糖皮质激素受体表达的调节制造技术

提供了用于调节糖皮质激素受体表达的化合物、组合物和方法。组合物包括具有特别的体内性质，靶向编码糖皮质激素受体的核酸的反义化合物，特别是反义寡核苷酸。提供了使用这些化合物用于调节糖皮质激素受体表达和用于治疗疾病的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本文公开了用于调节糖皮质激素受体在细胞、组织或动物中的表达 的化合物、组合物和方法。
技术介绍
因为增加的糖异生被视为糖尿病中增加的葡萄糖生产的主要来源， 所以用于抑制肝葡萄糖生成的许多治疗靶已得到研究。由于糖皮质激素 受体(也称为细胞核受体亚家族3，组C,成员1; NR3C1; GCCR; GCR; GRL;糖皮质激素受体，淋巴细胞)拮抗剂在动物冲莫型中改善糖尿病的 能力，此类化合物属于正在探究的潜在疗法。然而，存在糖皮质激素受 体拮抗剂的有害全身效应，包括HPA轴的活化(Link, Curr Opin Investig Drugs, 2003， 4， 421-429)。增加的HPA轴活性与免疫相关的炎性作 用抑制相关，这可以增加对于传染剂和赘生物的敏感性。通过HPA轴 或其耙组织中的缺陷与免疫介导的炎症抑制相关的状况包括库欣氏综 合征、慢性应激、慢性酒精中毒和忧郁型抑郁症(Chrousos,N Engl J Med, 1995, 332， 1351-1362 )。因此，开发肝和脂肪特异性糖皮质激素受体 拮抗剂是很有价值的。专利技术概述本专利技术涉及靶向编码GCCR的核酸分子且可与编码GCCR的核酸 分子杂交的寡聚化合物，所述寡聚化合物调节GCCR的表达。本文提供 了被称为"缺口聚体(gapmers)"的嵌合寡核苷酸，所述嵌合寡核苷 酸包含在5，和3'末端中的每一个上与"翼"侧接的脱氧核苷酸区域或"缺 口"，所述"翼"包含1 - 4个2，-0-甲氧乙基核苷酸。本专利技术的寡核苷酸的脱氧核苷酸区域包含超过IO个脱氧核苷酸，因此与包含IO个脱氧核苷酸的缺口区域的嵌合化合物，例如美国公开US2005-0164271 (所述 专利整体引入本文作为参考)中例示的化合物比较，本专利技术的缺口聚体 是"缺口加宽的，，。在某些实施方案中，与具有相同序列但包含在5， 和3，末端上都与5个2，-0- (2-曱氧乙基)核苷酸侧接的IO个脱氧核苷 酸区域的寡核苷酸比较，缺口加宽的寡核苷酸具有相似或改善的效力， 而没有寡核苷酸在肝中的积聚增加。因此，本专利技术的实施方案包括靶向 GCCR的缺口加宽的寡核苷酸，其中效力与具有相同序列但包含在5，和 3，末端上都与5个2，-0- (2-甲氧乙基)核苷酸侧接的10个脱氧核苷酸 的区域的寡核苷酸相似或更佳，而没有寡核苷酸在靶组织中的积聚增 加。本专利技术的另一个实施方案包括靶向GCCR的缺口加宽的寡核苷酸， 其中所述寡核苷酸的肾浓度相对于具有相同序列但包含在5'和3'末端 上都与5个2，-0- (2-曱氧乙基)核苷酸侧接的IO个脱氧核苷酸的区域 的寡核苷酸相似或降低，同时维持或改善在靶组织例如肝中的效力。进一步提供了调节细胞、组织或动物中的GCCR表达的方法，所述 方法包括使所述细胞、组织或动物与本专利技术的一种或多种化合物或组合 物接触。例如，在一个实施方案中，本专利技术的化合物或组合物可以用于 减少细胞、组织或动物中的GCCR表达。在一个实施方案中，本专利技术提供了治疗动物中由糖皮质激素表达介 导的疾病或状况的方法，所述方法包括使动物与有效量的本专利技术的化合 物接触。所述疾病或状况包括糖尿病、2型糖尿病、肥胖、代谢综合征 X、高血糖症、高脂血症或肝脂肪变性。在某些实施方案中，高脂血症 与升高的脂质例如血胆固醇或升高的血甘油三酯相关。血脂包括血浆脂 质和血清脂质。进一步提供了通过施用本专利技术的化合物降低血脂水平的 方法，减少体脂量的方法，降低肝脏甘油三酯水平的方法，和改善动物 中的胰岛素敏感性的方法。还提供了降低动物中的血糖水平的方法，所述方法包括施用本专利技术 的化合物。血糖水平可以是空腹或餐后葡萄糖水平，并且血糖水平包括 血清或血浆葡萄糖水平。进一步提供了增加胰岛素敏感性和抑制肝葡萄 糖排出的方法。本专利技术的另 一个方面是通过施用本专利技术的化合物延迟或预防动物中的血脂或血糖水平开始增加的方法。本申请还与整体引入作为参考的美国申请号60/718，684相关。本申 请还与各自整体？I入本文作为参考的美国申请号11/231,243和PCT申请 号PCT/US2005/033837相关。详述概述本文公开了用于在编码GCCR的核酸分子表达调节中使用的寡聚 化合物，包括反义寡核普酸和其他反义化合物。这通过提供与一种或多 种编码GCCR的靶核酸分子杂交的寡聚化合物来完成。依照本专利技术的是用于调节GCCR (也称为糖皮质激素受体；细胞核 受体亚家族3，组C,成员1; GR; GRL; NR3C1)表达的组合物和方 法。表1中列举了可以用于设计靶向GCCR的寡聚化合物的序列的 GENBANK⑧登记号。本专利技术的寡聚化合物包括与表1中所示的一种或 多种靶核酸分子杂交的寡聚化合物，以及与编码GCCR的其他核酸分子 杂交的寡聚化合物。寡聚化合物可以靶向编码GCCR的核酸分子的任何区域、片段或位 点。合适的靶区域、片段和位点包括但不限于，5'UTR、起始密码子、 终止密码子、编码区、3，UTR、 5'帽区、内含子、外显子、内含子-外显 子连接处、外显子-内含子连接处、和外显子-外显子连接处。表l<table>table see original document page 9</column></row><table>活性寡聚化合物将与之杂交的粑核酸上的位置在下文中被称为"验 证的靼片段"。如本文所使用的，术语"验证的耙片段"被定义为活性寡聚化合物所耙向的輩巴区域的至少8个核碱基的部分。尽管不希望被理 论束缚，但目前认为这些靶片段代表容易进行杂交的靶核酸的部分。本专利技术包括是嵌合化合物的寡聚化合物。嵌合化合物的例子是具有由非脱氧核苷酸区域或"翼"侧接的2'个脱氧核苷酸区域或"缺口"的 缺口聚体。尽管不希望被理论束缚，但缺口聚体的缺口提供了当与RNA 靶结合时可由RNA酶H识别的底物，而翼不是最佳底物但可以赋予其 他性质，例如促成双链体稳定性或有利的药代动力学效应。每个翼可以 是一种或多种非脱氧寡核苷酸单体。在一个实施方案中，缺口聚体包含 在5，和3'末端中的每一个上由2个2，-0- (2-甲氧乙基)核苷酸的翼侧 接的16个2'个脱氧核苷酸的区域。这被称为2-16-2缺口聚体。因此， 这种嵌合寡聚化合物或缺口聚体的"基序"是2-16-2。在另一个实施方 案中，所有核苷间键都是硫代磷酸酯键。在另一个实施方案中，缺口聚 体的胞嘧啶是5-曱基胞嘧啶。本专利技术的实施方案包括包含长度为13-26个核苷酸的序列的寡聚 化合物，所述序列包含在5，和3'末端的每一个上与至少一个2，-0- (2-曱氧乙基)核普酸侧接，长度超过10个核碱基的脱氧核苷酸区域。优 选的"缺口加宽的"寡核苷酸在寡核苷酸的缺口部分中包含11个、12 个、13个、14个、15个、16个、17个或18个脱氧核苷酸。优选的5， 和3，侧翼区包含1个、2个、3个或4个2，-0- (2-甲氧乙基)核苷酸。 优选的缺口加宽的缺口聚体具有包括1-18-1、 1-17-2、 2-17-1、 2-16-2、 3-14-3和4-12-4的基序。在优选实施方案中，寡聚化合物粑向GCCR RNA或与GCCR RNA 杂交。在另一个实施方案中，寡聚化合物减少GC本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种长度为２０个核碱基的反义寡核苷酸，所述寡核苷酸靶向编码ＧＣＣＲ的核酸分子，并且包含ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：３４、３３、３５、３６、３７、４２、４５、５６、６１、６３或９６的至少８个核碱基的部分，其中所述寡核苷酸包含长度为１２个、１３个、１４个、１５个、１６个、１７个或１８个核碱基的脱氧核苷酸区域，所述脱氧核苷酸区域在其５’和３’末端上与１－４个２’－Ｏ－（２－甲氧乙基）核苷酸侧接，并且其中所述寡核苷酸与ＧＣＣＲ特异性杂交且减少ＧＣＣＲ的表达。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：BP莫尼亚，R麦凯，SM弗赖尔，S巴诺特，L沃茨，
申请(专利权)人：强生医药研究及开发有限责任公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]