【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种糜蛋白酶的亲和层析纯化方法，其特征在于该纯化的方法采用亲和层析技术，利用抑肽酶与胰蛋白酶、糜蛋白酶和其他蛋白水解酶亲和性的差异，使用化学反应使抑肽酶作为配基与琼酯糖４Ｂ结合，将胰蛋白酶去除；包括下列步骤：１）糜蛋白酶原活化液制备 ：糜蛋白酶原水溶液配制成硫酸铵饱和溶液，调节ｐＨ５．０，结晶，然后再重复结晶４次得糜蛋白酶原结晶，加入硫酸溶液，加第四次结晶１倍量ｖ／ｗ的磷酸缓冲液，调节ｐＨ７．６，加入胰蛋白酶，５℃冷却活化后制得糜蛋白酶原活化液；２）糜蛋 白酶原活化液纯化：上述糜蛋白酶原活化液过滤，滤液调节ｐＨ５．０，进入亲和层析柱上样，上样结束后，用半个亲和层析柱床体积０．０１ＭｐＨ５．０磷酸缓冲液洗涤，合并上样液和洗涤液，过滤取滤液冻干得糜蛋白酶纯化结晶。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：章海峰，
申请(专利权)人：上海第一生化药业有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]
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