本发明专利技术涉及一种miRNA抑制子在制备防治心肌梗死药物中的应用。本发明专利技术针对心肌梗死首次利用miRNA‑9抑制子，参见实施例，miR‑9抑制子经心肌直接注射可显著降低心脏miR‑9表达量，对急性心梗周边区注射miR‑9抑制子，能有效改善梗死后心功能、降低心梗面积、梗死周边区炎症水平和ROS堆积程度，可用于心肌梗死的预防和治疗，取得了意想不到的技术效果。
The application of miRNA suppressor in the preparation of drugs for the prevention and treatment of myocardial infarction
The present invention relates to the application of a miRNA suppressor in the preparation of drugs for the prevention and treatment of myocardial infarction. The present invention for myocardial infarction for the first time using miRNA 9 suppressors, see examples, miR 9 repressor by direct myocardial injection can significantly reduce the expression of cardiac miR 9, the surrounding area of acute myocardial infarction injection miR 9 inhibitor, can effectively improve heart function, reduce myocardial infarction area and the infarcted area the level of inflammation and ROS accumulation degree, can be used for the prevention and treatment of myocardial infarction, made an unexpected technical effect.
【技术实现步骤摘要】
miRNA抑制子在制备防治心肌梗死药物中的应用
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种miRNA抑制子在制备防治心肌梗死药物中的应用。
技术介绍
心肌梗死是一种严重危害人类健康的心血管疾病，随着我国人民生活水平的不断提高，缺血性心肌梗死的发病率也在不断上升。缺血性心肌梗死会导致心肌细胞坏死和瘢痕形成，进而影响心脏功能，特别是冠状动脉粥样硬化性心脏病的最严重临床类型一一急性心肌梗死(AcuteMyocardialInfarction，AMI)。目前药物或器械治疗大多只能缓解症状，但却不能逆转心脏组织损伤。心脏移植虽能彻底改善心脏状态，但因供体来源稀缺、免疫排斥以及昂贵的治疗费用等因素，在临床上很难广泛应用。随着人类基因组计划完成和基因芯片技术的发展，许多单基因疾病的致病基因被发现，并应用到疾病的诊断与治疗当中。而AMI作为一种受多种遗传与环境因素影响的疾病，遗传学在AMI发病中的作用仍未明确。具体是哪些基因，通过何种细胞过程，有哪些通路参与了AMI过程尚未明确。MicroRNA（miRNA）是一类高度保守的、内源性、长度约为22个核苷酸的非编码小RNA，主要通过与靶基因mRNA3’非编码区域（3’untranslationalregion，3’UTR）完全或不完全互补配对来抑制mRNA翻译或促进其降解从而调控靶基因表达。目前已经发现超过1000个miRNA，每个miRNA参与靶向数百个基因；与此同时，一个基因也受到多个miRNA调节，因此，miRNA-mRNA构成一个复杂的调控模式网。miRNA参与心血管疾病的多种病理生理过程，包括心肌损伤、心室重构和心肌再生等。目前，miRNA的研究已经成为心血管领域的研究热点。目前研究发现许多miRNA通过调控凋亡相关靶蛋白的表达而参与细胞凋亡的发生，这些miRNA有促凋亡的，也有抑凋亡的。
技术实现思路
本专利技术公开了一种新的预防和治疗心肌梗死的药物，能有效改善梗死后心功能、降低心梗面积、梗死周边区炎症水平和ROS堆积程度，具有极其重要的意义和应用前景。本专利技术采用如下技术方案：miRNA抑制子在制备防治心肌梗死药物中的应用；所述miRNA抑制子能够降低心脏miRNA表达量。进一步的，本专利技术的miRNA抑制子为miR-9（miRNA-9）抑制子；进一步优选的，所述miRNA抑制子为包含以下SEQIDNO：1序列的核酸或者其生物活性功能片段或变体：SEQIDNO：1：UCAUACAGCUAGAUAACCAAAGA目前关于miR-9的报道主要集中于肿瘤、恶性血液系统和神经系统等疾病；最近有报道称miR-9通过直接靶向降低myocardin表达而抑制心肌肥厚并改善心脏功能，myocardin生理条件下仅少量表达，但在心肌肥厚时被强烈激活；另外，miR-9也可以通过靶向ELAVL1抑制高糖诱导的心肌细胞死亡。到目前为止，还没有任何报道提及miR-9与心肌梗死的关系。本专利技术针对心肌梗死首次利用miR-9抑制子，参见实施例，miR-9抑制子经心肌直接注射可显著降低心脏miR-9表达量，对急性心梗周边区注射miR-9抑制子，能有效改善梗死后心功能、降低心梗面积、梗死周边区炎症水平和ROS堆积程度，可用于心肌梗死的预防和治疗，取得了意想不到的技术效果。本专利技术还公开了一种防治心肌梗死的药物，包括miRNA抑制子，优选miRNA抑制子为miR-9抑制子；进一步优选的，所述miRNA抑制子为包含以下SEQIDNO：1序列的核酸或者其生物活性功能片段或变体：SEQIDNO：1：UCAUACAGCUAGAUAACCAAAGA进一步的，本专利技术的防治心肌梗死的药物，还包括药学上可接受的病毒、载体或辅料；所述药学上可接受的载体或辅料选自壳聚糖、胆固醇、脂质体、纳米颗粒、分散介质、转染试剂等，其中纳米颗粒是一种人工制造的、大小不超过100纳米的微型颗粒，可能是乳胶体、聚合物、陶瓷颗粒、金属颗粒或者碳颗粒，病毒可以为腺相关病毒等。进一步的，本专利技术药物的给药方式为口服给药或注射给药；比如，所述注射给药方式选自静脉注射、肌肉注射、冠状动脉内注射或者心肌注射。本专利技术还公开了一种防治心肌梗死的药物的制备方法，将miRNA抑制子与其他物质组合，得到防治心肌梗死的药物；所述其他物质包括药学上可接受的病毒、载体或辅料；所述药学上可接受的载体或辅料选自壳聚糖、胆固醇、脂质体、纳米颗粒、分散介质、转染试剂等，其中纳米颗粒是一种人工制造的、大小不超过100纳米的微型颗粒，可能是乳胶体、聚合物、陶瓷颗粒、金属颗粒或者碳颗粒，病毒可以为腺相关病毒等，分散介质可以为缓冲液等。优选miRNA抑制子为miR-9抑制子；进一步优选的，所述miRNA抑制子为包含以下SEQIDNO：1序列的核酸或者其生物活性功能片段或变体：SEQIDNO：1：UCAUACAGCUAGAUAACCAAAGA本专利技术进一步公开了上述防治心肌梗死的药物在制备用于防治心肌梗死药物中的应用。进一步的，本专利技术还公开了检测miR-9的制剂在制备诊断心肌梗死试剂中的应用，检测miR-9的制剂为现有产品，比如QPCR检测相关制剂。本专利技术首次公开了miR-9与心肌梗死的关系并提出来新的防治方案，根据实施例的记载，QPCR检测心肌miR-9表达水平，给予miR-9抑制子降低心脏miR-9含量；心梗术后7天检测心功能，miR-9抑制子显著改善心梗后心功能，射血分数和短轴缩短率均有显著改善；以Masson染色观察各组心梗术后7天梗死面积，发现miR-9抑制子组的心梗面积显著低于对照组，细胞间隙的纤维化程度表现出相同趋势；可以看出，miR-9抑制子对于心肌梗死具有有效的预防和治疗价值。因此，本专利技术提供了将miR-9抑制子与适当载体或辅料如壳聚糖、胆固醇、脂质体、纳米颗粒等包装形成药物，通过口服、静脉注射、肌肉注射、冠状动脉内注射或直接心肌注射的方式，用于预防和/或治疗心肌梗死的发生。附图说明图1为心肌注射miR-9抑制子显著降低miR-9转录表达；图2为miR-9抑制子改善心梗后心功能（M型超声图）；图3为miR-9抑制子促进心梗后EF和FS指标恢复；图4为miR-9抑制子缩小心梗面积；图5为miR-9抑制子减弱细胞间隙纤维化程度；图6为miR-9抑制子降低心梗周边区炎症水平；图7为miR-9抑制子缓解心梗周边区ROS堆积；图8为miR-9抑制子减轻缺血缺氧处理H9c2细胞的ROS堆积；图9为miR-9抑制子促进缺血缺氧处理H9c2细胞的生存；图10为miR-9类似物促进缺血缺氧处理H9c2细胞凋亡。具体实施方式以下参照具体的实施例以及附图来说明本专利技术。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅用于说明本专利技术，其不以任何方式限制本专利技术的范围。所使用的主要材料和来源分别如下：C57BL/6J小鼠（昭衍（苏州）新药研究中心提供，此实验由苏州大学伦理委员会批准；小动物呼吸机（上海奥尔科特生物科技有限公司，上海）；水合氯醛（苏州大学附属第一医院自制，苏州）；手术器械（六六视觉公司，苏州）；缝合针线（上海浦东金环医疗用品有限公司，上海）；转染试剂DharmafectDuo（Thermo公司，美国）；实时荧光定量PCR仪（ABISteponePlus）；超微量分光光度计（Nanodrop200本文档来自技高网...
【技术保护点】
miRNA抑制子在制备防治心肌梗死药物中的应用。
【技术特征摘要】
1.miRNA抑制子在制备防治心肌梗死药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述miRNA抑制子为miR-9抑制子。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述miR-9抑制子为包含SEQIDNO：1序列的核酸或者其生物活性功能片段或变体；SEQIDNO：1：UCAUACAGCUAGAUAACCAAAGA。4.一种防治心肌梗死的药物，包括miRNA抑制子；还包括药学上可接受的病毒、载体或辅料。5.根据权利要求4所述防治心肌梗死的药物，其特征在于，所述miRNA抑制子为miR-9抑制子。6.根据权利要求5所述防治心肌梗死的药物，其特征在于，所述miR-9抑制子为包含SEQIDNO：1序列的核酸或者...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈维倩，沈振亚，肖亦敏，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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