山茱萸核糖体DNA的ITS片段及其制备方法技术

技术编号:1709880 阅读:281 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及山茱萸核糖体DNA的ITS片段及其制备方法,可有效解决山茱萸的品种鉴定、品种改良、育种,以及种质资源的开发利用问题,ITS片段由三部分组成,即ITS1,5.8S,ITS2,制备方法是:取山茱萸植物叶片研碎,加入PVP粉末研成细粉,将细粉置于提取缓冲液中,离心,弃去上清夜,加入用Vc+2×CTAB制成的抽提液以及β-巯基乙醇,混匀,加入由等体积的饱和酚-氯仿-异戊醇制成的溶液处理2次,除去杂质,离心,取上清液,加入异丙醇,收集沉淀物,抽干乙醇,得DNA物质,再利用设计的引物对DNA物质进行PCR扩增、纯化,对纯化后的PCR产物测序得ITS片段,方法简单、科学,经济和社会效益巨大。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种山茱萸核糖体DNA的ITS片段,其特征在于,该ITS片段是由ITS1、5.8S、ITS2山苵萸核糖体DNA的三部分组成,其中,ITS1为253bp,5.8S为156bp,ITS2为273bp,总共682bp,具体是:    1  tcgaaacctg  cacagcagaa  cgacccgcga  acgtgttttt  tacgacggcg  gcggggcgct、    61  ctcgcgggtg  ccccggcgcc  atcagggtga  gcgcgtgccg  atcccttcgc  ggggggaggc、    121  gggcgctttc  ccctgcaaaa  ataacgaacc  ccggcgcgaa  ccgcgccaag  gaacacgaac、    181  gaaagagcga  gcccgcgaag  ccccgtccgc  gggcgcgatc  gcgggccggc  atcttccttt、    241  atcgaaatcg  aacgactctc  gacaacggat  atctcggctc  tcgcatcgat  gaagaacgta、    301  gtgaaatgcg  atacttggtg  tgaattgcag  aatcccgtga  accatcgagt  ctttgaacgc、    361  aagttgcgcc  cgaagccgtc  aggccgaggg  cacgtctgcc  tgggcgtctc  acatcgcgtc、    421  gcccccctca  ccaccccacc  acacacttcg  gtgacggtgg  gcggggggcg  gacagtggcc、    481  ccccgtgcgc  tcgctcacag  cacagtgtgc  ggtcggccga  aaaaacgagt  cgccggcgac、    541  ggacgtcacg  acaagtggtg  gttgagacgg  aaccttaagc  gtcctgtcgt  gcgtgccgca、    601  gtcgccagcg  cgatgctcgc  gcgaccctta  acgcgccgtc  accgacggtg  cctcgaccgc、    661  gaccccaggt  caggcgggac  ta。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:陈随清潘成学
申请(专利权)人:河南中医学院
类型:发明
国别省市:41[中国|河南]

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