一种隐孔菌发酵工艺的质量控制方法技术

本发明专利技术提出了一种质量控制方法，可以用于隐孔菌发酵过程及发酵终产品质量控制。方法的主要特征是取隐孔菌发酵液或者发酵终产物隐孔菌菌丝体粉、隐孔菌发酵液粉，隐孔菌发酵物粉中的一种，加水适量提取，分离得到提取液，加乙醇至８０％，分离得到粗多糖。分析粗多糖的单糖种类和比例，以此判断发酵的终点和鉴别终产品的质量。本方法的专一性强，能较好的体现出隐孔菌发酵过程中糖类物质组成的变化，终产品中多糖的单糖组成和同类其他发酵产品相比有比较显著的区别，为隐孔菌发酵产物的质量控制提供了方法和依据。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种隐孔菌发酵工艺的质量控制方法，其特征在于：量取发酵中间产物２００ｍｌ，过滤，得到菌丝体和发酵液，将发酵液浓缩得到浓缩液２０ｍｌ，冷却到室温，浓缩液加无水乙醇８０ｍｌ，边加边搅拌，放置１小时待沉淀完全后过滤，沉淀干燥后即得粗多糖Ａ；称取隐孔菌菌丝体粉、隐孔菌发酵液粉和隐孔菌发酵物粉各５ｇ，分别加水４０ｍｌ超声提取１小时，３５００ｒ／ｍｉｎ离心１０分钟，上清浓缩得到１０ｍｌ浓缩液，冷却到室温，加无水乙醇４０ｍｌ，边加边搅拌，放置１小时待沉淀完全后过滤，沉淀干燥后即得粗多糖Ｂ、Ｃ和Ｄ，取粗多糖Ａ、Ｂ、Ｃ和Ｄ各约０．０２ｇ，分别加入２ｍｏｌ／Ｌ的Ｈ↓［２］ＳＯ↓［４］溶液２ｍｌ，密封，混匀溶解，于１２５℃反应１小时，放至室温，３５００ｒ／ｍｉｎ离心１０分钟，上清用４ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＯＨ水溶液调ｐＨ至７．０，量取此水解液１．０ｍｌ于水解管中，加入０．３ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ水溶液和０．５ｍｏｌ／Ｌ１－苯基－３－甲基－５－吡唑啉酮的甲醇溶液各１．０ｍｌ，混匀，密封，于７０℃水浴中反应３０ｍｉｎ，取出放冷至室温，用盐酸调ｐＨ至７．０，加入２ｍｌ氯仿萃取，反复３次，水层用０．４５ｕｍ膜滤过，将过膜后的滤液注入液相色谱仪分析，对比标准品色谱图判断单糖的种类和比例；液相条件为：紫外检测器检测波长２５０ｎｍ，ＳＢ－Ｃ８反相色谱柱，流动相为ｐＨ５．８的磷酸盐缓冲液和乙睛以体积比８０∶２０组成，流速１ｍｌ／ｍｉｎ；多糖Ａ的单糖组成可以作为发酵控制指标；多糖Ｂ、多糖Ｃ和多糖Ｄ的单糖组成可以分别作为隐孔菌菌丝体粉、隐孔菌发酵液粉和隐孔菌发酵物粉的质量控制指标。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李艳伟，柴黎燕，欧阳小军，张萍，柯传奎，杨勇杰，
申请(专利权)人：柯传奎，杨勇杰，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]