利技术的培养基制作方法，培养菌的工艺流程进行发酵培养的菌液中双歧杆菌数达到109个/ml以上，在离心前加入20％的灭过菌的精制玉米粉后离心，在离心后的沉淀中加入脱脂乳粉，海藻糖，蔗糖等保护剂进行冻干。进行两批试验，对成品进行计数，每克菌粉的双歧菌数第一批为107个，第二批为1.5×107个。一升培养液获含水为5％的干菌粉300g。在室温下保存2月后，活菌数仍有106个/g，存活期比现有产品延长了二个多月。权利要求1．双歧杆菌的培养和制粉剂新技术，其特征是a．所采用的发酵罐，只有一个孔径较小且密封很严的进料口，一个接种口和一个放料管，一个测温孔(但不与培养液连通)。见附图。b．培菌时，是将接种菌的发酵罐置于39℃±1℃的恒温室中进行恒温培养；c．制粉过程中，加入淀粉类和糖类保护剂。2．按权利要求1所述的双歧杆菌的培养和制粉剂新技术，其特征是所加入保护剂淀粉类的浓度为18-22％，脱脂乳8-12％，加入糖的浓度为3-8％。3．按权利要求1或2所述的双歧杆菌的培养和粉剂新技术，其特征是高纯度氮气只用于清除发酵罐内空气之用，而不是整个发酵过程中连续通氮气。全文摘要双歧杆菌的培养和制粉剂新技术,设计了开口少,孔径小,密封严的新型发酵罐,减少了杂菌污染,缩短了培菌时间,降低了运行费用;在培养菌的过程中采用恒温培养,以及在制粉过程中添加溶粉类和糖类保护剂,菌的存活率比现有技术高近100倍,一升菌液可获干粉300克,菌数10文档编号A61K35/66GK1219583SQ9710781公开日1999年6月16日 申请日期1997年12月11日 优先权日1997年12月11日专利技术者廖银章, 张毅, 刘晓风, 陈跃初 申请人:中国科学院成都生物研究所本文档来自技高网...

【技术保护点】
双歧杆菌的培养和制粉剂新技术，其特征是：ａ．所采用的发酵罐，只有一个孔径较小且密封很严的进料口，一个接种口和一个放料管，一个测温孔（但不与培养液连通）。见附图。ｂ．培菌时，是将接种菌的发酵罐置于３９℃±１℃的恒温室中进行恒温培养； ｃ．制粉过程中，加入淀粉类和糖类保护剂。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：廖银章，张毅，刘晓风，陈跃初，
申请(专利权)人：中国科学院成都生物研究所，
类型：发明
国别省市：51[中国|四川]