一种坦西莫司中间体的分析检测方法技术

本发明专利技术涉及一种坦西莫司中间体的分析检测方法，用于坦西莫司中间体的质量控制，是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱(C18，4.6×250mm，5μm)，以甲醇和磷酸二氢铵溶液体系为流动相，以检测波长为277±5nm，进行高效液相色谱法分析检测。本发明专利技术的分析检测方法具有分离度高，线性关系良好，分析时间短，操作简便，耐用性好，分析方法稳定可靠的优点。

【技术实现步骤摘要】
一种坦西莫司中间体的分析检测方法
本专利技术涉及一种高效液相色谱分析方法，尤其是一种坦西莫司中间体的分析检测方法。
技术介绍
坦西莫司是首个哺乳动物靶蛋白抑制剂靶向治疗肾癌的药品，是已上市唯一可特异性抑制mTOR激酶(细胞内调节细胞增生、细胞生长和细胞存活的关键蛋白质)的药品。(3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-十六氢-9-三甲基硅氧基-27-羟基-3-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4羟基-3-甲氧环己基]-1-甲基乙基]-10,21-二甲氧基-6,8,12,14,20,26-六甲基-23,27-环氧-3H-吡啶并[2,1-c][1,4]-氧杂氮杂三十一环烯-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-戊酮-4’-(2,2,5-三甲基-1,3-二氧六环-5-甲酸酯)是合成坦西莫司的重要中间体，其分子式为C62H99NO16Si，分子量1142.53，结构式如下：到目前为止，USP、EP、BP、JP以及中国药典和文献中均没有记载坦西莫司中间体的分析检测方法，但坦西莫司中间体的分析检测对反应控制和收率提高有着重要的作用，同时也直接影响着终产品的质量，所以建立一种快速有效的分析检测方法对坦西莫司中间体进行质量控制是非常必要的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种坦西莫司中间体的分析检测方法，用于坦西莫司中间体的质量控制。该方法具有分离度高，线性关系良好，操作简单，分析时间短，耐用性好，结果稳定可靠的优点。为了实现本专利技术的目的，专利技术人通过大量试验，最终获得如下技术方案：一种坦西莫司中间体的分析检测方法，是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱(C18，4.6×250mm，5μm)，以甲醇和磷酸二氢铵溶液体系为流动相，以检测波长为277±5nm，进行高效液相色谱法分析检测。所述的甲醇和磷酸二氢铵溶液体系是由甲醇和0.01～0.03mol/L的磷酸二氢铵溶液按体积比70～90:30～10形成流动相。进一步地，甲醇和磷酸二氢铵溶液体系优选为甲醇和0.02mol/L的磷酸二氢铵溶液按体积比90:10形成流动相。本专利技术所述的分析检测方法，可通过以下步骤实现：A、取坦西莫司中间体样品适量，采用流动相溶解，配制成每1mL含坦西莫司中间体0.2～1.4mg的样品溶液；B、设置流动相流速为0.6～1.2mL/min，检测波长277±5nm，柱温为55～65℃；C、取A的样品溶液10μL注入液相色谱仪，完成坦西莫司中间体的分析检测；其中：高效液相色谱仪：Agilent1200液相色谱系统；色谱柱：Waters，SymmetryC18(4.6×250mm，5μm)；流动相：甲醇和0.02mol/L的磷酸二氢铵溶液按体积比90:10形成流动相；检测波长：277nm；柱温：60℃；流速：1.0mL/min。本专利技术涉及的分析检测方法，可以有效的将坦西莫司中间体及其异构体和杂质分开，且分离度高达3.66，能够完全基线分离。选择流动相溶解样品，确保了溶液的稳定性；选择进样体积10μL，提高了色谱峰的对称性。该方法操作简单，线性关系良好，分析时间短，耐用性好，结果稳定可靠，从而可用于坦西莫司中间体的质量控制，为最终成品的质量提供有效保障。附图说明图1实施例1的坦西莫司中间体HPLC图谱。图2实施例2的坦西莫司中间体HPLC图谱。图3实施例3的坦西莫司中间体HPLC图谱。图4实施例5的坦西莫司中间体线性工作曲线。具体实施方式以下是本专利技术的具体实施例，对本专利技术的技术方案做进一步描述，但是本专利技术的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本专利技术构思的改变或等同替代均包括在本专利技术的保护范围之内。实施例1仪器与条件：Agilent1200液相色谱系统，VWD检测器，色谱柱：Waters，SymmetryC18(4.6×250mm，5μm)；检测波长：277nm；柱温为60℃；流速1.0mL/min；以甲醇和0.02mol/L的磷酸二氢铵溶液按体积比90:10作为流动相。实验步骤：将坦西莫司中间体用流动相溶解并定量稀释制成每1mL中含坦西莫司中间体1.0mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液10μL注入液相色谱仪，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见附图1。附图1中1号峰为坦西莫司中间体，2号峰为其异构体。可以看出，在该色谱条件下，坦西莫司中间体主峰可以和异构体完全分离开来，且坦西莫司中间体主峰在9.4min左右。因此利用该色谱条件能将坦西莫司中间体的各峰很好的分离，且分析时间短(40min内完成)，操作简单，从而可以用于坦西莫司中间体的质量控制。实施例2仪器与条件：Agilent1200液相色谱系统，VWD检测器，色谱柱：Waters，SymmetryC18(4.6×250mm，5μm)；检测波长：277nm；柱温为55℃；流速0.6mL/min；以甲醇和0.01mol/L的磷酸二氢铵溶液按体积比70:30作为流动相。实验步骤：将坦西莫司中间体用流动相溶解并定量稀释制成每1mL中含坦西莫司中间体1.0mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液10μL注入液相色谱仪，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见附图2。附图2中1号峰为坦西莫司中间体，2号峰为其异构体。可以看出，在该色谱条件下，坦西莫司中间体主峰可以和异构体完全分离开来，且坦西莫司中间体主峰在11.3min左右。因此利用该色谱条件能将坦西莫司中间体的各峰很好的分离，且分析时间短(40min内完成)，操作简单，从而可以用于坦西莫司中间体的质量控制。实施例3仪器与条件：Agilent1200液相色谱系统，VWD检测器，色谱柱：Waters，SymmetryC18(4.6×250mm，5μm)；检测波长：277nm；柱温为65℃；流速1.2mL/min；以甲醇和0.03mol/L的磷酸二氢铵溶液按体积比80:20作为流动相。实验步骤：将坦西莫司中间体用流动相溶解并定量稀释制成每1mL中含坦西莫司中间体1.0mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液10μL注入液相色谱仪，按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见附图3。附图3中1号峰为坦西莫司中间体，2号峰为其异构体。可以看出，在该色谱条件下，坦西莫司中间体主峰可以和异构体完全分离开来，且坦西莫司中间体主峰在9.9min左右。因此利用该色谱条件能将坦西莫司中间体的各峰很好的分离，且分析时间短(40min内完成)，操作简单，从而可以用于坦西莫司中间体的质量控制。实施例4系统适应性实验仪器与条件：Agilent1200液相色谱系统，VWD检测器，色谱柱：Waters，SymmetryC18(4.6×250mm，5μm)；检测波长：277nm；柱温为60℃；进样体积10μL；流速1.0mL/min；以甲醇和0.02mol/L的磷酸二氢铵溶液按体积比90:10作为流动相。实验步骤：取本品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1mL中约含1.0mg的溶液，作为供试品溶液。取供试品溶液，连续进样六次，分别计算坦西莫司中本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种坦西莫司中间体的分析检测方法，采用高效液相色谱法进行分析检测，其特征在于包括以下步骤：A、取坦西莫司中间体样品适量，采用流动相溶解，配制成每1mL含坦西莫司中间体0.2～1.4mg的样品溶液；B、设置流动相流速为0.6～1.2mL/min，检测波长277±5nm，柱温为55～65℃；C、取A的样品溶液10μL注入液相色谱仪，完成坦西莫司中间体的分析检测；其中，色谱柱：C18，4.6×250mm，5μm；流动相：甲醇和0.01～0.03mol/L的磷酸二氢铵溶液按体积比70～90:30～10作为流动相。

【技术特征摘要】
1.一种坦西莫司中间体的分析检测方法，采用高效液相色谱法进行分析检测，其特征在于包括以下步骤：A、取坦西莫司中间体样品适量，采用流动相溶解，配制成每1mL含坦西莫司中间体0.2～1.4mg的样品溶液；B、设置流动相流速为0.6～1.2mL/min，检测波长277±5nm，柱温为55～65℃；C、取A的样品溶液10μL注入液相色谱仪，完成坦西莫司中间体的分析检测；其中，色谱柱：C18，4.6×250mm，5...

【专利技术属性】
技术研发人员：张贵民，
申请(专利权)人：山东新时代药业有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37