【技术实现步骤摘要】
一种快速分析和检测内生真菌中紫杉醇,巴卡亭Ⅲ和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量的方法
本专利技术涉及检测
技术介绍
高效液相色谱(Highperformanceliquidchromatograph,HPLC)和质谱(Massspectrum,MS)是分析和检测小分子物质的常用手段和方法。目前,对紫杉醇、巴卡亭Ⅲ和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的分析和含量测定主要是分别建立分离和分析紫杉醇,巴卡亭Ⅲ和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的HPLC法,以及基于此基础上的高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)。利用该方法,对上述3种物质分别进行分析检测和含量分析,其特点是操作繁琐,工作量大,化学试剂消耗量及花费较大。此外,研究工作中,需要对红豆杉中紫杉醇的合成代谢途径中的紫杉醇,巴卡亭Ⅲ和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ进行分析和检测,特别是在筛选产紫杉醇、巴卡亭Ⅲ和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的内生真菌,也需要对上述3种物质进行分析和检测。目前,尚未建立一种通过一步操作,能对上述3种物质进行分析和检测的技术。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种能同时分析和检测紫杉醇、巴卡亭和巴卡亭Ⅲ的技术。本专利技术 ...
【技术保护点】
一种快速分析和检测内生真菌中紫杉醇、巴卡亭Ⅲ和10‑去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量的方法,其特征在于,步骤为:(1)首先制备内生真菌提取液;(2)经高分辨质谱分析,证实提取液中是否含有紫杉醇和/或巴卡亭Ⅲ和/或10‑去乙酰巴卡亭Ⅲ;(3)含有紫杉醇和/或巴卡亭Ⅲ和/或10‑去乙酰巴卡亭Ⅲ的提取液用HPLC分离和分析,得到提取液中紫杉醇和/或巴卡亭Ⅲ和/或10‑去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量。
【技术特征摘要】
1.一种快速分析和检测内生真菌中紫杉醇、巴卡亭Ⅲ和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量的方法,其特征在于,步骤为:(1)首先制备内生真菌提取液;(2)经高分辨质谱分析,证实提取液中是否含有紫杉醇和/或巴卡亭Ⅲ和/或10-去乙酰巴卡亭Ⅲ;(3)含有紫杉醇和/或巴卡亭Ⅲ和/或10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的提取液用HPLC分离和分析,得到提取液中紫杉醇和/或巴卡亭Ⅲ和/或10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量。2.根据权利要求1所述的快速分析和检测内生真菌中紫杉醇、巴卡亭Ⅲ和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量的方法,其特征在于,所述内生真菌提取液的提取方法为:将纯化的内生真菌接种于PDA平板培养基上培养以活化菌株;活化后接种于装有250mL的YES液体培养基的500mL三角瓶中,置于AW-211C大容量恒温培养震荡器中,于28...
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