一种多肽及其应用制造技术

一种多肽及其应用，本发明专利技术之多肽，含有序列为Pro‑Gly‑Ala‑Asp或Asp‑Ala‑Gly‑Pro的连续氨基酸残基片段。可按照其序列结构采用多肽合成仪合成，也可从天然植物三七、槐花、芦荟和\或白芨中提取获得。本发明专利技术之多肽具有促进小鼠干细胞和血管祖细胞迁移并向血管内皮细胞定向分化的作用，从而促进血管内皮细胞的损伤修复、促进新生血管的形成。将其制备成皮肤喷剂，能促进伤口愈合、防治炎症；制备成仔猪口服液，能促进仔猪肠绒毛再生和修复，从根本上实现仔猪腹泻疾病的预防和根治；制备成动物用饲料添加剂，能抗腹泻和促生长；制备成母猪子宫灌注剂，能促进母猪产后伤口快速愈合，有效防治母猪炎症。

【技术实现步骤摘要】
一种多肽及其应用本申请属分案申请。原申请申请日：2016年07月07日，申请号：201610528672.9，专利技术名称：一种多肽及其应用。
本专利技术涉及一种多肽及其应用。
技术介绍
在养猪生产中，所有猪出生后都需要断脐，大部分仔猪都会断尾，一半的猪需要去势，同时要面临合群争斗、咬尾，机械损伤，疝气、脱肛缝合手术等。若养猪生产中不及时对产生的伤口进行处理，将引起细菌、病毒等病原体的感染，可引发局部炎症、红肿以及并发病症，从而影响猪生长性能、胴体质量下降甚至造成死亡。尤其母猪产后伤口不及时处理，往往易引发母猪子宫炎、阴道炎等炎症，造成屡配不孕，孕后流产，发情时或配种前流脓等现象，直接危害种猪群的正常生产，增加种猪的淘汰率，降低种猪群的利用率。目前，大多数猪场对于猪的小伤口不处理，有的猪场甚至阉猪、去势、缝肛、断尾、断脐时也不会对伤口进行处理，大部分猪场处理伤口也就是用碘酒、酒精甚至红花油消消毒。碘酒、酒精、红花油有消毒的作用，但同时对伤口有刺激作用，引起疼痛，并有阻碍伤口愈合的作用。还有的猪场在仔猪阉割后把抗生素撒在伤口上，能起到杀菌的作用，但并没有促进伤口快速愈合的作用，往往导致猪群疾病感染率高，抵抗力差，生长受阻。控制母猪产后炎症是养猪生产中关键环节之一，其关系到整个猪场的生产效率和生产力。母猪产后子宫和产道都有不同程度的损伤，病原微生物极易入侵和繁殖，多数猪场采用注射抗生素或灌注抗生素类药物进行母猪产后伤口处理，但随着细菌耐药性的产生，该法难以取得十分显著的效果，而且抗生素类药物并不能快速促进伤口愈合，伤口愈合时间越长，其感染炎症的几率则越高，目前抗生素类药物已难以根本上解决母猪产后炎症等问题。另一方面，仔猪腹泻作为养猪生产中高发病之一，是影响仔猪生长性能和仔猪成活率的重要因素之一。它具有病原种类繁多,病情复杂，高死亡率、发病持续时间长、治愈率低、反复发作等特点。从病理特征分析，不同病因引起的仔猪腹泻均伴有肠道上皮组织受损、肠绒毛脱落、小肠上皮吸收障碍等病征，从而导致肠道内积聚大量水分和电解质，粪便呈松软或液状排出。目前针对仔猪腹泻的防治，主要是从收敛和抗菌两个方面入手，很难达到有效控制和完全治愈的效果，尤其使用抗生素易产生耐药性、降低猪群生长性能等。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是，克服现有技术的不足，提供具有促进伤口快速愈合、预防伤口感染引起的炎症发生、快速恢复和治愈肠道损伤，防治仔猪腹泻的多肽及其应用。本专利技术解决其技术问题采用的技术方案是，本专利技术之多肽，含有序列为Pro-Gly-Ala-Asp或Asp-Ala-Gly-Pro的连续氨基酸残基片段。所述多肽优选由7-15个氨基酸残基组成。所述多肽，优选包括以下（1）~(10)表示的任意一种氨基酸序列：（1）Ala-Met-His-Thr-Pro-Gly-Ala-Asp（2）Met-Lys-Ser-His-Pro-Gly-Ala-Asp-Lys（3）Lys-Pro-Gly-Ala-Asp-Met-His-Ser-Asp（4）Met-Ser-His-Pro-Gly-Ala-Asp-Lys-Lys（5）Lys-Met-Asp-Met-His-Pro-Gly-Ala-Asp-Ser（6）Leu-Leu-Asp-Ala-Gly-Pro-Ser-His-Met-Ala（7）Met-Arg-Ser-Pro-Gly-Ala-Asp-Lys-Leu-Lys-Lys（8）Val-Ala-His-Ser-Pro-Gly-Ala-Asp-Ala-Leu-Glu-Gly-Lys-Leu（9）Ala-Val-Met-His-Ser-Pro-Gly-Ala-Asp-Leu-Ile(10)Asp-Phe-Leu-Ala-Met-His-Ser-Pro-Gly-Ala-Asp-Leu-Tyr-Trp-Ala。本专利技术所述多肽可按照其序列结构采用多肽合成仪合成。所述多肽可从天然植物三七、槐花、芦荟和\或白芨中提取获得。从天然植物三七、槐花、芦荟和\或白芨中提取所述多肽的方法，包括以下步骤:（1）将植物原料三七根、或植物槐的花蕾或花朵、或芦荟叶、或白芨根茎、或其组合，切碎，匀浆，加入相当于植物原料体积5-10倍的0.04-0.06moL/L的pH为7.5-8.5的Tris-Hcl缓冲溶液，超声处理3~5min，离心去渣，取上清液，即植物蛋白粗提液；（2）将步骤（1）所得植物蛋白粗提液用硫酸铵沉淀，1-4℃下放置过夜，然后离心，取沉淀，冷冻干燥，获得植物蛋白粗粉；（3）取植物蛋白粗粉，用蒸馏水溶解，用4-5mol/L的NaOH溶液调节pH为7.5-8.0，加入相当于植物蛋白粗粉重量0.5-1‰的复合酶组合物，所述复合酶组合物为碱性蛋白酶和中性蛋白酶按质量比1:1-1:3混合；置于50-55℃恒温水浴锅中，酶解2.5-4h，酶解结束,将酶解液煮沸3~5min进行灭酶处理；然后冷却至室温，离心，取上清液，即得多肽粗提液；（4）取多肽粗提液，用葡聚糖凝胶SephadexG25进行凝胶柱层析，用0.04-0.05moL/L的pH为7.5-8.0的Tris-Hcl缓冲溶液洗脱，分段收集洗脱液，并对各部分洗脱液的生物活性进行测定；（5）收集具有活性的洗脱液部分，用反相高效液相色谱进一步纯化，获得高纯度的多肽。所述多肽有效浓度极低，配制成水溶液，皮肤喷剂、口服液及子宫灌注剂中多肽的有效浓度为5-15μg/mL。所述多肽制备成皮肤喷剂，具有促进伤口快速愈合的功效，有效降低伤口感染的风险；制备成口服液，能促进仔猪肠绒毛再生和修复，实现仔猪腹泻疾病的有效防治，能在3-5天内快速治愈仔猪腹泻且不再复发；制备成母猪子宫灌注剂，能促进母猪产后伤口快速愈合，有效防治母猪炎症。还可用于人皮肤外用，用于缓解皮肤炎症、真菌感染皮肤疾病及促进皮肤伤口快速愈合。所述多肽作为饲料添加剂添加到饲料中应用，具有促进动物生长和有效预防腹泻的作用。在动物饲料中应用，动物用饲料中多肽有效含量为1~30μg/kg。本专利技术经过对上千种植物进行筛选，发现三七、槐花、芦荟和白芨中含有的多种结构序列的多肽物质具有促进小鼠干细胞和血管祖细胞迁移并向血管内皮细胞定向分化的作用，从而促进血管内皮细胞的损伤修复，促进新生血管的形成。将其制备成皮肤喷剂，具有促进伤口愈合、防治炎症的作用，制备成仔猪口服液，具有促进仔猪肠绒毛再生和修复的作用，从根本上实现仔猪腹泻疾病的预防和根治。本专利技术具有以下积极效果：一是所述多肽可人工合成，生产成本低，可广泛应用和开发；二是所述多肽作用机理明确，具有巨大的药用开发潜力；三是所述多肽皮肤喷剂用于猪群伤口治愈，效果十分显著，能减少猪群疾病感染风险，大大提高猪场生产水平；四是所述多肽子宫灌注剂能快速促进母猪产后子宫伤口愈合，有效减少母猪炎症的发生，提高种猪利用率，提高猪场的生产效率；五是所述多肽口服液，具有促进仔猪肠绒毛修复和再生的作用，能有效防治仔猪腹泻，提高仔猪成活率和生长性能，提升猪场经济效益；六是所述多肽有效浓度极低，使用成本低。而且该多肽为天然植物中发现，具有绿色安全、高效、无耐药性、无残留、无毒副作用的特点。附图说明图1和图2为实施例3中植物多肽促进小鼠血管祖细胞迁移试验中观察计算穿过0.8微米膜的迁本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多肽，其特征在于，其氨基酸序列为：Asp‑Phe‑Leu‑Ala‑Met‑His‑Ser‑Pro‑Gly‑Ala‑Asp‑Leu‑Tyr‑Trp‑Ala。

【技术特征摘要】
1.一种多肽，其特征在于，其氨基酸序列为：Asp-Phe-Leu-Ala-Met...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡国田，曾灵芳，胡瑕，隆曙红，袁朔烈，杨强，
申请(专利权)人：胡国田，曾灵芳，
类型：发明
国别省市：湖南,43