用淀粉样蛋白抗体除去淀粉样蛋白的方法技术

本发明专利技术公开了增强患者对淀粉样原纤维沉积物的细胞介导的免疫应答的方法和有关的免疫球蛋白肽及其片段。这些方法利用了针对淀粉样物质的抗体或其组成部分的调理作用。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术总地涉及治疗淀粉样蛋白相关疾病的方法。具体地说，本专利技术提供了依靠患者自身免疫吞噬系统来除去淀粉样原纤维的与治疗性抗体有关的方法。
技术介绍
淀粉样变性指亲刚果、双折射呈绿色的原纤维形式的蛋白的病理性沉积，该原纤维被刚果红染色时呈分散的或局部化淀粉样瘤的形式。这种沉积是某些疾病的症状，例如有阿尔茨海默病、炎性相关淀粉样蛋白症、II型糖尿病、牛海绵状脑病(BES)、Creutzfeld-Jakob病(CJD)、羊痒病和原发性淀粉样变性。淀粉样蛋白变性病(amyloidoses)通常分为三类主要为全身性的淀粉样蛋白变性病、主要为局部性的淀粉样蛋白变性病，以及混杂性淀粉样蛋白变性病。主要为全身性的淀粉样蛋白变性病包括慢性炎性病(如结核病、骨髓炎等)；非传染性病，如青少年类风湿性关节炎、强直性脊柱炎和Crohn′s病等；家族性地中海热，浆细胞恶液质(原发性淀粉样变性)和各种家族性多发性神经病和心肌病。主要为局部性的淀粉样蛋白变性病包括慢性透析(通常为8年以上)，阿尔茨海默病，Down综合征，遗传性大脑出血(Dutch)，以及老年人的非创伤性大脑出血。混杂性淀粉样蛋白变性病包括家族性多发性神经病(lowa)、家族性淀粉样变性(Finnish)、遗传性大脑出血(Icelandic)、CJD、甲状腺髓样癌、动脉淀粉样蛋白病和糖尿病(胰岛瘤)。其它淀粉样蛋白变性病包括Louis W.Heck，″淀粉样蛋白疾病″《Cecil′s医学课本》1504-6(W.B.Saunders & Co.，Philadelphia，PA；1996)中有所描述。引起CJD和Gerstmann-Strassler-Scheinker(GSS)病的可传染的海绵状脑病在B.Chesebro等人，″可传染的海绵状脑病简介″《田间病毒学》2845-49(第三版；RavenPublishers，Philadelphia，PA；1996)以及D.C.Gajdusek，″传染性淀粉样蛋白作为可传染的大脑淀粉样蛋白变性病的亚急性海绵状脑病″《田间病毒学》2851-2900(1996)中有所描述。这些疾病有许多可能由朊病毒(一种感染性蛋白质)介导。见S.B.Prusiner，″朊病毒″《田间病毒学》2901-50(1996)及其所附参考文献。Online Mendelian Inheritancein Man(OMIM)″www.ncbi.nlm.nih.gov/htbin-post/omim/dispmin″上描述了淀粉样蛋白变性病的遗传形式。上述内容均纳入本文作为参考。很少有经临床证实患淀粉样变性的患者能自发地完全恢复，这可能是因为淀粉样蛋白变性病原纤维本身是非免疫原性的。已经研究了各种治疗淀粉样变性的方法，例如高剂量化疗、类固醇、碘化阿霉素、以及干细胞替代治疗。然而，药物治疗(用秋水仙碱)只在一种淀粉样蛋白疾病(即家族性地中海淀粉样变性)中有效。用单克隆抗体(mAb，单抗)诱导或调节免疫学除去未被识别的物质的方法是已知的。例如，单抗已经成功用于治疗非霍奇金(Hodgkin′s)淋巴瘤和乳房癌。以前，各种研究已经鉴定出与淀粉样原纤维或淀粉样蛋白结合的抗体。例如参见，美国专利No.5,714,471；5,693,478；5,688,651；5,652,092；5,593,846；5,536,640；5,385,915；5,348,963；5,270,165；5,262,332；5,262,303；5,164,295和4,782,014。另外，几份出版物已经提出，抗淀粉样蛋白抗体可用来研究β-淀粉样变性的进展以及各种治疗选项。例如参见，Bellottii，等人，Scand.J.Immunol.(1992)36(4)607-615；Bellotti等人，Ren.Fail.(1993)15(3)365-371；Walker等人，J.Neuropathol.Exp.Neurol.(1994)53(4)377-383；和Bickel等人，Bioconjug.Chem.(1994)5(2)119-125。然而，没有一种治疗性抗体显示出能停止或逆转患者体内的淀粉样原纤维沉积。因此，需要有一种用含有能结合淀粉样原纤维的抗体的抗体制剂，治疗淀粉样蛋白变性病的方法。专利技术概述本专利技术者已经发现了治疗淀粉样蛋白相关疾病和病情的新方法。这些方法利用了针对淀粉样蛋白的蛋白组分的单抗的调理作用。本专利技术包括一种治疗淀粉样蛋白相关疾病患者的方法，该方法包括下列步骤给予该患者治疗有效剂量的至少一种免疫球蛋白多肽或其片段，以及药学上可接受的载体；其中免疫球蛋白多肽或其片段可以是能与人淀粉样原纤维结合的基本纯的免疫球蛋白多肽，其中多肽的结合调理了淀粉样原纤维。具体地说，本专利技术涉及下文所述的三种单抗的任一种或其组合的用途。这些抗体具有通常的抗淀粉样蛋白结合性能，并且提供了激活患者自身细胞免疫清除机制的非固有的调理试剂。附图简述附图说明图1A和1B。图1A和1B是Balb/c小鼠在注射淀粉样蛋白后立即拍摄的(1A)以及注射14天后拍摄的(1B)重显照片。注射部位被刮过，以便更好地说明注射淀粉样蛋白物质所引起的“隆起”。图2A-2B。图2A和2B是人中性粒细胞粘附于体外受到调理的人淀粉样蛋白的重显照片。图3A-3D。图3A-3D是免疫组织化学染色的充满淀粉样蛋白的组织样品的重显照片(放大20倍)。图3A是用刚果红染色的κ1淀粉样变性患者的组织样品；在偏振光下观察，淀粉样蛋白沉积物呈蓝绿色颗粒。图3B是用抗κI(57-18-H12)单抗标记后的碱性磷酸酶染色的组织样品。图3C是如图3B所述那样染色的组织样品，只是用抗κIV(11-1F4)单抗。图3D是如图3B所述那样染色的组织样品，只是采用抗λVIII(31-8C7)单抗。图4。图4是显示与植入Balb/c小鼠中的人淀粉样蛋白结合的荧光素化(FITC)κ4单抗(FITC)的重显照片。将该单抗注入小鼠大腿。注射后72小时，切下淀粉样瘤，用落射荧光显微镜(放大20倍)观察。专利技术实施方式综述本专利技术利用免疫球蛋白多肽来调节和增强宿主或患者体内淀粉样原纤维不良沉积物的降解和清除。预计本专利技术例如可用来治疗患有以淀粉样原纤维不良沉积无为特征的疾病或病情的病人。不希望受任何特定的作用机理的约束，认为本专利技术的免疫球蛋白多肽的给予调理了淀粉样变性患者体内沉积的淀粉样原纤维，从而有助于患者靠患者自身的免疫系统除去这些淀粉样原纤维。据认为，如果没有这种治疗性干预，单靠患者免疫系统不能除去淀粉样原纤维所调节的病情中的淀粉样原纤维，推测是因为淀粉样原纤维本身相对没有免疫原性。为了治疗淀粉样变性患者，将治疗有效量的本专利技术免疫球蛋白多肽或其片段与药学上可接受的载体或赋形剂一同给予。在这些免疫球蛋白多肽与淀粉样原纤维不良沉积物结合或粘附时，认为后者受到了调理。本专利技术组合物的单次或多次给予可根据剂量进行，并可用本领域技术人员已知的适用于给予其它治疗性抗体产品的给药程序进行。这些参数可由治疗具体患者的医师来选择和/或优选。较佳的，治疗有效量的本专利技术药物制剂应输送一定量的抗淀粉样蛋白的免疫球蛋白多肽，该用量应足以基本上抑制淀粉样原纤维的不良沉积或基本上抑本文档来自技高网...

【技术保护点】
至少一种免疫球蛋白多肽或其片段在制备用来治疗淀粉样沉积疾病患者的药物中的用途，其中所述免疫球蛋白多肽或其片段与淀粉样原纤维或其组件或前体结合。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：A所罗门，R赫尼西，JS沃尔，
申请(专利权)人：田纳西州立大学研究基金会，
类型：发明
国别省市：US[美国]