乙型肝炎病毒（HBV）慢性化小鼠模型的建立方法及用途技术

本发明专利技术属生物医药和基因工程领域，涉及一种乙型肝炎病毒(HBV)慢性化小鼠模型的建立方法与建立该模型所使用的HBV毒株。所述HBV毒株为临床分离株(GenBank No.AF100309.1)，其1.3拷贝基因组(核苷酸,nucleotide，nt955‑3215/1‑1950)克隆入通用质粒载体pUC18后命名为BPS，通过尾静脉高压水动力注射法将BPS置入BALB/c或C57BL/6小鼠后，血清中能够持续检测到HBV的3个主要指标：表面抗原HBsAg、e抗原HBeAg和核酸HBV DNA，且上述指标持续阳性时间可达33周，置入后33周时阳性率可达50％。所建立的模型可用于HBV持续性感染机制的研究，并为抗HBV药物筛选及评估提供重要的动物模型。

Hepatitis B virus (HBV) chronic mouse model establishment method and Application

The invention belongs to the field of biotechnology and genetic engineering, relates to a hepatitis B virus (HBV) chronic mouse model establishment method and the establishment of the model used by HBV strain. The HBV strains were clinical isolates (GenBank No.AF100309.1), the 1.3 copies (nucleotide, genome nucleotide, NT955 3215/1 1950) was cloned into plasmid pUC18 after general named BPS by tail vein hydrodynamic injection of BPS in BALB/c or C57BL/6 mice, to 3 main indexes of continuous detection HBV in serum: surface antigen HBsAg, e antigen and HBeAg HBV DNA nucleic acid, and these indicators continued positive time up to 33 weeks after implantation for 33 weeks when the positive rate of up to 50%. The established model can be used to study the mechanism of persistent infection of HBV and provide an important animal model for the screening and evaluation of anti HBV drugs.

【技术实现步骤摘要】
乙型肝炎病毒(HBV)慢性化小鼠模型的建立方法及用途
本专利技术属生物医药和基因工程领域，具体涉及一种乙型肝炎病毒(HBV)慢性化小鼠模型的建立方法及其在抗HBV药物筛选和药物安全性评价等过程中的应用。
技术介绍
研究公开了由HBV感染引起的乙型肝炎以肝脏炎性病变为主，并可并发多器官损害。HBV感染慢性化为慢性乙型肝炎(CHB)后，还可引发肝纤维化、肝硬化、原发性肝细胞癌(HCC)和肝衰竭，导致死亡。据报道，近年来，随着HBV疫苗的成熟和预防接种的推广，新发HBV感染率显著下降，但全球仍然有3.5亿左右HBV慢性携带者，每年约1百万患者死于HBV感染相关疾病(Lavanchy2004)；中国属HBV感染高发区，约有1.2亿慢性携带者和3000万慢性乙型肝炎患者(Liu，Sietal.2002)。研究显示，乙型肝炎病毒(HBV)易感宿主仅限于人及黑猩猩。由于动物伦理、经济成本等条件的限制，目前尚无常规实验动物模型能够有效模拟HBV感染、致病等过程。YangPL等的工作(YangPLetal.2002)表明，将具有启动病毒转录复制能力的乙肝病毒1.3倍基因组(1.3mer)插入质粒载体后本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种乙型肝炎病毒(HBV)慢性化小鼠模型的建立方法，其特征在于，该方法包括，采用能产生HBV持续性表达复制的HBV表达质粒BPS，通过尾静脉高压水动力方法置入实验小鼠，建立HBV慢性化模型；所述的HBV质粒BPS其包含1.3拷贝(核苷酸,nucleotide，nt955‑3215/1‑1950)的临床病毒株AF100309.1和质粒载体pUC18；所述的HBV表达质粒BPS，通过基因工程方法将其中1.3倍HBV基因组改造成其它可启动病毒转录复制的形式，例如1.1或1.2倍HBV基因组；所述的表达质粒BPS，通过基因工程方法可将其中1.3倍或1.1、1.2倍HBV基因组克隆至pUC18以外的其它...

【技术特征摘要】
1.一种乙型肝炎病毒(HBV)慢性化小鼠模型的建立方法，其特征在于，该方法包括，采用能产生HBV持续性表达复制的HBV表达质粒BPS，通过尾静脉高压水动力方法置入实验小鼠，建立HBV慢性化模型；所述的HBV质粒BPS其包含1.3拷贝(核苷酸,nucleotide，nt955-3215/1-1950)的临床病毒株AF100309.1和质粒载体pUC18；所述的HBV表达质粒BPS，通过基因工程方法将其中1.3倍HBV基因组改造成其它可启动病毒转录复制的形式，例如1.1或1.2倍HBV基因组；所述的表达质粒BPS，通过基因工程方法可将其中1.3倍或1.1、1.2倍HBV基因组克隆至pUC18以外的其它质粒中；建立的HBV慢性化小鼠模型包括基于BALB/c和C57BL/6品系的...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢幼华，刘晶，沈忠良，杨慧娟，潘少坤，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：上海,31