一种凹凸棒石固定化原油降解菌剂的制备、测定及实验方法技术

本发明专利技术公开了一种凹凸棒石固定化原油降解菌剂的制备、测定及实验方法，包括以下步骤，将筛选获得的数株高效低温原油降解菌接种到LB液体培养基中进行培养，待数株高效低温原油降解菌分别生长到指数生长期后，调整菌液浓度至OD600＝3.0，将各菌液混合获得复合菌剂；将灭菌处理过的凹凸棒矿石加入到复合菌剂中，通过摇床震荡吸附，凹凸棒矿石与复合菌剂吸附完成后静置，然后倾去上清液，得到原油降解菌剂。本发明专利技术提供的一种凹凸棒石固定化原油降解菌复合菌剂，可适应低温气候和盐碱化土壤等多种不良环境，能够高效降解原油污染土壤中的污染物，操作简单成本低廉，具有很好的推广使用价值。

Preparation, determination and experimental method of an attapulgite immobilized crude oil degradation agent

The invention discloses a attapulgite immobilized oil degrading bacteria preparation, determination and experiment method, which comprises the following steps, screened several strains of efficient low-temperature oil degrading bacteria were inoculated into LB liquid medium, the number of efficient low-temperature oil degrading bacteria strains respectively to the exponential growth phase after growth the concentration of bacteria, adjusted to OD600 = 3, the bacteria get mixed microbial agent; the pasteurized attapulgite added to the composite agent, by shaking bed adsorption, and adsorption of attapulgite composite agent after the completion of the static, then decanted oil degrading bacteria. The present invention provides a kind of attapulgite immobilized crude oil degrading bacteria inoculants, can adapt to low temperature climate and saline alkali soil and other adverse environmental pollutants, to the crude oil contaminated soil for efficient degradation, simple operation and low cost, has good popularization value.

【技术实现步骤摘要】
一种凹凸棒石固定化原油降解菌剂的制备、测定及实验方法
：本专利技术属于原油污染土壤修复
，具体涉及一种凹凸棒石固定化低温原油降解菌剂的制备、测定及实验方法。
技术介绍
：原油是地球上重要的能源物质之一，同时也是重要的工业原料，其在社会经济发展中具有非常广泛的作用与功能。但在原油的开采、运输、加工过程中，原油泄漏造成的污染时有发生，全世界每年约有800万吨石油进入环境，这些污染物严重破坏了生态环境。如何安全有效地对石油污染的水和土壤环境进行修复,降低生态风险,已成国际焦点问题。常用的原油污染修复手段有物理法、化学法及生物修复法。近年来，物理法和化学法因为成本高，操作复杂，会产生二次污染等缺点，逐渐被生物修复法代替。生物修复法是利用微生物的代谢活动来分解污染物，其最终产物是CO2、H2O等物质，不会对环境产生二次污染，是一种绿色的处理方法。环境中主要参与烷烃降解的微生物有细菌，真菌和酵母，其中细菌的适用性最广降解活性最强。在原油污染土壤生物修复过程中，环境温度、土壤理化性质、污染物成分和浓度对土壤中原油降解微生物产生多种影响：在25℃-35℃下，微生物生长代谢速率高，原油污染物降解本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种凹凸棒石固定化原油降解菌剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤，S1)、将筛选获得的数株高效低温原油降解菌接种到LB液体培养基中进行培养，待数株高效低温原油降解菌分别生长到指数生长期后，调整菌液浓度至OD600＝3.0，将各菌液等比例混合获得复合菌剂；S2)将灭菌处理过的凹凸棒矿石加入到步骤S1得到的复合菌剂中，通过摇床震荡吸附，凹凸棒矿石与复合菌剂吸附完成后静置，然后倾去上清液，得到原油降解菌剂。

【技术特征摘要】
1.一种凹凸棒石固定化原油降解菌剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤，S1)、将筛选获得的数株高效低温原油降解菌接种到LB液体培养基中进行培养，待数株高效低温原油降解菌分别生长到指数生长期后，调整菌液浓度至OD600＝3.0，将各菌液等比例混合获得复合菌剂；S2)将灭菌处理过的凹凸棒矿石加入到步骤S1得到的复合菌剂中，通过摇床震荡吸附，凹凸棒矿石与复合菌剂吸附完成后静置，然后倾去上清液，得到原油降解菌剂。2.根据权利要求1所述的凹凸棒石固定化原油降解菌剂的制备方法：其特征在于：步骤S1中数株高效低温原油降解菌接种到LB液体培养基中进行培养的温度为18℃～22℃。3.根据权利要求1所述的凹凸棒石固定化原油降解菌剂的制备方法：其特征在于：步骤S1中高效低温原油降解菌的数量选为4株，并且高效低温原油降解菌原油降解率为37.7％-57.9％。4.根据权利要求1所述的凹凸棒石固定化原油降解菌剂的制备方法：其特征在于：步骤S2中凹凸棒矿石...

【专利技术属性】
技术研发人员：常思静，杨蕊琪，张威，章高森，陈拓，刘光琇，
申请(专利权)人：中国科学院寒区旱区环境与工程研究所，
类型：发明
国别省市：甘肃,62