一种同时测定牛肝菌中12种生物碱的方法技术

本发明专利技术涉及一种同时测定牛肝菌中12种生物碱的方法，属于理化分析技术领域。该方法包括以下步骤：（1）采用5%的氢氧化钠水溶液将植物中的生物碱游离出来；（2）使用二氯甲烷/甲醇混合溶液（V二氯甲烷/V甲醇=4:1）作为萃取剂进行液液振荡萃取；（3）离心后，取下层有机相转移到色谱分析瓶中进行GC‑MS分析。本发明专利技术中12种生物碱的加标回收率在97.60%~112.67%之间，精密度不高于6.10%，方法检出限在2.13~22.38 ng/g，具有操作简便、通量高、灵敏度高、回收率及重复性好等优点。

A method for simultaneous determination of 12 alkaloids in boletus

The invention relates to a method for the simultaneous determination of 12 alkaloids in Boletus, which belongs to the technical field of chemical analysis. The method comprises the following steps: (1) using sodium hydroxide solution of 5% alkaloids in plants will be free; (2) using dichloromethane / methanol mixed solution (V /V dichloromethane methanol =4:1) as extractant liquid-liquid extraction oscillation; (3) after centrifugation, taking the lower organic phase transfer to chromatographic analysis of bottle analysis of GC MS. The recovery of 12 alkaloids in the invention of the ratio between 97.60%~112.67%, the precision is not higher than 6.10%, the detection limit of the method in 2.13~22.38 ng/g, has the advantages of convenient operation, high flux, high sensitivity, good repeatability and recovery rate.

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定牛肝菌中12种生物碱的方法
本专利技术属于理化分析
，具体涉及一种同时测定牛肝菌中12种生物碱的方法。
技术介绍
生物碱是指一类存在于生物体内的含有氮杂环的有机化合物（蛋白质、钛类、氨基酸、氨、氨基糖、核苷酸、核酸除外），一般具有碱性并表现出一定的生理活性。烟碱是一类重要的最广为人知的生物碱，在烟草中含量很高，是烟草中最重要的生物碱。此外，烟碱在牛肝菌等植物中也广泛存在，除烟碱外，其他次要生物碱还包括降烟碱、新烟草碱、假木贼碱、麦斯明、β-二烯烟碱等。生物碱具有一定的生理活性，一些国家对部分食品中得烟碱含量作出限制，如欧盟规定烟碱在食用菌鲜品和干品的最高限量分别为0.036mg/kg和1.17mg/kg，而在牛肝菌干品的最高限量则为2.3mg/kg，日本对其他食品中烟碱的最大限量为2mg/kg。人们对食品中烟碱的研究相对较多，测定方法包括气相色谱-质谱联用法（GC-MS）、液相色谱-串联质谱法等（LC-MS/MS）、液相色谱法（HPLC）等。但是，人们对其他次要生物碱的研究较少。
技术实现思路
本专利技术的目的正是基于上述技术不足，建立了一种同时测定牛肝菌中12种生物碱本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种同时测定牛肝菌中12种生物碱的方法，这12种生物碱分别为：烟碱、N‑甲基假木贼碱、降烟碱、麦斯明、假木贼碱、β‑二烯烟碱、新烟草碱、2,3’‑联吡啶、β‑二烯降烟碱、可替宁、哈尔碱、烟台林，其特征在于：使用5%的氢氧化钠溶液将目标样品中的生物碱游离出来，再用二氯甲烷/甲醇混合溶液进行液液萃取，以气相色谱‑质谱联用法进行测定，内标法定量，具体包括以下步骤：1）标准工作溶液的制备分别制备具有8级浓度梯度的12种生物碱标准工作溶液，其中，降烟碱的定量采用降烟碱‑2,4,5,6‑d4作为内标，其它生物碱的定量采用2,2’‑联吡啶‑d8作为内标；2）样品前处理准确称取0.5 g经过真空冷冻干燥并粉碎...

【技术特征摘要】
1.一种同时测定牛肝菌中12种生物碱的方法，这12种生物碱分别为：烟碱、N-甲基假木贼碱、降烟碱、麦斯明、假木贼碱、β-二烯烟碱、新烟草碱、2,3’-联吡啶、β-二烯降烟碱、可替宁、哈尔碱、烟台林，其特征在于：使用5%的氢氧化钠溶液将目标样品中的生物碱游离出来，再用二氯甲烷/甲醇混合溶液进行液液萃取，以气相色谱-质谱联用法进行测定，内标法定量，具体包括以下步骤：1）标准工作溶液的制备分别制备具有8级浓度梯度的12种生物碱标准工作溶液，其中，降烟碱的定量采用降烟碱-2,4,5,6-d4作为内标，其它生物碱的定量采用2,2’-联吡啶-d8作为内标；2）样品前处理准确称取0.5g经过真空冷冻干燥并粉碎的样品于15mL塑料离心管中，再分别加入内标溶液和5%的NaOH水溶液，震荡混匀后，静置约20min；然后加入10.0mL二氯甲烷/甲醇混合溶液，加盖密封后置于涡旋振荡器中，以2000rpm的速度涡旋振荡提取40min；以10000rpm的速度离心5min后，取下层有机相转移到色谱分析瓶中进行GC-MS分析；3）气相色谱-质谱分析利用气相色谱仪配...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩书磊，陈欢，付亚宁，刘彤，李翔宇，张洪非，罗彦波，庞永强，韩雪，侯宏卫，胡清源，
申请(专利权)人：国家烟草质量监督检验中心，
类型：发明
国别省市：河南,41