重组蛋白质变异体制造技术

重组蛋白质变异体，其具有诱导针对天然存在的过敏原的保护性免疫应答的能力，其中的蛋白质变异体　　　　●是支架蛋白的变异体，所述的支架蛋白具有与天然存在的过敏原结构相似的三维折叠模式；　　　　●与支架蛋白相比，所述的重组蛋白变异体包含两个或者更多一级突变，所述突变之间至少间隔一个未突变的氨基酸残基，每个一级突变向支架蛋白中引入至少一个与天然存在的过敏原中对应位置上的氨基酸残基相同或者同源的氨基酸残基；　　　　●与支架蛋白相比，所述的重组蛋白变异体对天然存在的过敏原的特异性ＩｇＥ抗体的亲和性和／或结合能力有所提高。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及的是免疫疗法，特别涉及的是应用新型重组蛋白的过敏疫苗接种策略。本专利技术还涉及一种包含新型重组蛋白变异体混合物的组合物。
技术介绍
过敏是适应西方生活方式的国家中存在的一种主要健康问题。而且，在这些国家中过敏性疾病的流行正在增加。尽管一般认为过敏并不是危及生命的疾病，但是哮喘每年导致大量的死亡。在西方，十几岁的青少年中过敏的流行率高达非同寻常的30％，这导致生活质量的显著下降、工作时间的显著减少以及钱财的大量损失，这些已经有足够的理由使得过敏被列为西方世界的一种主要健康问题。过敏是一种复杂的疾病。有许多因素影响这一致敏化事件。在这些因素中有个体的易感性，它由现在还不能充分搞清楚的一些基因之间的相互作用决定。另外一个重要因素是过敏原的暴露超过了特定阈值。有几个环境因素在这一致敏化过程中可能是重要的，包括污染、儿童时期的感染、寄生虫感染、肠道微生物等等。一旦一个个体被致敏化，且过敏免疫应答被建立，则仅仅很少量的过敏原就会被有效地转化为过敏症状。过敏性疾病的天然进程通常伴随着两个水平上的病情加剧。首先是症状和疾病严重性的发展以及疾病的发展，例如从花粉热到哮喘。第二是经常出现刺激性过敏原的扩散，导致过敏性多反应性。慢性发炎一般使得粘膜抵御机制出现减弱，导致非特异的刺激以及最终粘膜组织的破坏。婴儿可能主要对食物过敏，例如牛奶，导致湿疹或者胃肠道不适，但是通常他们的这些症状会自然消失。这些婴儿在他们生命后期中有出现吸入过敏的风险。最重要的过敏原来源是我们呼吸的空气中最为广布的具有特定大小的颗粒。这些过敏原来源非常普遍，包括草的花粉、屋室尘螨的粪便颗粒、这二者是大约50％过敏的原因。具有全球重要性的还有动物的毛屑，例如猫和狗的毛屑、其他花粉例如艾属的花粉，以及微型真菌例如交链孢属真菌。在不同区域过敏原有其他占据优势的花粉，例如在北欧和中欧的白桦花粉、美国东部和中部的豚草以及日本的雪松花粉。昆虫例如蜜蜂和黄蜂的毒液以及食物分别构成2％的过敏发病的原因。所有IgE介导的免疫反应针对的都是蛋白质。近年来现代分子生物学和结构生物学技术的应用大大促进了对于过敏原分子的研究。这些研究不能证明所有的过敏原存在共同的结构基元或者生物学功能。必须预见的是任何蛋白质都是潜在的过敏原，而大多数过敏原，即主要的过敏原是悬浮于空气中的粒子上面数量最多的蛋白质，粒子的大小有助于过敏原向免疫系统的呈递。过敏，即I型超敏，是由对外源的非病原物质产生的不适当免疫反应所造成的。过敏的重要临床表现包括哮喘、花粉热、湿疹以及胃肠道不适。过敏反应十分迅速，在接触侵入的过敏原20分钟后达到高峰，8-24小时之后通常有一个晚期反应。而且，就一个特定个体对一种特定过敏原致敏化而言，过敏反应是特异的，而个体对于其他已知导致过敏疾病的物质不一定表现出过敏反应。过敏表型的突出特征是靶器官的粘膜出现明显的炎症，在循环中以及在肥大细胞和嗜碱性细胞表面出现IgE类型的过敏原特异的抗体。当免疫原特异的IgE抗体与肥大细胞和嗜碱性细胞表面上高度亲和性的IgE特异受体相结合时，外源免疫原与IgE抗体发生反应即引发过敏攻击。肥大细胞和嗜碱性细胞含有预先形成的递质，即组胺、类胰蛋白酶以及其他物质，在两个或更多结合受体的IgE抗体交联时它们被释放。IgE抗体通过同时结合一个过敏原分子而被交联。因此断定只有一个抗体结合表位的外源物质不会引发过敏反应。在肥大细胞表面结合受体的IgE的交联导致信号分子的释放，这些信号分子的作用是吸引嗜曙红细胞、过敏原特异的T细胞以及其他类型的细胞到达过敏应答的位置。这些细胞与过敏原、IgE以及效应器细胞相互作用导致在接触过敏原之后12-24小时症状突现重新开始。过敏疾病的处理包括诊断和治疗，包括预防性治疗。过敏的诊断涉及过敏原特异的IgE的证明以及过敏原来源的确定。很多情况下仔细考察既往病史对于过敏的诊断和刺激性过敏原的来源物质可能就足够了。但是常见的情况是由客观的测量来支持对过敏的诊断，例如皮肤穿刺测验、血液试验或者激发试验。血液试验的原则是使用一系列的过敏原来源证明特异IgE的存在。有三种主要类型的治疗性选择方案。第一种是避免接触过敏原或者减少接触。尽管避免接触过敏原是显而易见的，例如对于食物过敏原，但是这可能是困难或者昂贵的，如对于屋室尘螨过敏原；或者是不可能的，如对于花粉过敏原。第二种并且是最广泛使用的治疗选择方案是对症开药。对症的药物是安全和有效的，但是它们并不能改变疾病的天然原因，也不能控制疾病的扩散。第三种治疗选择方案是特异性过敏疫苗接种，即特异性的免疫治疗方法，其在大多数情况中减少或者缓解由于特定过敏原引起的过敏性症状。特异性过敏疫苗接种是过敏性疾病的非正式治疗。它干扰了基本的免疫学机制，使得患者的免疫状况得到持续的改善。因此，特异性过敏疫苗接种的保护性作用延续到治疗阶段以外，这与对症开药治疗形成对比。一些接受接种的患者被治愈，此外多数患者的疾病严重程度得到减轻，或者至少病情停止加重。因此，特异性过敏疫苗接种具有保护作用，降低花粉热发展为哮喘的风险以及降低出现新过敏性的风险。尽管特异性过敏疫苗接种具有优点，但是其并未被广泛使用，主要有两个原因。一个原因是传统疫苗接种程序不方便，该程序要求几个月中反复进行接种。另一个最重要的原因是过敏性副反应的风险。普通的针对感染性因子的疫苗接种使用一次或者几次高剂量免疫接种就可以有效进行了。而这种策略不能用于过敏疫苗接种，因为接种时已经出现病理性免疫应答。因此采用长时间内多次免疫进行特异性过敏疫苗接种。接种过程分为两个阶段，剂量增加阶段和维持阶段。在剂量增加阶段使用增加的剂量，通常是16周，从很小的剂量开始。达到推荐的维持剂量时，在维持阶段使用此维持剂量，通常是每六周进行注射。由于有发生过敏性副反应的风险，每次注射之后患者必须接受20-60分钟的医疗看护，过敏性副反应通常可能是危及生命的。此外，诊所必须配备应对紧急情况下治疗的设施。毫无疑问排除疫苗中过敏性副反应的风险有助于更为一般的使用，可能甚至使得在家中进行自我疫苗接种成为可能。成功过敏性疫苗接种背后的免疫学机制还没有详细理解。特异的免疫应答，例如针对某种病原产生抗体，被认为是一种适应性的免疫应答。这种应答可以与先天免疫应答区别开来，先天免疫应答是针对病原物的非特异反应。过敏疫苗一定要解决适应性免疫应答的问题，这种免疫应答包括具有抗原特异性的细胞和分子，例如T细胞和产生抗体的B细胞。如果没有具有相应特异性的T细胞的帮助，B细胞不能成熟为产生抗体的细胞。参与激发过敏性免疫应答的T细胞主要是Th2类型的。Th1和Th2细胞之间新平衡的建立被认为是有益的并且对于特异性过敏疫苗接种的免疫学机制是重要的。这种平衡的建立是由于Th2细胞的减少，还是由于Th2细胞向Th1细胞的转变，或者是由于Th1细胞的上调，还存在争议。近来提出调控性T细胞对于过敏疫苗接种的机制是重要的。根据该模式调控性T细胞，即Th3或者Th1细胞对具有相应抗原特异性的Th1和Th2细胞进行下调控。尽管有这些不明确性，但是一般认为活性的疫苗必须具有激发过敏原特异的T细胞(优选是Th1细胞)的能力。关于在特异性过敏疫苗接种期间的过敏原特异抗体，有一个重要的观察结果是尽管有临床本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：J·霍尔姆，J·N·拉森，
申请(专利权)人：阿尔克阿贝洛有限公司，
类型：发明
国别省市：